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时间:2018-11-23
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1、同型半胱氨酸水平升高对冠心病的影响作者:鲁洋李淑梅张小昊吴迪【关键词】同型半胱氨酸;冠心病;影响近年来国内外大量研究已经证实,血中同型半胱氨酸(HCY)升高是冠心病新的独立危险因素,HCY浓度的升高增加了罹患冠心病的危险性,并增加不良事件发生的几率,但HCY浓度正常高值对冠心病的发生是否有影响,目前未见这方面的报道。本研究主要探讨HCY在正常范围内升高与冠心病的关系。 1对象与方法 1.1研究对象2006年3月至2006年10月在我院心内科住院的病例资料完整的患者53例,其中男34例,女19例。所有患者均行冠脉造影检查且HCY浓度在正常范围内。排除肝、肾衰竭、甲状腺功能低下、恶
2、性贫血、急性淋巴性白血病,癌症(如乳腺癌、胰腺癌、卵巢癌);半年之内未服用维生素、叶酸等影响血中HCY浓度的药物〔1〕。根据造影结果,将无狭窄或狭窄<50%者共30例确定为对照组;将左冠脉主干(LM)、左前降支(LAD)、左回旋支(LCX)及右冠脉(RCA)中至少一支狭窄>50%者共23例确定为冠心病组。再将冠心病组分为1支病变组(LAD、LCX、RCA中有1支病变),11例;2支病变组(LAD、LCX、RCA中有2支病变或LM病变者均为2支病变组),5例;3支病变组,(LAD、LCX、RCA中有3支病变或LM病变同时合并RCA病变归为3支病变组),7例。 1.2研究
3、方法受检患者清晨空腹抽取外周静脉血4ml,加入2%乙二胺四乙酸(EDTA)Na20.5ml抗凝,2h内离心(5000r/min,4℃,10min),分离血清,-20℃保存备用。采用酶联免疫分析法(ELASA)〔2〕进行测量。使用ELASA试剂盒(美国华盛顿TIP公司生产),操作步骤按试剂盒说明书进行。测双孔OD值,结果取两孔的平均值绘制标准曲线。 将样品(血清)稀释101倍(5μl血清加500μl样品稀释液),标准品不稀释(已稀释101倍)。分别加入10μl标准品、已稀释血清于反应板孔中。空白孔内加入10μl样品稀释液。每孔加入100μl酶联免疫物,轻混匀30s。水浴箱25℃温
4、浴1h。甩尽板内液体,用洗涤液洗涤反应板,并除去水滴(在厚叠吸水纸上拍干);这样反复洗涤5次。每孔加入100μl四甲基联苯胺(TMB)显色液,轻轻混匀10s,水浴箱25℃温育20min。每孔加入100μl终止液。轻轻混匀30s;确定蓝色变为黄色。30min内在450nm处读OD值。标准品OD值取相同浓度两孔的平均值,得出标准品与HCY浓度对应的数据,见表1。以标准品的OD值为纵坐标(y轴),以标准品HCY浓度(μmol/L)为横坐标(x轴),绘制标准曲线。见图1。 根据两点求直线得出每段的直线方程: ①y=1.158x(OD≤0.142) ②y=0.082x+0.068(0.
5、142<OD≤0.216) ③y=0.143x-0.042(0.216<OD≤0.602) ④y=0.108x+0.116(0.602<OD≤1.088) ⑤y=0.0756x+0.4072(1.088<OD≤1.768) ⑥y=0.054x+0.796(OD>1.768)根据血清样品的OD值所在范围找出其对应的直线方程,计算出其HCY浓度(根据Y值求出X值,即为HCY浓度)。 HCY浓度参考值:5~15μmol/L。本试剂盒灵敏度:0.2μmol/L。 表1标准曲线数据(略) 图1标准曲线图(略) 1.3统计学处理采用SPSS11.0软件,计量资料以x±s表示,比
6、较用方差分析及t检验,计数资料比较用χ2检验。 2结果 当HCY浓度在正常范围内时,冠心病患者的HCY水平(6.325±4.430)μmol/L明显高于对照组(3.756±3.722)μmol/L(P<0.01)。0、1、2、3支病变组HCY浓度呈递增趋势〔分别为(3.756±3.722)μmol/L、(4.223±3.756)μmol/L、(9.778±3.229)μmol/L、(10.153±4.753)μmol/L〕。其中2支病变组、3支病变组与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01),1支病变组与对照组比较无统计学意义。 3讨论 近年来有大量研究已经
7、证实,血中HCY升高是冠心病新的独立危险因素〔3〕。Boushey等〔4〕指出普通人群冠心病的危险性10%的原因是HCY,冠心病的危险性随着血中HCY浓度的增高相应增加。Nygard等〔5〕对587例冠脉造影确诊为冠心病的患者血清中HCY的浓度进行了测定并进行了随访(平均随访时间为4.6年),其中10.9%的患者死亡,指出HCY与死亡率密切相关。李秀昌等〔6〕指出不同类型的冠心病患者血清HCY水平有差异,血清HCY水平升高是促使急性心肌梗死发生的可能因素。Stampf
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