厚朴内生真菌的研究（ⅰ）：菌种分离及其鉴定

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1、厚朴内生真菌的研究（Ⅰ）：菌种分离及其鉴定庞蕾，严铸云，郭晓恒，罗静，万德光【关键词】厚朴；,,内生真菌；,,多样性　　摘要：从两个不同来源的厚朴MagnoliaofficinalisRehd.etagnoliaofficinalisRehd.etagnoliaofficinalisRehd.etilies,3ordersand1class.Theresultoftheexperimenthasshoin，用无菌水冲洗3～4次，无菌滤纸吸干。然后用无菌刀片将组织表皮削去，分别取韧皮部、木质部和髓部切成5mm×5mm×1mm的小块贴放于分离培养基上，置25～28℃恒温箱中培养3～20d，待培

2、养基上各植物组织周围长出菌丝后，采用尖端菌丝挑取法对所分离的内生真菌进行纯化，即得内生真菌。　　1.2.2内生真菌的鉴定采用插片培养和点植法，对分离获得的银杏内生真菌进行显微形态特征的观察、分类鉴定。分类检索参照文献〔2,3〕。　　2结果与讨论　　2.1厚朴内生真菌种群多样性分析从厚朴中共分离出48株内生真菌，经显微形态观察，鉴定为1纲、3目、6科、16属。厚朴内生真菌种群组成见表1。　　表1厚朴内生真菌种群组成（略）　　由表1可以看出，厚朴内生真菌在种类上存在着极其丰富的多样性特征。在厚朴内生真菌中，从数量上看，以曲霉属（Aspergillus）、青霉属（Penicillium）和镰孢属

3、（Fusarium）为优势种群，包含菌株分别占总菌株数的31.3％，18.8％，14.6％。部分属种代表性显微形态特征参见图1～6。　　2.2不同采集地点厚朴内生真菌的分布从不同地点采集的厚朴植株中均分离到了一定数量、不同类群的内生真菌，表明内生真菌在厚朴体内广泛存在。不同采集地的厚朴中内生真菌的优势菌群不同。其中，采集于峨眉山唐山的厚朴优势菌群为青霉属（Penicillium）；采集于都江堰市虹口乡的厚朴优势菌群为曲霉属（Aspergillus）。结果见表2。　　图1葡萄孢Botrytissp.显微特征（略）　　图2镰孢菌Fusariumsp.显微特征（略）　　图3阜孢霉Papulari

4、asp.显微特征（略）　　图4胶帚霉Gliocladiumsp.显微特征（略）　　图5曲霉Aspergillussp.显微特征（略）　　图6青霉Penicilliumsp.显微特征（略）　　由表2可以看出，采集于峨眉山的厚朴植株中的内生真菌在种类上较之采自都江堰者显得丰富，两地植株中分离出的内生真菌数量相当。镰孢属（Fusarium）为不同来源厚朴植株的共有菌群，而两地植株的优势菌群也成为各自的特有菌群之一。　　表2不同采集地点厚朴内生真菌数量及种类分布情况（略）　　本次实验从两个不同来源的厚朴中共分离到48株内生真菌，经鉴定为1纲、3目、6科、16属，显示出该植物内生真菌在种类和数量上的

5、多样性。采自不同地点的厚朴植株内生真菌种群差异较为明显，采集于峨眉山唐山的厚朴优势菌群为青霉属（Penicillium），而采自都江堰市虹口乡的厚朴优势菌群为曲霉属（Aspergillus）。镰孢属（Fusarium）是不同来源厚朴植株的共有菌群。采集于峨眉山的厚朴植株中的内生真菌在种类上较之采自都江堰者显得丰富。我们认为这与采集地的具体环境及厚朴的树龄有关。树龄较长的植株能够提供给微生物一个相对较长的与宿主之间的“磨合期”，使一些致病菌转变成暂时不致病的内生菌，内生真菌的种类也就相对较多。这再一次表明，植物内生真菌的数量和种类与植物自身状况及其所处环境密切相关。有关厚朴内生真菌中活性菌株

6、的筛选研究，将在随后的文章中给予报道。