自体移植法子宫内膜异位症模型大鼠妊娠功能的研究论文

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1、自体移植法子宫内膜异位症模型大鼠妊娠功能的研究论文【关键词】子宫内膜异位症/免疫学；摘要：【目的】观察自体移植法子宫内膜异位症模型大鼠的妊娠功能，以评价该模型是否能代表人类子宫内膜异位症不孕的病理状态。【方法】取大鼠子宫内膜自体移植复制子宫内膜异位症动物模型，观察模型大鼠的内分泌与免疫功能状态；继而使之与雄性大鼠同笼研究其生殖功能，并与正常大鼠比较。【结果】在免疫功能方面，子宫内膜异位症模型大鼠血中肿瘤坏死因子(TNF)含量升高(与假手术组比较，Ｐ＜001)；在生殖内分泌方面，动情前期模型大鼠血中促黄体生成素(LH)水平降低、催乳素(PRL)水平升高，动情后期的血中孕激素(P)水平降

2、低(与假手术组比.freelg/kg腹腔注射(ip)麻醉，然后固定大鼠四肢，剖腹，切口长约15cm，切取右侧宫角处的一段子宫，长约1cm，迅速将其置于生理盐水中，将子宫内膜与肌层分离，并剪取两块各约5mm×5mm的内膜组织块，上皮层反向对着体壁，将组织块四角缝固在腹壁上，左右各一。右侧宫角断端吻合结扎。关腹前予以庆大霉素生理盐水溶液冲洗腹腔，最后缝合各层组织，普通级环境饲养。4周后随机抽取造模大鼠4只，再次剖腹观察移植物生长状况，手术成功的标志为：移植物体积增大，出现液体积聚，被结缔组织或大网膜覆盖并有血管形成。同时切取移植物送检，证实移植物中有子宫内膜上皮细胞、腺体及间质的生长，并

3、有分泌活动。132假手术组造模方法手术条件及麻醉、开腹方法均同EMT模型组，开腹后将右侧子宫角结扎，目的使假手术组与EMT组相同，达到均为单侧宫角子宫的生殖环境。同样以庆大霉素生理盐水冲洗腹腔，逐层缝合各层组织。14检测指标及方法于动情前期眼球后静脉取血，放射免疫法检测大鼠LH、PRL含量；于动情后期眼球后静脉取血，放射免疫法检测大鼠TNF、P含量；取普通级健康性成熟雄性SD大鼠15只，采血后动物择动情前期以雌雄比例2∶1饲养，每天清晨8∶00后雌鼠阴道细胞涂片，以发现精子当日定为“孕鼠”，并定为妊娠第1天，分笼饲养，未发现精子者继续与雄鼠同笼饲养，“孕鼠”于怀孕第16天处死，剖腹验

4、证是否受孕，摘取左卵巢，计数妊娠黄体数(排卵数)，计算着床率(着床率＝着床数/排卵数)、活胎数。15统计方法全部数据采用EXCEL分析统计，统计方法为t检验。2实验结果21EMT大鼠动情前期血中促黄体素、催乳素的含量变化结果见表1。表1EMT模型大鼠动情前期血中LH、PRL含量的变化（略）22EMT模型大鼠动情后期血中P、TNF的水平变化结果见表2。表2EMT模型大鼠动情后期血中P、TNF的水平变化（略）23EMT大鼠妊娠功能的改变情况结果见表3、表4。表3两组实验大鼠受孕情况（略）表4两组实验大鼠排卵、活胎、着床情况比较（略）表3说明，假手术组大鼠交配后全部受孕，受孕率100%；1

5、0只交配后的EMT模型组动物有8只受孕，受孕率80%。2只未孕者均未见妊娠黄体，亦未见子宫角内死胎，说明空孕即完全不孕率为20%，但鉴于大鼠多胎妊娠的特点，单纯受孕率不能全面说明妊娠功能，还应观察大鼠的排卵、活胎、着床情况(见表4)。EMT模型组的妊娠鼠中有2只为死胎，而假手术组未见死胎。3讨论针对子宫内膜异位症的不孕进行研究，显然在体动物模型生殖功能的变化较离体模型微观理化指标的变化更具说服力。但除人以外只有非人灵长类有周期性的月经，也只有非人灵长类在解剖与生理方面与人类最相近，用这类动物进行子宫内膜异位症不孕的相关研究无疑是最理想的。限于经济及动物保护的原因，灵长类动物模型的使用

6、受到限制，因此，本研究选择大鼠为实验动物，观察自体移植法大鼠子宫内膜异位症模型的妊娠功能是否与人类子宫内膜异位症妊娠功能具有相似性，以便将该模型推广应用于子宫内膜异位症不孕的实验研究与助孕药物研究。生殖功能实验结果显示，自体移植法复制大鼠子宫内膜异位症模型后出现20%的空孕鼠，即20%为完全不孕，而受试假手术组大鼠受孕率达100%。但鉴于大鼠多胎妊娠的特点，空孕即完全不孕的发生率尚不能完全说明大鼠妊娠功能的高低，因此，我们对受试大鼠的排卵数目、活胎数目、着床率以及死胎情况进行观察。结果表明子宫内膜异位症模型组受孕大鼠排卵数、活胎数、着床率均较假手术组明显降低，并出现死胎。说明自体移植

7、法大鼠子宫内膜异位症模型妊娠功能出现障碍，与人类子宫内膜异位症患者出现的不孕症有一致性。而研究发现人类子宫内膜异位症患者不孕的发生也是一个复杂的病理过程，涉及到免疫功能的紊乱、生殖内分泌的紊乱等多方面的因素。因此，我们对子宫内膜异位症模型大鼠的免疫功能及生殖内分泌功能进行观察。31免疫功能的失调子宫内膜异位症患者存在着复杂的免疫功能失调。免疫失调通过影响内分泌、抑制排卵、阻碍精卵结合及受精卵着床、早期胚胎毒性等机理影响受孕；腹腔液TNF含量升高亦是其中一个