半胱氨酸修饰金电极电化学发光法测定罗红霉素论文

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1、半胱氨酸修饰金电极电化学发光法测定罗红霉素论文【摘要】在裸金电极上制备了L半胱氨酸自组装膜修饰电极(LCysAu/SAM/CME)。考察了联吡啶钌和罗红霉素在此修饰电极上的电化学及其发光行为。结果表明，此修饰电极表现出了很好的电化学活性和电化学发光(ECL)响应。基于罗红霉素的存在可增大了联吡啶钌的发光强度，建立了测定罗红霉素片的电化学发光分析方法。在最佳实验条件下,罗红霉素浓度在1.0×10-7～1.0×10-4mol/L范围内与其相对发光强度呈线性关系，其线性回归方程为I=2×107C+384.02，r=0.9977;检出限

2、(S/N=3)为1.0×10-7mol/L。连续测定1.8×10-5mol/L罗红霉素10次，发光强度的RSD为1.93%,表明此修饰电极具有较好的重现性,并将本方法用于罗红霉素片剂的检测。【关键词】L半胱氨酸，化学修饰电极，罗红霉素.freelol/L范围内呈良好的线性关系。本方法简单、线性范围宽、检出限低，同时具有较高的选择性，样品处理简单。本方法应用于罗红霉素片剂的分析，结果满意。2实验部分2.1仪器与试剂MPIE型电致化学发光分析系统(西安瑞迈电子科技有限公司);DL60D型超声波清洗器(上海之信仪器有限公司)，CH66

3、0B电化学工作站(上海辰华仪器有限公司);电化学实验采用三电极系统:LCysAu/SAM/CME电极为工作电极，Pt丝为对电极，Ag/AgCl为参比电极(饱和KCl溶液)。1.00×10-4mol/L罗红霉素标准储备液(用时现配)：准确称取0.0084g罗红霉素(中国药品生物制品检定所)，用20mL无水乙醇溶解后，用水定容至100mL棕色容量瓶中，再用超声脱气后冷藏于冰箱中备用;1.00×10-3mol/L联吡啶钌(Aldrich公司)储备液：准确称取六水合三(2，2联吡啶)氯化钌0.0374g，用水溶解并定容于50mL棕色容量

4、瓶中，用超声脱气后放入冰箱中(4℃)保存。实验用水均为二次石英亚沸蒸馏水。2.2LCysAu/SAM/CME的制备将金电极首先用金相砂纸打磨，再依次用0.5和0.05μmαA12O3粉在平板玻璃上抛光至镜面，分别于无水乙醇和水中超声洗涤5min。然后将金电极浸人0.05mol/LH2SO4溶液10min，在1.4～0.4V范围内进行CV扫描，直至得到稳定和重现的伏安图。随后，固定电位在0.25V恒电位极化3min，以彻底消除表面可能存在的金氧化物。再将金电极依次用水和无水乙醇冲洗干净，以高纯氮吹干立即浸入0.02mmol/LL

5、Cys溶液中，在室温下自组装24h，取出电极，用无水乙醇反复冲洗以除去物理吸附的硫醇，最后用水冲洗，即可制得LCysAu/SAM/CME。2.3实验方法实验在MPIE型电致ECL工作站上进行。三电极系统;支持电解质为0.1mol/L硼酸盐缓冲液(pH7.50)，将0.4mmol/LRu(bpy)2+3和0.2mL0.1mol/L硼酸盐缓冲液加入电解池，在0.2～1.30V范围内进行CV扫描，然后记录发光信号作为空白。在上述溶液中加入一定浓度的罗红霉素溶液0.1mL,采用相同的方法测定发光信号值。以相对化学发光强度(信号/空白)对

6、罗红霉素定量分析，绘制相对峰高强度与罗红霉素浓度的校准曲线，同时对样品进行分析测定。a.2.5mmol/LRu(bpy)2+3;b.a+0.1mmol/L罗红霉素(Roxithromycin)0.1mol/LNa2B4O7。发光强度时间实验曲线由MPIE型ECL工作站测定。用工作站检测池下方的光电倍增管来收集待测样品的ECL强度，光电倍增管负高压为850V。溶液测定前用超声波除气5min,实验在室温下进行，所有电位值均相对于参比电极Ag/AgCl。3结果与讨论3.1Ru(bpy)2+3和罗红霉素的电化学行为分别对80μLRu(bp

7、y)2+3，80μL硼酸盐缓冲溶液(pH7.5)，80μLRu(bpy)2+3+100μL罗红霉素标准液+80μL硼酸盐缓冲溶液(pH7.5)进行CV扫描和正向线性电位扫描。实验结果如图2。图2的a和b分别为联吡啶钌体系和罗红霉素与联吡啶钌共存体系的CV曲线，从图2可见，联吡啶钌只有低的电极电流(曲线a)，而罗红霉素加入后电极电流信号显著增强(曲线b)，由此可知罗红霉素对联吡啶钌的电化学发光有显著的增强作用。3.2罗红霉素Ru(bpy)2+3体系电化学发光行为考察了Ru(bpy)2+3在LCysAu/SAM/CME电极的ECL行

8、为。联吡啶钌在LCysAu/SAM/CME电极的发光强度比裸金电极明显增大。在相同条件下，在Ru(bpy)2+3体系中加入罗红霉素后，体系的发光强度增大约6倍。说明罗红霉素对Ru(bpy)2+3的发光强度具有增敏作用