g蛋白偶联受体30和磷酸化akt蛋白在子宫内膜腺癌组织中的表达及意义

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1、G蛋白偶联受体30和磷酸化AKT蛋白在子宫内膜腺癌组织中的表达及意义【摘要】目的：对笔者所在医院接受治疗的子宫内膜腺癌患者的生物样本进行实验室研究，分析G蛋白偶联受体30（GPR30）和磷酸化AKT蛋白（P-AKT）在肿瘤组织中表达的意义，并进行二者之间相关性分析。方法：选取2011年-2012年来笔者所在医院接受治疗的子宫内膜腺癌患者180例的活体组织样本和50例正常子宫组织制成蜡块切片，采用EnViSion免疫组化法和FISH法对每个标本中的GPR30和P-AKT进行其相关的基因阳性表达水平进行检测，观察免疫组化评分与FISH检测

2、G蛋白偶联受体30和磷酸化AKT蛋白的高表达与基因扩增之间的重叠率，统计二者在不同的肿瘤组织中表达率，影响二者的表达因素及二者相关性探究。结果：GPR30和P-AKT的免疫组化结果显示其阳性表达与FISH检测结果重叠率分别为74.5%、56.6%，差异显著（P<0.05）；GPR30和P-AKT在正常子宫内膜中阳性表达率均明显低于子宫内膜腺癌内阳性表达率，差异均有统计学意义（P<0.05）；GPR30和P-AKT的表达与患者的年龄、组织分化程度、是否出现淋巴道转移及基层浸润深度有关（P<0.05）；GPR30和P-AKT之间存在明显的

3、相关性，且相关性较好（字2=14.08，P<0.05，Φ=0.2693）。结论：FISH法与EnViSion免疫组化法检测GPR30和P-AKT重叠率较好，GPR30和P-AKT与子宫内膜腺癌之间可能存在因果联系，且CPR30和P-AKT之间能够相互影响，在临床治疗过程中可根据GPR30和P-AKT判断组织分化程度和基层浸润深度，在明确诊断上有一定的意义。中国6/vie　　【关键词】G蛋白；偶联受体；AKT蛋白；宫内膜腺癌；表达及意义　　doi：10.14033/j.ki.cfmr.2017.7.022文献标识码B1674-6805（

4、2017）07-0044-03　　子宫内膜癌属于发生于子宫内的上皮细胞的恶性转化，使得子宫上皮细胞的凋亡机制被抑制，从而使得部分异常子宫内膜细胞无限增殖，进而由于压迫和占位性病变而危及患者生命安全[1-2]。一般绝经期前后女性发生子宫内膜癌的概率较高，也是女性生殖系统的三大癌症同程度的阴道排液、阵发性腹部疼痛及相关身体征象。目前临床上的治疗方法主要有外科手术、放化疗、激素治疗及中医治疗。G蛋白偶联受体30属雌激素受体，与雌激素结合后释放AKT相关因子，使得AKT系统被激活。相关研究指出，AKT系统是促进癌细胞生长的主要系统[3-4]。

5、目前临床上关于AKT信号系统的研究处于白热化阶段，而对与AKT与P-AKT之间的关系描述较少，而且对于GPR30与P-AKT之间关系的研究较少。因此，本文旨在通过对近1年来笔者所在医院接受治疗的子宫内膜腺癌患者的生物样本进行实验室研究分析GPR30和P-AKT在肿瘤组织中表达的意义，并进行二者之间相关性分析。报告如下。　　1资料与方法　　1.1一般资料　　选取自2011年10月25日-2012年10月25日来笔者所在医院接受治疗的子宫内膜腺癌患者180例的活体组织样本和50例正常子宫组织制成蜡块切片。子宫内膜腺癌患者活体组织样本中增生

6、期内膜40例，子宫内膜增殖症34例，子宫内膜样腺癌106例。患者年龄31～68岁，平均（46.8±10.2）岁。所有患者均为初治患者，且有明确的生存信息和临床分期，所有患者手术切除的新鲜肿瘤标本经中性福尔马林固定后石蜡包埋，制成蜡块保存。所有样本均由两名以上专业病理医师确诊，排除其他恶性肿瘤并发，排除继发患者，排除其他重大疾病的患者。　　1.2方法　　标本采集时应用FISH法检测并记录数据。应用EnViSion免疫组化二步法检测患者肿瘤组织中GPR30、P-AKT，选用己知阳性的子宫内膜腺癌切片作为阳性对照，用PBS代替一抗作�橐跣远

7、哉铡Ｈ旧�方法如下：（1）脱蜡和水化，取每张4mm厚的患者肿瘤芯片，将组织芯片置于65℃恒温中5h；再将其先后加入到二甲苯Ⅰ和Ⅱ溶液里浸泡15min随后将其放入C2H5OHⅠ和Ⅱ各冲洗5min，在无水乙醇Ⅱ中再浸泡5min；95%乙醇中浸泡5min；85%乙醇中浸泡5min；70%乙醇中浸泡5min；蒸溜水中浸泡5min。（2）抗原修复，取一定量的0.01M梓檬酸盐缓冲液（pH=6.0）进行加热；将组织置于缓冲液中并置于加热箱中继续加热10～15min；随后将其冷却，并用蒸馏水和PBs缓冲液冲洗3次，5min/次[4]。（3）免疫组织

8、化学染色，用蒸馏水配置新鲜的3%HA，室温封闭15min以抑制内源性过氧化物酶，蒸馏水洗2次，5min/次；再用PBS洗两次，持续5min；应用山羊血清对标本进行密封，室温60min；取出切片，继续用PBS缓冲液进行3次