穴位埋线对氯氮平大鼠下丘脑单胺类神经递质的影响论文

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1、穴位埋线对氯氮平大鼠下丘脑单胺类神经递质的影响论文【摘要】观察穴位埋线对氯氮平大鼠下丘脑单胺类神经递质的影响。【方法】将SD大鼠36只随机分为埋线组、氯氮平组和空白对照组。除空白对照组外，其他2组大鼠均灌胃氯氮平，由5mg·kg-1·d-1渐增至30mg·kg-1·d-1，而后递减至22mg·kg-1·d-1，并维持至实验结束。服用氯氮平60d后埋线组选取两组穴位：①百会、心俞（双）、曲池（双）；②大椎、脾俞（双）、足三里（双），交替埋线，每5d治疗1次，共12次。观察各组大鼠治疗前后体质量变化.f

2、reelmit高效液相色谱仪（HPLC，美国DIONEX公司）；Chromeleon色谱工作站（美国DIONEX公司）；HP1049A电化学检测器（美国安捷伦公司）；RC5C低温高速离心机（美国杜邦公司）；PHS2C精密酸度计（上海理达仪器厂）。色谱柱：DevelosilC30UG5（150mm×4.6mm，5μm，日本NomuraChemicalCo.,Ltd)；流动相为磷酸二氢钾（其中磷酸二氢钾溶液25mmol/L，内含乙二胺四乙酸二钠0.5mmol/L，用磷酸调pH3.4）：乙腈=97：

3、3（体积比），用前经0.45μm滤膜真空抽滤，流速1.5mL/min；玻璃碳工作电极，Ag/AgCl参比电极，检测电位0.6V；柱温30℃，自动进样器温度10℃。1.4动物分组与给药所有动物随机分为3组，每组各12只，即穴位埋线+氯氮平组（简称埋线组）、氯氮平组和空白对照组。穴位埋线组和氯氮平组根据氯氮平的临床剂量通过体表系数换算公式［2］计算出大鼠用药的等效剂量为20～30mg·kg-1·d-1。给药方案如下：氯氮平灌胃由小剂量（5mg·kg-1·d-1）开始，逐渐以5mg·kg-1·d-1为单位

4、增加，每3d增加1次，至剂量为30mg·kg-1·d-1；而后即以1mg·kg-1·d-1为单位递减，每2d减少1次至用药剂量为22mg·kg-1·d-1，并维持剂量用药直至处死动物并取材检测，整个实验周期为4个月。1.5穴位埋线干预服用氯氮平60d后对埋线组进行穴位埋线干预措施，5d埋线1次，共治疗12次，结束实验。按文献［3］选取两组穴位：①百会、心俞（双）、曲池（双）；②大椎、脾俞（双），足三里（双）。两组穴位交替埋线，每5d治疗1次。在埋线组每次治疗的同时，给予氯氮平组、空白对照组每只大鼠抓

5、取15min的刺激。穴位埋线方法：先将1cm医用羊肠线放入2mL注射器的针孔，待穴位局部消毒后绷紧皮肤，将注射器针头刺入穴位，再用已经修剪过的针灸针推入穴位内，后按压针孔止血。1.6样品采集与指标检测实验完毕后断头处死，将大鼠的头在冰冷的生理盐水中漂洗，除去血液，滤纸拭干，立即置于生理盐水的冰盘上取脑组织，迅速分离大鼠的下丘脑，称质量。将下丘脑置玻璃匀浆器中，加入20g/L三氯乙酸溶液（预冷至4℃）500μL，制成匀浆，匀浆液用吸管小心转移入离心管中，用200μLNaH2PO4溶液（0.33mol/

6、L，pH6.0，内含0.5mmol/LNa2EDTA)荡洗匀浆器，洗液并入离心管，混旋均匀，低温高速离心（4℃，12000r/min，15min），取上清液50μL，采用HPLC检测单胺类神经递质5羟色胺（5HT）、多巴胺（DA）的含量。1.7统计学处理所有数据均用SPSS11.0软件处理，组间差异显著性采用t检验和单因素方差分析。组间比较统计方法为最小显著差法（LSD）。2结果2.1一般情况治疗前氯氮平组、埋线组大鼠活动少，睡眠多，食量减少，毛发黄、卷曲，对异性不表现出明显的兴奋行为，大便较少

7、，干燥，略带铁红色；空白对照组活动多，睡眠相对少，食量多，毛色白、顺滑贴于体表，对异性表现出明显的兴奋行为，大便正常。埋线组治疗12次后观察发现大鼠活动增多，睡眠相对少，食量增加，毛色白、顺滑贴于体表，对异性表现出明显的兴奋行为，大便正常。2.2各组大鼠体质量治疗前后比较表1结果显示，穴位埋线治疗前，埋线组、氯氮平组大鼠体质量均显著性增加（P＜0.05）,表明氯氮平长期使用可使体质量增加；而埋线治疗可抑制大鼠体质量的增加，与氯氮平组比较具有显著性差异（P＜0.05）。2.3各组大鼠下丘脑单胺类神经递

8、质的含量比较表2结果显示，氯氮平长期使用可使下丘脑内DA和5HT含量显著性下降（P＜0.05或P＜0.01），而埋线治疗可显著性升高下丘脑中DA和5HT含量（P＜0.05）。3讨论3.1氯氮平副反应与单胺类神经递质氯氮平（clozapine)是非典型的抗精神病药，主要是通过其较强的阻滞5HT2受体的性能而起到抗精神病作用。有学者［4］研究了氯氮平对精神分裂症患者中枢单胺递质系统的影响，发现精神分裂症治疗前与治疗后相比，DA功能相对亢盛，去甲肾上腺素（NE）功能相