原癌基因产物ras及cerbb2在着床前小鼠胚胎中的表达

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1、原癌基因产物Ras及cerbB2在着床前小鼠胚胎中的表达　　摘要：目的观察小鼠着床前的胚胎细胞中原癌基因ras编码的蛋白产物p21Ras及cerbB2的表达,并了解其对着床前的胚胎发育的可能作用。方法采用免疫组织化学ABC法，检测着床前小鼠胚胎中p21Ras及cerbB2蛋白的表达。结果小鼠着床前的胚胎细胞中p21Ras的免疫反应呈阳性,阳性物质分布于胞质中,胚胎外透明带呈阴性反应；而在各期着床前的胚胎中均未检测到cerbB2蛋白的表达。结论小鼠着床前的胚胎中，有原癌基因ras编码蛋白的表达,p21Ras是增殖和分化受体介导的

2、信号传导途径中的重要组成部分，可能在小鼠着床前的胚胎发育过程中起重要的调节作用。CerbB2基因对于围着床期子宫的生长发育具有重要的作用；而在小鼠着床前的胚胎发育过程中似乎不起重要作用。　　Expressionsofp21RasandcerbB2protEinsinmouse　　prEImplantationsembryos　　Abstract:AimToinvestigatetheexpressionsandpossibleroleofp21RasandcerbB2proteinsinpreimplantationmousee

3、mbryos.MethodsDetectionofp21RasandcerbB2proteinexpressionsbyimmunohistochemicalABCstaining.ResultsProteinp21Rasplantationmouseembryofrom4cellstagetoblastocyststage.Thepositivestainingsubstances.ProteincerbB2plantationmouseembryos.ConclusionProductsofproto;oncogenep2

4、1raspresentinmousepreimplantationembryos.Itsuggeststhatp21Rasmayplayaroleinearlyembryodevelopment.erbB2proteinsinpreimplantationmouseembryos.MethodsDetectionofp21RasandcerbB2proteinexpressionsbyimmunohistochemicalABCstaining.ResultsProteinp21Rasplantationmouseembryofr

5、om4cellstagetoblastocyststage.Thepositivestainingsubstances.ProteincerbB2plantationmouseembryos.ConclusionProductsofprotooncogenep21raspresentinmousepreimplantationembryos.Itsuggeststhatp21Rasmayplayaroleinearlyembryodevelopment.　　Keybryo;immunohisto;chemicalstaining

6、▲　　从受精卵卵裂分化到形成成熟的个体，细胞中的某些原癌基因在某一特定的阶段处于一定的活化状。在生理情况下，它们的表达产物在细胞的生长、分化和信号转导等方面起着极为重要的作用。就目前的资料看来，绝大多数原癌基因的表达开始于胚胎时期，其中多数主要在胚胎中期开始表达。近年来，国外有人研究发现，在着床前的小鼠胚胎中，可检测到一些原癌基因的表达，这些原癌基因对于着床前胚胎的发育起着重要的作用〔1〕。ras基因的产物p21Ras是一种G蛋白，为酪氨酸激酶的下游分子，在酪氨酸激酶信号转导途径中发挥作用。有人在小鼠囊胚期曾检测到p21Ras的表达，

7、但在更早期的胚胎细胞中未见有p21Ras表达的报道。c-erbB2基因表达于围着床期小鼠的子宫〔2〕，而在着床前的胚胎中是否有表达未见报道。我们从蛋白质水平，检测了这两种原癌基因在着床前小鼠胚胎中的表达，以探讨其在着床前的胚胎发育中起的作用。　　1　材料和方法　　1.1材料孕马血清促性腺激素(PMSG)和人绒毛膜促性腺激素(hCG)，由宁波第二激素厂提供。兔抗p21Ras多克隆抗体为北京中山生物技术有限公司产品。抗c-erbB2单克隆抗体(mAb)及ABC试剂盒，均由武汉博士德生物工程有限公司提供。　　1.2方法　　1.2.1小鼠早期

8、胚胎的获取选用本校动物中心提供的一级健康昆明种小白鼠，雌雄兼用，鼠龄8～10in,以抑制内源性过氧化物酶的活性。以PBS洗3次后，依次分别加入兔抗p21Ras多克隆抗体及抗cerbB2mAb(1∶100稀释),37℃孵