大孔吸附树脂分离纯化枫香槲寄生总黄酮的工艺研究论文

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1、大孔吸附树脂分离纯化枫香槲寄生总黄酮的工艺研究论文钟世顺许雄伟曾德贵李健新【摘要】目的研究大孔吸附树脂富集纯化枫香槲寄生总黄酮的最佳工艺参数。方法以枫香槲寄生总黄酮吸附量为指标，通过正交实验考察确定了该树脂分离纯化总黄酮的工艺条件。结果AB-8型树脂对枫香槲寄生总黄酮有良好的吸附分离性能，其吸附分离工艺条件为：上样浓度为2.55mg·ml-1，上样液pH为3，吸附流速为3BV·h-1，洗脱剂为60%乙醇。结论AB-8型大孔吸附树脂在所确立的工艺条件下，纯化枫香槲寄生总黄酮效果良好，总黄酮纯度可达60%左右。【关键词】枫香槲寄生总黄酮大孔吸附树脂Abst

2、ract：ObjectiveToexploretheoptimalconditionforpurificationoftotalflavonoidsfromViscumliquiddambaricolumHayata.acroporousresin.MethodsTheprocesstechnologyforpurificationoftotalflavonoidsacroporousresinacroporousresinoumabsorptionandelutionability.Theoptimumabsorptionconditionsplec

3、oncentration2.55mg·ml-1,.freelacroporousresincanbeusedtopurifytotalflavonoidsfromViscumliquiddambaricolum,thepurityoftotalflavonoidsisabout60%.KeyliquiddambaricolumHayata;Totalflavonoids;Macroporousresin枫香槲寄生ViscumliquiddambaricolumHayata.系桑寄生科槲寄生属植物.freelliquiddambaricolumHayat

4、a.；大孔树脂（型号分别为AB-8，DA-201，D-101，均为净品级，天津海光化工有限公司）；NaNO2，Al(NO3)3，NaOH等试剂均为分析纯。2方法与结果2.1含量测定2.1.1标准曲线的制备精密称取经五氧化二磷干燥恒重的芦丁对照品10mg，用60%乙醇溶解并定容至100ml，摇匀备用。精密吸取对照品溶液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0ml于10ml容量瓶中，加入60%乙醇至6ml，加入5%NaNO20.3ml，摇匀，再加入10%Al(NO3)30.3ml，摇匀，放置5min后加入4%NaOH3ml,用60%乙醇定容至刻度，混

5、匀后放置5min；同法以60%乙醇加随行试剂作空白在510nm处测定吸光度［4］。以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，得回归方程：A=11.162C-0.0056，r=0.9998(n=6)，线性范围为10～50μg·ml-1。2.1.2枫香槲寄生药材总黄酮的含量测定精密称取枫香槲寄生粗粉5.0g，分别加入60%乙醇40ml，浸泡0.5h后置水浴中回流提取2次，2h/次，提取液滤过、合并，60%乙醇定容至100ml。精密吸取提取液1.0ml置于10ml刻度试管中，按标准曲线制备项下方法测定吸光度，计算出枫香槲寄生中总黄酮含量为（10.75±0.47）mg·

6、g-1(n=5)。2.2大孔吸附树脂纯化工艺考察2.2.1大孔吸附树脂的预处理因采用净品级树脂，采用乙醇湿法装柱，用乙醇流动清洗，不时检查流出液至与水混合（1∶5）不呈白色浑浊为止，然后以大量纯化水洗去乙醇至流出液无醇味。2.2.2上柱液的制备称取枫香槲寄生粗粉，分别加入8倍量60%乙醇回流提取2次，2h/次，提取液滤过、合并，水浴蒸干至无醇味，加入适量纯化水溶解定容至一定体积，即得上柱液。2.2.3静态吸附量考察分别精密称取预处理过的AB-8，DA-201，D-101树脂各1g（湿重）置于100ml锥形瓶中，分别加入10ml槲寄生提取液（含生药量25

7、0mg·ml-1），室温下置摇床中，以50r/min下振摇24h，使之充分吸附，取上清液测定其中总黄酮含量，计算各树脂的静态吸附量。结果见表1。静态吸附量（mg/g）=(上样液浓度-上清液浓度)×上样液体积树脂质量2.2.4静态解吸量考察取“2.2.3”项下已充分吸附过的树脂，分别加入60%乙醇30ml，室温下置摇床中，以50r/min振摇24h，使之充分解吸，取上清液测定其中总黄酮含量，计算各树脂的静态解吸量。结果见表1。静态解吸量（mg/g）=（洗脱液浓度×洗脱液体积)/树脂质量解吸率（%）=静态解吸量/静态吸附量×100%表1不同类型的大孔吸附树

8、脂对总黄酮吸附及解吸效果综合以上实验，表明3种树脂中AB-8型树脂吸附量最大，而且解吸效果也比