红掌快速繁育最适培养条件的筛选研究

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1、红掌快速繁育最适培养条件的筛选研究　摘要从愈伤组织、不定芽、生根等培养指标筛选红掌快速繁育的最适培养条件，结果表明：外植体最佳消毒时间是70%酒精浸泡60s，红掌愈伤组织诱导的最佳基本培养基为MS培养基，适宜的激素组合及浓度配比为6-BA1.0mg/L+2，4-D0.4mg/L，添加5g/L琼脂，光照强度1000~1500lx，13h/d的光照时间，NAA添加量为1.0mg/L。筛选到的最佳培养条件适宜红掌的快速繁育需求。　　关键词红掌；快速繁育；培养条件；筛选　　　　　红掌为天南星科花烛属多年生附生常绿草本花卉，又称花烛、安祖花、蜡烛花、灯台花等。其株高1m，不开花时是非常好的观叶植物。红掌

2、成年植物1年每株可以开5~8枝花，花大、花形奇特、颜色鲜艳。花的色彩变化也多，叶片优美，既能观花又可赏叶。近年来，红掌在园林中的应用是越来越广泛[1-3]。当前应用比较多的红掌品种有广红、Alexis、Evita等10余个品种。由于红掌品种多样且观叶观花俱佳，加上其象征着热情向上，深受人们的喜爱，为花中珍品，成为仅次于热带兰的第二大热带花卉[4-5]。目前，红掌常规的繁殖方法为分株繁殖，但难以扩大生产，红掌快速繁殖的最理想途径是组织培养[6]。本文探讨了红掌的快速繁殖条件，优化了各繁育元素的组合，以更好地开发利用红掌资源。　　1材料与方法　　1.1试验材料　　试验所用的材料购自西南大学苗木繁育

3、中心的广红红掌品种，由实验室自行进行繁育并培植保存。　　1.2试验方法　　1.2.1表面消毒时间对叶片成活率的影响。在组培的过程中，由于培养基中的营养物质丰富且培养条件适宜，微生物繁殖的速度远快于外植体的繁殖速度，其可与外植体进行养分的争夺，阻碍外植体的生长，因此在进行组培之前，应对外植体进行消毒灭菌。选取新引进的广红品种长出的新叶作为研究对象。首先对叶片进行消毒处理：新叶先用自来水冲洗30min，然后在超净工作台上用70%酒精分别设置浸泡处理30、60、90s，分别用无菌水冲洗处理后的叶片3次，置于消毒瓶中备用。接种时将叶片切为带主叶脉、大小为1.5cm1.0cm的长方块，于培养瓶中严格无菌

4、操作。研究表面消毒时间对叶片成活率的影响。　　1.2.2培养基对不定芽诱导的影响。基本培养基是植物组织培养中的重要基质，不同的植物及不同的外植体对培养基的要求也不同。因此，在植物的组织培养过程中，选择合适的培养基至关重要。选择MS和1/2MS、1/4MS为基本培养基，这3种培养基的区别为：1/2MS培养基中大量元素含量是MS培养基的1/2，1/4MS培养基中大量元素含量是MS培养基的1/4，其他成分一致。研究不同的培养基对红掌不定芽诱导的影响。　　1.2.3不同取材部位对愈伤组织诱导的影响。以红掌广红品种的叶柄、叶片、茎段作为外植体，研究不同部位对愈伤组织诱导的影响。将不同部位的外植体接入最佳

5、培养基中，50d后观察并记录诱导率。　　1.2.4培养基中不同激素对愈伤组织诱导的影响。分别选取展开2周的广红红掌的最佳取材部位为外植体，接种于已筛选出的基本培养基表面。采用6-BA+2，4-D的培养基激素组合，设计不同水平浓度进行试验。观察培养基中激素对愈伤组织诱导的影响。设计水平为：6-BA0.5mg/L+2，4-D0.2mg/L、6-BA1.0mg/L+2，4-D0.4mg/L、6-BA1.5mg/L+2，4-D0.8mg/L、6-BA2.0mg/L+2，4-D1.6mg/L。　　1.2.5不同琼脂浓度对红掌愈伤组织诱导的影响。以上述试验获得的最佳条件为基础，添加不同浓度的琼脂，以改变培

6、养基的硬度，从而设计不同硬度的培养基对红掌愈伤组织进行诱导研究。琼脂添加用量分别为2、3、4、5、6g/L。将供试红掌叶片切成1.5cm1.0cm的长方块接种。60d后统计在不同琼脂添加量处理的愈伤组织诱导率。　　1.2.6光照强度对不定芽分化及增殖的影响。在已获得的最佳培养条件的基础上，分别在光照强度为500、1000、1500、2000、3000lx（光照时间均为13h/d）和黑暗条件下进行培养，以研究不同的光照强度对红掌不定芽分化及增殖的影响。　　1.2.7不同浓度生长素对生根的影响。以筛选的最佳培养基为基本培养基，选用生长素NAA，浓度分别设为0、0.1、0.3、0.5、1.0mg/L

7、，不添加任何细胞分裂素。30d后统计不同条件下红掌的生根数及生长情况。　　2结果与分析　　2.1不同表面消毒时间对红掌叶片生长的影响　　70%酒精浸泡处理红掌叶片不同时间后其生长情况见表1。从表1可以看出，灭菌时间为60s的处理，成活率高达80%，污染率仅为20%，明显优于其他处理，而且接种后愈伤组织形成快，长势好。因此，红掌叶片用75%酒精灭菌时间以浸泡60s为最佳。　　2.2培养基对不定芽诱导