半胱氨酸修饰金电极电化学发光法测定罗红霉素

《半胱氨酸修饰金电极电化学发光法测定罗红霉素》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、半胱氨酸修饰金电极电化学发光法测定罗红霉素【摘要】在裸金电极上制备了L半胱氨酸自组装膜修饰电极(LCysAu/SAM/CME)。考察了联吡啶钌和罗红霉素在此修饰电极上的电化学及其发光行为。结果表明，此修饰电极表现出了很好的电化学活性和电化学发光(ECL)响应。基于罗红霉素的存在可增大了联吡啶钌的发光强度，建立了测定罗红霉素片的电化学发光分析方法。在最佳实验条件下,罗红霉素浓度在1.0×10-7～1.0×10-4mol/L范围内与其相对发光强度呈线性关系，其线性回归方程为I=2×107C+384.02，r=0.9977;检出限(S/N=3)为1.0×1

2、0-7mol/L。连续测定1.8×10-5mol/L罗红霉素10次，发光强度的RSD为1.93%,表明此修饰电极具有较好的重现性,并将本方法用于罗红霉素片剂的检测。【关键词】L半胱氨酸，化学修饰电极，罗红霉素，联吡啶钌，电致化学发光　　1引言11　　罗红霉素为第3代红霉素衍生物(结构见图1)，是红霉素A的9位羰基以甲氧基乙氧基甲肟基取代的半合成红霉素，属大环内酯类的抗生素[1]。其抗菌活性及抗菌谱与红霉素相似，但对酸稳定，血药浓度高，因而具有用量小、口服吸收良好、作用时间长、稳定性好等优点。罗红霉素直肠给药可作为治疗慢性细菌性和慢性非细菌性前列腺炎的主要

3、药物[2]。目前，对罗红霉素的测定方法主要有高效液相色谱法[3]和流动注射化学发光法[4]。中国药典(2000年版)测定其含量采用微生物检定法，但该方法操作繁琐，检验周期长，影响因素多、实验误差大[5]。文献[6]报道了参考中国药典罗红霉素胶囊的溶出度检测法。文献[7]采用紫外分光光度法测定罗红霉素的含量。但用同一溶剂时，罗红霉素与其分解产物显同一颜色，此法测定罗红霉素的含量可能产生很大的误差，故需要选择适宜的溶剂。因此,建立罗红霉素分析新方法具有重要的意义。　　电致化学发光(ECL)是通过电极上直接或间接发生的电化学反应而产生的一种化学发光。它是在化学发

4、光和电化学基础上发展起来的一种分析技术，不但保留了化学发光分析和电化学分析所固有的优点，同时还具有其化学发光反应易于控制、方法更灵敏、更具有选择性、获得更多的化学信息等优点[8,9]。ECL作为一种灵敏度高、选择性好的分析方法，近年来引起人们的广泛关注。目前已报道的ECL物质有联吡啶钌类络合物[10,11]、酰肼类药物[12,13]及多环芳烃类物质[14]。其中作为发光试剂的联吡啶钌[Ru(bpy)3]2+具有水溶性好、试剂稳定、氧化还原可逆、发光效率高、可电化学再生、可进行可逆单电子转移反应及激发态寿命长等优点，在ECL光药物分析应用研究中占有重要地位。

5、11　　目前，关于用电化学发光法测定罗红霉素的报道较少。本实验研究了巯基化合物在金电极表面的自组装及分析应用。通过巯基化合物能够在金电极等金属表面形成SM键，且伸向溶液的有机链会形成有序排列的单分子层结构，因此在结构与功能上自组装膜具有类似生物膜的特性，且稳定性好，在界面化学和生命化学领域具有广泛的应用前景。利用L半胱氨酸(LCys)与金电极的强相互作用，通过SAu键使LCys自组装到金电极的表面，形成LCysAu/SAM/CME，此电极对罗红霉素的氧化具有明显的催化作用。据此，成功地建立了一种罗红霉素的ECL检测新方法。在选定的最佳条件下，联吡

6、啶钌与罗红霉素体系的ECL强度与罗红霉素浓度在1.0×10-7～1.0×10-4mol/L范围内呈良好的线性关系。本方法简单、线性范围宽、检出限低，同时具有较高的选择性，样品处理简单。本方法应用于罗红霉素片剂的分析，结果满意。　　2实验部分　　2.1仪器与试剂　　MPIE型电致化学发光分析系统(西安瑞迈电子科技有限公司);DL60D型超声波清洗器(上海之信仪器有限公司)，CH660B电化学工作站(上海辰华仪器有限公司);电化学实验采用三电极系统:LCysAu/SAM/CME电极为工作电极，11Pt丝为对电极，Ag/AgCl为参比电极(饱和KCl溶液

7、)。　　1.00×10-4mol/L罗红霉素标准储备液(用时现配)：准确称取0.0084g罗红霉素(中国药品生物制品检定所)，用20mL无水乙醇溶解后，用水定容至100mL棕色容量瓶中，再用超声脱气后冷藏于冰箱中备用;1.00×10-3mol/L联吡啶钌(Aldrich公司)储备液：准确称取六水合三(2，2联吡啶)氯化钌0.0374g，用水溶解并定容于50mL棕色容量瓶中，用超声脱气后放入冰箱中(4℃)保存。实验用水均为二次石英亚沸蒸馏水。　　2.2LCysAu/SAM/CME的制备　　将金电极首先用金相砂纸打磨，再依次用0.5和0.05μmαA1

8、2O3粉在平板玻璃上抛光至镜面，分别于无水乙醇和水中超声洗涤5mi