穴位埋线对氯氮平大鼠下丘脑单胺类神经递质的影响

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1、穴位埋线对氯氮平大鼠下丘脑单胺类神经递质的影响【摘要】观察穴位埋线对氯氮平大鼠下丘脑单胺类神经递质的影响。【方法】将SD大鼠36只随机分为埋线组、氯氮平组和空白对照组。除空白对照组外，其他2组大鼠均灌胃氯氮平，由5mg·kg-1·d-1渐增至30mg·kg-1·d-1，而后递减至22mg·kg-1·d-1，并维持至实验结束。服用氯氮平60d后埋线组选取两组穴位：①百会、心俞（双）、曲池（双）；②大椎、脾俞（双）、足三里（双），交替埋线，每5d治疗1次，共12次。观察各组大鼠治疗前后体质量变化，并检测下丘脑单胺类神经递质多巴胺（DA）和5羟色胺（5HT）的含量。【结果】长期服用氯

2、氮平可使大鼠体质量显著性增加，DA和5HT含量显著性降低（均P＜0.05或P＜0.01），而穴位埋线治疗可显著性抑制大鼠体质量的增加，升高下丘脑中DA和5HT的含量（P＜0.05）。【结论】穴位埋线减轻氯氮平副作用的机制可能与其能升高下丘脑内单胺类神经递质的含量有关。【关键词】穴位埋线/治疗应用精神障碍/穴位疗法单胺类神经递质疾病模型动物大鼠氯氮平（clozapine)是非典型的抗精神病药，其价格低廉、疗效确切，是临床上治疗难治性精神科疾病的常用药。但长期使用易导致肥胖、血糖血脂异常等一系列的副反应，有报道认为［1］其机理可能与神经递质和神经内分泌有关，抗精神病药物通过抗肾上腺

3、素、阻断多巴胺（DA）受体以及拮抗5羟色胺（5HT）等而引起体质量增加。在临床实验中，我们发现穴位埋线疗法能够改善患者因服用氯氮平而引起的体质量增加，但其具体机制不清楚，查阅中外文献亦尚未发现有学者报道。我们进行了该项实验研究，以期发现穴位埋线疗法改善氯氮平副作用的可能机制。现将结果报道如下。1材料与方法1.1动物清洁级SD大鼠36只，雄性12只（246±12）g，雌性24只（250±9）g，广州中医药大学实验动物中心提供，合格证号为SCXK（粤）20060001。所用饲料为普通全价饲料，由广州中医药大学动物实验中心提供。1.2药物及试剂氯氮平片剂为徐州恩华药业集团有限责任公

4、司生产，批号：20050816；治疗用羊肠线为上海蒲东金环医疗用品有限公司产品，规格：40，标准号：YY911161999；脑组织各项指标由广州中医药大学临床药理教研室负责检验。1.3主要仪器和工作条件DIONEXSummit高效液相色谱仪（HPLC，美国DIONEX公司）；Chromeleon色谱工作站（美国DIONEX公司）；HP1049A电化学检测器（美国安捷伦公司）；RC5C低温高速离心机（美国杜邦公司）；PHS2C精密酸度计（上海理达仪器厂）。色谱柱：DevelosilC30UG5（150mm×4.6mm，5μm，日本NomuraChemicalCo.,Ltd)

5、；流动相为磷酸二氢钾（其中磷酸二氢钾溶液25mmol/L，内含乙二胺四乙酸二钠0.5mmol/L，用磷酸调pH3.4）：乙腈=97：3（体积比），用前经0.45μm滤膜真空抽滤，流速1.5mL/min；玻璃碳工作电极，Ag/AgCl参比电极，检测电位0.6V；柱温30℃，自动进样器温度10℃。1.4动物分组与给药所有动物随机分为3组，每组各12只，即穴位埋线+氯氮平组（简称埋线组）、氯氮平组和空白对照组。穴位埋线组和氯氮平组根据氯氮平的临床剂量通过体表系数换算公式［2］计算出大鼠用药的等效剂量为20～30mg·kg-1·d-1。给药方案如下：氯氮平灌胃由小剂量（5mg·kg-1·d

6、-1）开始，逐渐以5mg·kg-1·d-1为单位增加，每3d增加1次，至剂量为30mg·kg-1·d-1；而后即以1mg·kg-1·d-1为单位递减，每2d减少1次至用药剂量为22mg·kg-1·d-1，并维持剂量用药直至处死动物并取材检测，整个实验周期为4个月。1.5穴位埋线干预服用氯氮平60d后对埋线组进行穴位埋线干预措施，5d埋线1次，共治疗12次，结束实验。按文献［3］选取两组穴位：①百会、心俞（双）、曲池（双）；②大椎、脾俞（双），足三里（双）。两组穴位交替埋线，每5d治疗1次。在埋线组每次治疗的同时，给予氯氮平组、空白对照组每只大鼠抓取15min的刺激。穴位埋线方法：先

7、将1cm医用羊肠线放入2mL注射器的针孔，待穴位局部消毒后绷紧皮肤，将注射器针头刺入穴位，再用已经修剪过的针灸针推入穴位内，后按压针孔止血。1.6样品采集与指标检测实验完毕后断头处死，将大鼠的头在冰冷的生理盐水中漂洗，除去血液，滤纸拭干，立即置于生理盐水的冰盘上取脑组织，迅速分离大鼠的下丘脑，称质量。将下丘脑置玻璃匀浆器中，加入20g/L三氯乙酸溶液（预冷至4℃）500μL，制成匀浆，匀浆液用吸管小心转移入离心管中，用200μLNaH2PO4溶液（0.33mol/L，