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时间:2018-11-24
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1、滇桂艾纳香中氨基酸的提取工艺研究作者:李倩,黄丽,林翠梧,韦保耀,滕建文【摘要】目的优选滇桂艾纳香中氨基酸的提取纯化工艺。方法采用不同的溶剂提取法,考察不同吸附时间、不同的pH值、洗脱剂种类、洗脱剂浓度对717阴离子树脂性能的影响。结果超声波辅助水提取得到较高的氨基酸提取率为0.220%,吸附时间6h,在提取液pH=12时上柱,用氯化铵梯度洗脱,氨基酸的收率可达87.11%,氨基酸纯度达到92.12%。结论该工艺条件回收率高且稳定达到了理想的实验效果。【关键词】氨基酸;提取纯化;717阴离子交换树脂 Abstract:ObjectiveTo
2、optimizeatechnicalprocessforextractionandpurificationofaminoacidsfromBlumeariparia(BL.)DC.MethodsDifferentsolventsinoacidsandtheeffectsofdifferentabsorptiontime,pH,eluateandeluateconcentrationon717anionexchangeresininoacidsinoacidse6h,pH=12,NH4Clgradientelution.ConclusionTh
3、ismethodisefficient,stableandreasonable. Keyinoacids;Extractionandpurification;717Anionexchangeresin 滇桂艾纳香Blumeariparia(BL.)DC,在《中国植物志》里亦有收载,称假东风草[1],民间习用全草入药。《中华药海》中记载,滇桂艾纳香性味归经:淡、甘平,入肝、肾、膀胱三经;功效主治活血止血——本品甘淡入肝,养肝活血,收敛止血,具有活血不伤血、止血不留淤之功,可用于各种出血症;利水消肿——本品甘淡渗利,可利湿行水,主治小便不利浮
4、肿症,用其性平、无寒热、偏热颇,故寒症、热症可用之,尤对产后浮肿症佳。起活血养血、利水消肿之效[2]。《新华本草纲要》中亦提到其有活血、止血、利水的功能,用于治经期提前,产后血崩,产后浮肿,不孕症[3]。 滇桂艾纳香提取物的强极性部分富含氨基酸成分。氨基酸类化合物是一类重要的天然产物,广泛存在于动植物中[4]。有构成生物有机体的蛋白质氨基酸,和非蛋白质氨基酸,都具有多种生理活性,在医药及食品产业方面都有广泛的应用[5]。随着研究的深入,其种类也日趋增多,1981年日本小菅卓夫首次从三七中分得了三七素,一种特殊的氨基酸β-N-乙二酸酰基-L-
5、α,β-二氨基丙酸(β-N-oxalo-L-α,β-diaminopropionicacid)具有缩短出血和凝血时间,有止血活性[6]。在临床术后常用的止血氨基酸,有止血芳酸、止血环酸和6-氨基已酸等,它们的结构类似赖氨酸,可以和纤溶酶(原)上的赖氨酸位点结合。从而阻止纤溶酶(原)与纤溶蛋白(原)的结合,防止纤溶酶原激活和纤溶酶的破坏作用,减少纤维蛋白降解产物(FDP)和D-二聚体的产生,可间接保护血小板功能,起到止血作用[7]。 目前主要对滇桂艾纳香地上部分的化学成分进行研究,集中在挥发性化学成分,有机酸,黄酮类物质[8~14]。未见对其
6、氨基酸成分的研究报道,由于滇桂艾纳香与三七都具有止血化淤功效,而滇桂艾纳香的药理作用机理尚未明确,本文对滇桂艾纳香进行不同溶剂提取,717阴离子交换树脂富集纯化氨基酸,旨在进一步揭示其药效物质基础,为其进一步研究提供一定的科学依据。 1材料与仪器 滇桂艾纳香全草干草(广西桂西制药厂提供)。超声清洗器(上海科导超声仪器有限公司SK3310LHC);紫外可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司SP-756P)。717阴离子交换树脂(三星树脂科技有限公司);谷氨酸对照品(上海昊化化工有限公司)。 2方法 2.1氨基酸含量的测定采用国标GB/T8
7、314-2002茶游离氨基酸含量测定方法,用谷氨酸标准品。 2.2游离氨基酸的提取及提取率测定分别采用50%乙醇,70%乙醇,水,80℃回流提取,及超声辅助水提法。提取率按以下公式计算:A=C/B×100%,A为提取率(%),B为原药料质量(g),C为提取得氨基酸质量(g)。 2.3树脂的预处理及总交换容量的测定717阴离子交换树脂用过量的蒸馏水浸泡后,经1mol/L氢氧化钠和1mol/L盐酸重复处理后,最后再用1mol/L氢氧化钠浸泡,用蒸馏水洗至中性备用。总交换容量按以下公式计算: Q=CHClVHCl/V。Q为树脂总交换容量(mo
8、l/L湿树脂),CHCl为HCl的摩尔浓度,VHCl为滴定消耗的HCl体积,V为湿树脂的体积。 2.4静态吸附实验准确称取己处理好的用来装柱的树脂2g,置25ml
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