银杏叶提取物对mpp+诱导的中脑多巴胺能神经细胞损伤的保护作用

《银杏叶提取物对mpp+诱导的中脑多巴胺能神经细胞损伤的保护作用 》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、银杏叶提取物对MPP+诱导的中脑多巴胺能神经细胞损伤的保护作用奚淑芳,陈建宗,王百忍,杨浩,高建苑,田季雨,康小刚【关键词】帕金森病ProtectiveeffectofEGB761onembryonicratmesencephalicdopaminergicneuronsinvitrofromMPP+inducedinjury　　【Abstract】AIM:Toexplorebryonicratmesencephalicdopaminergic(DAergic)neuronsfromMPP+inducedinjury.METHODS

2、:PrimarilyculturedcellsembryonicratmesencephalonandthecellsesencephalicprimarycellsandDAergicneuronsberoftyrosinehydroxylase(TH)positivecellsmunocytochemistry.Thelevelofnitricoxide(NO)munocytochemistryforinduciblenitricoxidesynthase(iNOS).RESULTS:ThenumberofTHpositivec

3、ellsandtheviabilityofmesencephaliccellssignificantlydecreasedberofiNOScellsincreasedinthedevelopmentofapoptosisinducedbyMPP+.TheaddingofEGB761significantlyreversedthesechangescausedbyMPP+.CONCLUSION:EGB761canprotectembryonicratmesencephalicDAergicneuronsagainstMPP+indu

4、cedapoptoticdeathinadosedependentmanner.　　【Keyesencephalic;cells,cultured;Parkinsonsdisease;1methyl4phenylpyridiniumion　　【摘要】目的：探讨银杏叶提取物（EGB761）对1甲基4苯基吡啶离子（MPP+）诱导的帕金森病细胞模型是否具有保护作用.方法：采用胚胎大鼠中脑原代细胞培养法，分离培养中脑神经细胞，随后进行EGB761及MPP+处理，最后通过3(4,5二甲基噻唑2)2,5二苯基四氮唑溴盐（MTT）微量比色法，酪氨

5、酸羟化酶（TH）免疫细胞化学，研究EGB761对MPP+损伤后的中脑原代培养细胞及DA能神经细胞活性的影响，同时进行iNOS免疫细胞化学法，了解iNOS的表达情况.结果：在MPP+诱导的中脑原代细胞凋亡中，MPP+组TH阳性细胞数及细胞存活率均显著低于各EGB761组及阳性对照组(P0.01).而iNOS的表达则显著多于各EGB761组（P0.01）.结论：EGB761对MPP+诱导的胚胎大鼠中脑原代培养细胞损伤具有保护作用，且此作用有随剂量的增大而增加的趋势.　　【关键词】银杏叶;植物；提取物；中脑；细胞，培养的；帕金森病；1甲基

6、4苯基吡啶离子　　0引言　　帕金森病（Parkinsonsdisease,PD）是以中脑黑质致密带多巴胺（dopamine,DA）能神经元变性、脱失为主要特征的神经系统变性疾病.其机制可能与黑质纹状体氧化应激反应增强和局部抗氧化保护机制减弱有关.目前，PD的治疗仍以症状治疗为主，还没有一种治疗能够延缓其病情的进展.最近的研究发现，银杏叶提取物(EGB761)具有清除自由基和过氧化脂质、对抗兴奋性神经递质的释放、拮抗血小板活化因子等多种药理活性〔1〕，临床已广泛用于心脑血管疾病及老年痴呆症的治疗.但是EGB761对中脑原代培养的DA能

7、神经元活性及其代谢影响的报道甚少.我们在前人研究的基础上，观察EGB761对1甲基4苯基吡啶离子(MPP+)诱导损伤的胚胎大鼠中脑原代细胞的作用，旨在了解EGB761对DA能神经元的影响，探讨其防治PD的可能性.　　1材料和方法　　1.1材料　　孕16dSD大鼠，由第四军医大学实验动物中心提供；EGB761（商品名金纳多注射液,17.5mg/支）为德国威玛舒培博士药厂产品；酪氨酸羟化酶一抗（小鼠抗大鼠）、多聚赖氨酸等购自Sigma公司；3(4,5dimethylthiazol2yl)2,5diphenyltetrazoliumbro

8、mide(MTT)、胎牛血清购自Gibco公司；iNOS一抗（兔抗大鼠）为SantaCruz产品；神经生长因子（NGF）为Promage公司产品；SABC试剂盒为武汉博士德公司产品.　　1.2方法　　1.2.1中脑神经细胞的培养　　2