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时间:2018-11-22
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1、阳和汤对乌拉坦诱导小鼠肺癌的动态影响作者:杜钢军,林海红,许启泰,朱新科【摘要】 目的研究阳和汤对乌拉坦诱导小鼠肺癌的动态影响。方法以乌拉坦(500mg/kg)1次腹腔注射和雌激素(50mg/kg)每周1次肌肉注射诱发小鼠肺肿瘤,用阳和汤喂养小鼠18周,每周6次,观察肿瘤生成时间和发生率,检测其癌变过程中血清和肺组织超氧化物歧化酶(SOD),过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽S转移酶(GST)的活性及丙二醛(MDA)、白细胞介素2(IL2)与肿瘤坏死因子(TNFα)含量。结果阳和汤在乌拉坦诱导小鼠肺癌
2、形成过程中对SOD,CAT的活性及IL-2与TNF-α含量有回升作用,可以推迟肿瘤形成时间,降低肿瘤发生率,并能阻止与癌变相应的GST活性及MDA含量增高。结论阳和汤对乌拉坦诱导的小鼠肺癌有预防作用,主要机制可能与其抗氧化和免疫调节作用有关。【关键词】阳和汤;乌拉坦;肺癌 Abstract:ObjectiveTostudytheeffectofYang-hedecoction(YHD)ontheprocessoflungcarcinogenesisinducedbyurethane.MethodsThemo
3、uselungcarcinomag/kginjectediponceanddiethylstilbestrol50mg/kginjectedimoncealseseandrateoftumorformation,andtheactivitiesofSOD,CAT,GSTandthecontentsofMDA,IL-2andTNF-αinserumandinlunghomogenateeoftumorformation,reducetherateofcarcinogenesis,inhibittheincrea
4、seofGSTandMDAduetocarcinogenesis.ConclusionYHDcanpreventlungcarcinogenesisinducedbyurethane,ightberelatedtoitsantioxidantionandimmune-regulation. Keya产品,批号0402134)。SOD、CAT、GST及MDA试剂盒(南京建成生物技术研究所)。TNF-α及IL-2ELISA测定试剂盒(华美生物工程公司)。 1.2药物 阳和汤由熟地黄、鹿角胶、白芥子、肉桂、
5、麻黄、炮姜、甘草按20∶6∶4∶2∶1∶1∶2的比例混合,除鹿角胶外,加入4倍量蒸馏水煎煮1h,药渣同法再煎煮两次,过滤。将3次煎煮滤液混合并浓缩至浓度为0.7g(生药)/ml(浓缩近完成时,将鹿角胶加入烊化),4℃保存备用(一次性购买原药材,分次煎煮,每次煎煮液使用不超过2周)。 1.3动物 昆明小鼠,♀,体重20~23g(河南医学实验中心,动物合格证号:医动字第410115号)。 1.4仪器 EL-800X型酶标仪(BIO-TEK公司)。 2方法 2.1模型建立与研究方案 将210只雌性
6、昆明小鼠分为3组,每组70只:①模型对照组:ig生理盐水10ml/kg;②阳和汤组:ig阳和汤7g(原药材)/kg(相当于成人等效日剂量);③正常对照组:不造模型,平行饲养。实验第1天,模型对照组和阳和汤组小鼠均ip乌拉坦500mg/kg1次,同时开始给药,1次/d,每周6次。从实验第4天起,造模小鼠均im雌激素50mg/kg,1次/周。第6周开始,每组随机抽取10只小鼠腹主动脉放血,取血清-80℃保存;同时取小鼠肺脏先观察有无肿瘤生成(如有,记录肿瘤个数,并用游标卡尺测量肿瘤长径a与宽径b,按肿瘤=0.4a
7、b计算大小),随后将肺脏在液氮中研碎,加二重蒸馏水匀浆后取离心上清-80℃保存,用于检测SOD,CAT,GST的活性及MDA,每2周1次,直至第18周。 2.2测定方法 SOD,CAT,GST的活性及MDA,IL-2与TNF-α含量均按试剂盒说明进行,其中SOD,CAT,GST及MDA用比色法测定;IL-2与TNF-α用ELISA方法测定,所有比色均在96孔酶标板中由EL-800酶标仪完成。 2.3统计处理 文中结果均以±s表示,组间差异采用单因素方差分析,通过SPSS11.0完成。P<0.
8、05,表示有显著性差异;P<0.01,表示有非常显著性差异。 3结果 3.1阳和汤对乌拉坦诱导小鼠肺癌形成过程中SOD,CAT的活性及IL-2与TNF-α含量的影响与正常对照组比较,模型对照组血清及肺脏组织SOD,CAT的活性及IL-2与TNF-α含量均明显降低,阳和汤组与正常对照组无统计学差异;与模型对照组比较,阳和汤对血清和肺组织SOD,CAT的活性及IL-2与TNF-α含量均有回升作
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