科学研究的设计和方法中的科学性

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1、科学研究的设计和方法中的科学性[科学研究的设计和方法中的科学性][关键词]科学研究设计方法健康网讯:成军,中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心、全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039摘要生物学和医学的研究发展很快,不断有新的理论和技术出现,推动着生物学和医学领域的不断发展.现代分子生物学技术和理论为肝脏病学的研究提供了前所未有的机遇.由于发展不平衡,对于新理论和新技术的接受程度和推广还有一段艰难的过程.在这一过程中,不可避免地存在一些认识上的误差和偏差.因此本文选取3个有代表性的例子,阐明科学研究的设计和方法中的科学性.

2、0引言我作为几家杂志的编委,经常会审阅来自不同单位的稿件,在审阅过程中发现了一些问题.本文的目的是提出一些问题,供编者、读者作为参考,共同提高我们科研设计的水平和学术论文的质量.关于正确理解现代分子生物学理论和技术在生物医学研究领域中的应用,有许多鲜明的例子,本文主要选取3个有代表性的例子,说明在科研设计和学术论文鉴赏过程中常见的误区.1研究基因转录水平主要考虑的是启动子的转录活性在审稿过程中,我接到一篇研究核苷类似物拉米夫定(lamivudine)抑制乙型肝炎病毒(HBV)X基因的研究报道.基本的研究方法和过程如下:首先利用分子生物学技术,构建HB

3、VX基因的真核表达载体,如具有巨细胞病毒(CMV)早期即刻基因启动子的pcDNA3,然后用这一载体转染肝母细胞瘤细胞系HepG2,建立稳定转染细胞系,在细胞系的培养上清中加入拉米夫定,利用半定量的逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术,检测HBVX基因的转录物水平,并进行半定量分析,结果证明HBVX基因的转录物水平有显著降低,结论是拉米夫定对于HBVX基因的转录具有显著的抑制作用.这一篇文章的设计存在严重的问题,对于分子生物学的基本原理的理解有偏差,是不能发表的.首先我们必须明白,基因的转录调节是在基因启动子指导下进行的,基因转录水平的高低受到许多因

4、素的影响,但是主要决定于启动子在这一系统中的转录活性,而与启动子指导的目的基因的性质没有太多的关系[1-12].这样的设计更多的是研究了拉米夫定对于CMV早期即刻基因启动子转录活性的抑制作用,而与HBVX基因的转录没有关系.如果本实验的目的基因换成别的什么基因,所得到的结果也同样不能说明目的基因的变化.例如这一实验中我们将HBVX基因换成报告基因氯霉素乙酰转移酶(CAT),那么岂不是可以得出结论拉米夫定可以抑制氯霉素乙酰转移酶的表达了吗?显然这是不合适的.关于转录水平的研究,正确的研究方法设计应该是特定基因的启动子序列与报告基因构件成报告基因表达载体

5、,转染合适细胞系,共同转染其他的表达质粒,或者在细胞培养上清中加入某些药物(如拉米夫定),以研究基因表达或药物对于该基因转录表达的影响[13-15].要研究什么基因的转录表达,即选择该基因的启动子基因序列,而不是选择其编码基因序列.目前报告基因表达载体的构建与细胞转染模型的建立是研究基因表达调控非常常用和成熟的研究技术和策略,常用的报告基因包括CAT、b-半乳糖苷[1][2][3][4][5]科学研究的设计和方法中的科学性2  第2篇WTO与企业财务管理  〖预览〗一、入世后财务管理环境的变迁对财务管理的影响  任何企业的财务活动和财务管理都是在一定

6、环境和条件下展开的,人世后企业财务管理环境的变迁必定会对企业财务管理产生极大的影响,主要表现在以下几个方面:  (一)金融市场变化的影响。加入WTO之后,根据《服务贸易总协定》的基本要求及与有关WTO成员国达成的双边协议,我国将逐步放松外资金融机构准人的范围和区域限制。越来越多的外资金融机构进入我国,必将使我国金融市场发生全面而深远的变化,呈现出一些新的特征,从而对企业筹资投资产生极大的影响。第一,金融市场规模的扩大、资金供给的增加和金融工具的不断创新,为我国企业筹资、投资和规避风险提供了多种可供选择的组合方式。第二,金融创新丰富了金融工具品种,拓展

7、了金融服务范围,但同时也派生出利率风险、汇率风险、表外风险等新的风险,使金融风险进一步加大,规避风险将成为人世后企业财务管理面临的最重要课题之一。第三,国内外金融市场竞争的加剧,促使我国金融机构建立现代企业制度的步伐进一步加快,金融机构自律性管理将进一步加强,国家对金融市场的监管也将进一步规范,必将便金融市场配置资源的功能得以更加有效地发挥。这样,无论什么性质的企业在金融市场都将处于公平竞争的地位,只能凭借其良好的经济效益、看好的市场前景与持续高速的增长而获得资金,况且企业筹资有时还要……科学研究的设计和方法中的科学性3  第3篇浅谈利润管理的合理性

8、  〖预览〗由于现实不成熟的社会经济环境及人们对假账的深恶痛绝,“利润管理”被习惯上理解为非善意的利润操纵。

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