非小细胞肺癌中微血管密度和血小板凝集素1表达的研究

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1、非小细胞肺癌中微血管密度和血小板凝集素1表达的研究陈志军乐涵波张永奎钱立勇李伟栋【摘要】目的研究微血管密度（MVD）和血小板凝集素1（Thrombospondin-1，TSP-1）的表达与非小细胞肺癌（NSCLC）组织生物学行为的关系。方法用免疫组化法检测42例NSCLC组织和40例肺癌旁组织中TSP－1的表达及MVD的改变。结果NSCLC组织中MVD明显高于正常肺组织，MVD与淋巴结转移及临床分期有关。NSCLC组织中TSP-1的阳性表达率显著低于正常肺组织。TSP-1的表达与淋巴结转移、病理类型和

2、临床分期有关。鳞癌组织TSP-1表达阳性者MVD比TSP-1表达阴性者明显下降。而腺癌组织中TSP-1表达阳性者MVD与TSP-1表达阴性者MVD无统计学差异。结论MVD是反映NSCLC患者病期进展的良好指标，TSP-1的低表达与非小细胞肺癌的浸润性发展有密切关系。其机制可能不仅仅与影响肿瘤血管生成有关。【关键词】非小细胞肺癌血小板凝集素1微血管密度免疫组织化学　　【Abstract】ObjectiveToinvestigatetherelationshipofmicrovesseldensity(M

3、VD)andthrombosondin-1(TSP-1)expressionandthebiologicalbehaviorsfornon-smallcelllungcancer(NSCLC).MethodMVDandTSP-1expressionin42casesofNSCLCand40casesofnormallungtissuemunohistochemistymethods.ResultsMVDinNSCLCallungtissue.MVDisrelatedphnodesmetastasisa

4、ndclinicalstage.ThepositiveexpressionrateofTSP-1inNSCLCisloallungtissue.TheexpressionofTSP-1isrelatedphnodesmetastasisandclinicalstageasouscellcarcinoma,butnotforadenocarcinomacases.ConclusionsMVDisaentofNSCLC.TSP-1mightnotbeasimplyanti-angiogenicfactor

5、.　　【KeyARKER公司，鼠抗人CD34mAb、生物素标记的羊抗鼠IgG及SP试剂盒均购自福州市迈新生物技术开发公司。　　1.3实验方法　　标本均经10％福尔马林溶液固定，石蜡包埋，5μm厚连续切片。用免疫组化SP法检测组织中TSP-1和CD34蛋白的表达。按实验说明书进行，用PBS代替一抗作阴性对照，用已知的阳性切片同时同一条件下染色作阳性对照，DAB染色观察。　　1.4结果判定　　所有染色切片均经3位医师采用双盲法阅片，TSP-1DAB显色呈棕褐色，颗粒状，团块状或带状分布于细胞浆和细胞外间质

6、中，无背景着色。每张切片在200倍普通光镜下随机计数10个视野，每个视野中计数100个肿瘤细胞。无阳性细胞为阴性;阳性细胞数<10%为弱阳性、10%～50%为阳性、>50%为强阳性。为便于统计分析，将阴性和弱阳性定为阴性组，将阳性和强阳性定为阳性组。CD34显色呈棕褐色，特异性标记微血管，无背景着色。和背景区分清楚的棕染单个细胞和细胞簇都可作为一个血管计数；分支结构如果未和连续结构中断，应作为一个血管计数。每例肿瘤微血管密度(MVD)，应用CMIAS病理彩色图像分析系统测定。参照VD及其相

7、互关系时，因细支气管肺泡癌和大细胞癌例数较少，不记入统计。　　2结果　　2.1NSCLC组织微血管密度　　42例NSCLC组织内微血管密集分布，相互间联系紧密,而正常肺组织微血管分布均匀且少，其差别显著，晚期组MVD明显高于早期组，有淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组；而MVD在不同年龄、性别、病理类型及分化程度间无显著性差异。(责任编辑：)　　2.2NSCLC组织TSP-1表达　　TSP-1在NSCLC组织中的阳性表达率明显低于正常肺组织的表达率。而在NSCLC各类型相互比较中，TSP-1在肺腺癌中

8、的表达阳性率明显高于鳞癌。早期组TSP-1的阳性率明显高于晚期组。有淋巴结转移组TSP-1阳性率明显低于无淋巴结转移组。TSP-1在不同年龄、性别及分化程度间无显著性差异。　　2.3TSP-1表达和MVD相互关系　　在NSCLC总体中，TSP-1表达阳性者MVD与TSP-1表达阴性者无显著性差异，而在病理类型分层研究中，发现鳞癌组织TSP-1表达阳性者MVD比TSP-1表达阴性者明显下降。而腺癌组织中两者无统计学差异。　　3讨论肿瘤的血管新生在肿瘤的发生