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1、总胆固醇甘油三酯试剂对总胆汁酸测定结果的影响【摘要】 目的：探讨用全自动生化分析仪进行项目测定时，总胆固醇、甘油三酯试剂对总胆汁酸测定产生的交叉污染。方法：将TC、TG试剂加入混合血清进行TBA测定，并与加入生理盐水的对照管相比较；选取TBA测定范围在0.6μmol/L～30.1μmol/L之间的生化检验标本60例，先单独测定TBA，然后再先测TC和TG后测TBA。结果：TC、TG试剂当作标本测定的TBA值与对照组比较有显著性差异（P＜0.001）；先测TC和TG后测TBA，其TBA值与单独测得TBA值比较有显著性差异（P＜0.001）。结论：自动生化分
2、析中，用先测TC和TG后测TBA的分析顺序时，TC和TG试剂对TBA的测定结果有影响，可导致TBA的测定结果偏高。【关键词】总胆固醇 甘油三酯 总胆汁酸 在日常工作中,用全自动生化分析仪进行项目测定时发现,TC、TG试剂与总胆汁酸试剂相邻时,可造成总胆汁酸测定结果偏高,考虑可能为试剂之间的交叉污染。为此,我们用贝克曼KX-20全自动生化分析仪进行了相关实验,并探讨了避免交叉污染的方法。1材料1.1仪器与试剂KX-20全自动生化分析仪。总胆固醇、甘油三酯和总胆汁酸试剂均为上海申能-德赛诊断技术有限公司产品。1.2标本随机选择TBA测定范围在0.6μmol/
3、L～30.1μmol/L之间的临床生化检验标本60例。2实验方法与结果2.1项目间交叉污染实验将60例标本用自动生化分析仪单独进行TBA测定,结果为(10.7±0.23)μmol/L,然后先测定TC后测定TBA，TBA结果为(18.6±0.21)μmol/L,先测定TG后测定TBA，TBA结果为(24.5±0.24)μmol/L,分别与单独测得值作配对t检验,P均<0.001。2.2交叉干扰的排查2.2.1干扰原因的排查：将常用生化检测项目ALT、AST、ALP、r-GT、uA、TC、TG、GLU、HDL、LDL等试剂作为标本进行TBA测定,发现TC
4、、TG试剂测定结果很高。考虑到基质效应的影响,进一步将TC、TG试剂和生理盐水加入混合血清进行对照实验并观察其干扰情况。具体方法如下:对照管加入生理盐水0.1mL和混合血浆0.4mL,实验管分别加入试剂0.1mL和混合血浆0.4mL,同时用KX-20全自动生化分析仪进行TBA测定,并进行统计学分析,结果见表1。表1加入总胆固醇和甘油三酯试剂后TBA(μmol/L)测定结果2.2.2改变仪器检测顺序：TC、TG与TBA试剂相邻时，在TC与TBA、TG与TBA之间任意穿插其它项目ALT、AST(TC-ALT-AST-TBA、TG-ALT-AST-TBA)测定T
5、BA，结果为(10.83±0.22)μmol/L和(10.95±0.24)μmol/L,分别与单独测定TBA所得结果作配对t检验，P均＞0.1。3讨论多通道生化分析仪的试剂加样针需接触各种试剂成分,在两个测试项目之间以蒸馏水清洗,如果清洗不干净,一个项目对紧随其后的一个甚至几个项目的测定会带来一定程度的试剂污染，并随着仪器使用时间的累加、标本量的增加、仪器状况的下降，试剂交叉污染的程度会有所增加［１］。常见的干扰原因是前一项目的试剂中含有下一测试项目所要测定的底物，或是含有的某种试剂成分与下一反应所要测定的底物有作用，因而直接干扰下一反应的测定结果。本试验
6、结果表明:ALT、AST及具有同样显色系统的氧化酶法葡萄糖、尿酸试剂及类似的HDL、LDL等试剂均未发现干扰存在。TC、TG试剂对TBA测定结果有明显的正干扰,会使TBA测定结果假性增高,与对照组比较有非常显著性差异,这种结果是由于TC、TG测定试剂中均加有胆酸盐,胆酸盐具有胆汁酸的反应特性,自动分析时引起携带污染［2］,导致TBA测定结果假性增高。当改变仪器检测顺序，在TC、TG与TBA之间任意穿插其它项目进行检测时，所得结果与对照组比较无显著性差异。解决以上自动生化分析仪试剂针携带污染所致的干扰方法有:①安排项目顺序时要求两个项目间至少要有一个非干扰项
7、目，或将被干扰项目放在干扰项目之前；②设定试剂针、样品针和反应杯的补充清洗程序,从而大大减低试剂之间的交叉污染。【参考
