瓜馥木化学成分及其抗肿瘤活性研究

《瓜馥木化学成分及其抗肿瘤活性研究 》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、瓜馥木化学成分及其抗肿瘤活性研究【摘要】目的研究瓜馥木的化学成分，寻找抗肿瘤的活性成分。方法采用硅胶柱色谱技术进行分离纯化，运用波谱法进行结构解析，并进行体外抗肿瘤活性筛选。结果从瓜馥木根的乙醇提取物中分离得到1个化合物，经理化常数和波谱(EI²MS，1H²NMR，13C²NMR)分析，鉴定为马兜铃内酰胺AⅡ，化合物马兜铃内酰胺AⅡ对肺腺癌GLC²82、白血病细胞株HL60的细胞株的IC50分别为：234.35，101.17μmol·L-1。结论马兜铃内酰胺AⅡ生物碱化合物具有一定的抗肿瘤活性。【关键词】瓜馥木化学成分分离和提纯马兜铃内酰胺A

2、Ⅱ抗肿瘤活性瓜馥木Fissistigmaoldhamii（Hemsl.）Merr.为番荔枝科（Annonaceae）瓜馥木属(Fissistigma)植物，根入药，性温味辛，具有祛风除湿、镇痛消肿、活血化淤等功效，主要用于跌打损伤、关节炎及坐骨神经痛的治疗〔1〕。为寻找反映瓜馥木中抗炎、镇痛活性特征成分，我们对瓜馥木化学成分进行了系统研究，已报道O-甲基芒籽碱(O-methyl-moschtaoline)、酸花木碱(毛叶含笑碱，oxylopine)、氧代克斑宁(7-oxocrebanine)和胡萝卜苷(daucosterol)等成分的研究〔2〕。本文报道另一个化合物的分离和结构鉴定

3、，并探讨该化合物对肺腺癌GLC-82及HL60白血病细胞株的抗肿瘤活性。　　1仪器与材料　　显微熔点测定仪(温度计未校正)；AB-HS型质谱仪；DRX-400型超导核磁共振仪，TMS为内标。3164型二氧化碳培养箱(美国FORMA公司)；比色采用ThermoLabsystemsMultiskanMK3全自动酶标仪。　　药材采于江西，由江西中医学院赖学文副教授鉴定为瓜馥木Fissistigmaoldhamii（Hemsl.）Merr.，标本存于广东医学院药学教研室。　　2方法与结果　　2.1提取与分离瓜馥木根药材经粉碎后用乙醇加热回流提取（3h×3次），合并滤液，减压浓缩得总浸膏59

4、0g。浸膏用5%HCl捏溶处理后其酸不溶性部分用蒸馏水洗至中性，用水分散均匀，依次用石油醚、氯仿、醋酸乙酯进行提取，回收溶剂得石油醚部分33.2g，氯仿部分63g，醋酸乙酯部分45.4g。氯仿部分反复进行硅胶柱色谱，以三氯甲烷-甲醇为洗脱剂，得马兜铃内酰胺AⅡ化合物(15mg)。　　2.2结构鉴定采用化学和光谱的方法进行结构鉴定。该化合物与生物碱试剂反应呈阳性，推测该化合物为生物碱。EI-MS给出分子离子m/z265(M+,100)，结合1H-NMR、13C-NMR，推断分子式为C16H11NO3。UVλMeOHmaxnm:230,265,277；IRKBrmaxcm-1：3450

5、，3251（羟基，NH），1691，1656(羰基)，1614，1502(苯环)；EI-MS谱：265(M+,100)，250(M+-CH3,51)，222(M+-CH3-CO,18)，UV，IR，EI-MS的特征显示该化合物属于马兜铃内酰胺类成分〔3〕。1H-NMR显示在δ4.04(3H,s)为一甲氧基信号；δ7.08～9.26ppm处有6个芳香质子信号，其中δ9.26（1H,m），7.49（2H,m），7.77（1H,m）显示出未取代的D环有4氢，H-5由于受3个环的去屏蔽作用，出现在最低场的δ9.26ppm处，可知δ7.49（2H,m）为H-6,H-7，δ7.77（1H,m）

6、为H-8；δ7.08（1H,s）及7.68（1H,s）二个孤立芳香质子信号显示A、C环上各有一孤立芳香质子，因此，A环中有两个芳香质子被取代。13C-NMR显示在δ171.8ppm处为内酰胺羰基信号,在δ150.7～107.1有14个芳碳信号，DEPT显示有9个季碳、6个叔碳信号，δ57.4处为甲氧基。该化合物的UV，IR，1H-NMR，13C-NMR，EI-MS数据与文献〔3，4〕中的马兜铃内酰胺AⅡ（AristolactamAⅡ）数据基本一致。因此，该化合物被鉴定为AristolactamAII，结构式见图1。　　图1瓜馥木中各化合物结构式（略）　　　2.3样品体外培养抗肿瘤作

7、用实验　　2.3.1实验分组实验分为①空白组：每孔仅为1640培养液，在测光密度值（OD值）时用于调“0”；②对照组：每孔为含1640培养液稀释的单细胞悬液；③实验组：又分1.00×103，1.00×102，10.00，1.00，0.10，1.00×10-2μmol·L-1马兜铃内酰胺AⅡ组，即每孔含1640培养液稀释的单细胞悬液和不同浓度马兜铃内酰胺AⅡ。精密称量马兜铃内酰胺AⅡ后用少量DMSO充分溶解，再用1640培养基稀释成不同浓度备用。各组每孔溶液总体积均为2