对小鼠黑色素移植瘤血管生成拟态中作用的研究

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1、对小鼠黑色素移植瘤血管生成拟态中作用的研究作者：张凡孙保存常永霞赵秀兰【摘要】目的：利用小鼠移植瘤模型动态观察CD31、MMP2、MMP9、CathepsinD在恶性黑色素移植瘤血管生成拟态形成中的作用。方法：采用B16黑色素瘤细胞株制作小鼠恶性黑色素移植瘤动物模型，成瘤后根据随机数字表每天随机抽取一只小鼠处死，共12d，获得肿瘤样本114例；HE染色、CD31、CathepsinD、MMP2、MMP9、HMB45免疫组织化学染色和PAS染色；分别计数血管生成拟态周围及远离血管生成拟态区域肿瘤细胞中阳性细胞百分率；内皮依赖性血管周围及远离内皮依赖性血管区域肿瘤细胞中

2、阳性百分率；连续计数10个高倍视野并取其均值。结果：在恶性黑色素移植瘤形成的第1～8天，肿瘤组织内存在血管生成拟态；第9～12天移植瘤中的血管生成拟态被内皮依赖性血管替代；血管生成拟态周围肿瘤细胞中CD31、MMP2阳性细胞百分率高于远离血管生成拟态区域的阳性细胞百分率;内皮依赖性血管周围肿瘤细胞CD31阳性细胞百分率与远离内皮依赖性血管区域的阳性细胞百分率之间存在明显差别；血管生成拟态周围肿瘤细胞MMP9阳性细胞百分率高于内皮依赖性血管周围的阳性细胞百分率；血管生成拟态密度与血管生成拟态周围肿瘤细胞CD31、CathepsinD、MMP2阳性细胞百分率之间存在相关

3、，与肿瘤细胞中MMP9阳性细胞百分率之间不存在相关；内皮依赖性血管密度只与内皮依赖性血管周围肿瘤细胞中CD31阳性百分率之间存在相关，与CathepsinD、MMP9、MMP2之间不存在相关。结论：恶性黑色素瘤移植瘤中血管生成拟态与内皮依赖性血管共存，且与内皮依赖性血管之间存在一定的时空变化规律。CD31、CathepsinD、MMP2、MMP9、HMB45等参与了黑色素瘤血管生成拟态的形成，其中CD31、MMP2作用尤其重要。【关键词】血管生成拟态;肿瘤血管生成;细胞粘附分子;恶性黑色素瘤;基质金属蛋白酶【ABSTRACT】Objective:Tostudythe

4、effectivenessofCD31、MMP2、MMP9、CathepsinDonVasculogenicmimicryinthemelanomatransplanttumour.Methods:Themousemelanomatransplanttumormodelofmouseadeelanomacellsuspendingliquid.MP2positivecellaroundvasculogenicmimicryismorethanthatofthetumorimicry.TheratioofCD31positivecellaroundendothelia

5、ldependedvesselhassignificantdifferenceorfarait.ThenumberofMMP9positivecellaroundvasculogenicmimicryismorethanthatoftumoraroundendothelialdependedvessel.TherearecorrelationbetimicrydensityandthenumberofCD31、MMP2positivecellsaroundvasculogenicmimicry,berofCD31positivecellaroundendothe

6、lialdependedvessel.ButthedensityofendothelialdependedvesselhavenocorrelationberofMMP2、MMP9、CathepsinDpositivecellaroundendothelialvessel.Conclusion:Thevasculogenicmimicryisonesortofspecialbloodprovidingpattern.TheCD31、CathepsinD、MMP2、MMP9alltakepartinthedevelopmentofvasculogenicmimi

7、cryandCD31、MMP2playkeyroleinthisprocess.【KEYalignantmolenoma;MatrixmetalloprotEinase血管生成拟态是1999年美国lol。75%酒精消毒小鼠鼠蹊部，每只小鼠鼠蹊部皮下注射0.2ml细胞悬液。10d后接种部位开始出现皮下肿块。根据随机数字表每天抽取一只小鼠处死，共持续12d。解剖并仔细检查动物全身，共获得肿瘤样本114例。全部标本均经10%福尔马林固定，然后常规石蜡包埋。1.3染色方法1.3.1试剂：一抗CD31、HMB45为鼠抗小鼠单克隆抗体，即用型，6ml包装，SNATACRUZ