乙醇对慢性丙型肝炎患者hcv基因型分布及肝损害的影响

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1、乙醇对慢性丙型肝炎患者HCV基因型分布及肝损害的影响作者:孙慧慧 王敏 张孝国 陈建 刘靓文 智绪亭【摘要】目的:对比嗜酒与非嗜酒的慢性丙型肝炎(chronichepatitisC,CHC)患者HCVRNA基因型及分布,以明确嗜酒的CHC患者病情发展是否与某种特定基因型有关。检测CHC患者IFN-γ及TNF-α水平,了解嗜酒的HCV感染者肝损害的机制。方法:收集CHC患者114名,分为嗜酒组和非嗜酒组,以基因芯片技术对2组患者进行HCVRNA基因分型。采用Ficoll梯度离心法提取所有患者外周血单个核细胞(PBMC)并培养,ELISA法检

2、测IFN-γ及TNF-α的水平。结果:嗜酒组和非嗜酒组HCVRNA的基因型均以1b型为主(嗜酒组的比例为60%,非嗜酒组为43.75%),二者之间无统计学意义(P=0.22)。嗜酒组和非嗜酒组的HCVRNA定量测定分别为(11100±14174.3)×103mL-1和(3927.8±4549.6)×103mL-1,二者比较差异有统计学意义(P=0.025)。嗜酒组和非嗜酒组TNF-α水平分别为(4528±3587)ng/L和(3262±3131)ng/L,二者相比差异有统计学意义(P=0.048),但2组IFN-γ水平差异无统计学意义(P

3、>0.05)。结论:乙醇促CHC肝患者HCVRNA复制,导致肝损伤加重,但并不能增加慢性HCV感染者对某种HCVRNA基因型的易感性。TNF-α在嗜酒的CHC患者中起重要作用,是导致肝损害的重要细胞因子之一。【关键词】肝炎病毒,丙型·乙醇·基因型·IFN-γ·TNF-α  【ABSTRACT】Objective:ToanalyzethegenotypesofHCVRNAinalcoholicandnonalcoholicHCVpatientsandcontrastthedistributionofthegenotypesbetech

4、anismofhepaticlesioninalcoholicHCVpatients.Method:114HCVpatients,accordingtothehistoryofalcoholabuse,edbygenechiptechnique.LiverbiopsytitersofHCVRNAofalcoholgrouplandthenonalcoholgroupl,andthereong18alcoholicpatientsof30patientspracticedliverbiopsy,thEirliverinflammationo

5、tethecopiesofHCVRNAinHCVpatientsandaggravateliverinjury,butcan'taddsusceptibilitytocertaingenotypesofHCVRNA.Theliverinflammationofalcoholicpatientsishigherthanthatofnonalcoholicpatients.TNF-α,portanteffectinalcoholicHCVpatients,isoneoftheimportantmechanismsintheliverinjur

6、y.  【KEYI1640培养液购自Gibico公司;细胞因子ELISA检测试剂盒购自晶美公司。  1.3 检测指标和方法  1.3.1 血清HCVRNA基因分型 用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测所有患者的HCVRNA,记录HCVRNA的拷贝数。对HCVRNA阳性患者采用基因芯片技术进行基因分型。  1.3.2 PBMC的提取和细胞因子的检测 采用Ficoll梯度离心法提取所有患者外周血PBMC。将分离的PBMC用含有100mL/L混合人血清的完全RPMI1640培养液稀释细胞密度为5×109L-1。以100μL/孔加于96孔板

7、,37℃、50mL/LCO2孵箱中培养,72h后收集培养上清,-20℃冻存。同时设不加细胞的阴性对照和加入ConA(刀豆蛋白,2mg/L)刺激的阳性对照。用ELISA法检测上清中IFN-γ及TNF-α的水平。  1.4 统计学处理 应用SPSS13.0统计软件包进行分析,数值型变量以x±s表示,样本均数的比较采用t检验,计数资料间比较采用χ2检验(或四格表精确概率法)。P≤0.05为差异有统计意义。  2 结果  2.1 嗜酒组与非嗜酒组肝功能情况 嗜酒组与非嗜酒组ALT、AST。r-GGT比较差异均无统计学意义(P>0.05,表1

8、)。嗜酒组与非嗜酒组的肝功能比较见表1。  2.2 嗜酒组与非嗜酒组基因分型 114例CHC患者中,HCVRNA(-)6例,其中嗜酒组2例,非嗜酒组4例,2组之间差异无统计学意义(P=0.71

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