冬凌草甲素提取工艺的正交实验研究论文

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1、冬凌草甲素提取工艺的正交实验研究论文王传金，朱广军，杜杨艳【摘要】目的确定冬凌草中冬凌草甲素的最佳提取工艺。方法以冬凌草甲素提取率为考察指标，考查了提取方法、提取时间、提取次数对提取效果的影响。结果最佳工艺为采用超声波提取、提取3次、30min/次。结论该工艺可行，可用于工业化生产。【关键词】冬凌草甲素；正交实验；提取工艺；高效液相色谱Abstract：ObjectiveTodeterminetheoptimalextractingprocessoforidonin.MethodsTheorthogonalex

2、perimentinetheextractingmethod,.freeleandextractingtimesarkers.ResultsThebestextractingprocessesinuteseach.ConclusionTheoptimalprocessshoent;Extractingprocess;HPLC冬凌草RabdosiarubescensHemsl.为唇形科（Labtea）香茶菜属（Rabdosia）植物，广泛分布于我国黄河流域及其以南广大地区，作为一种抗癌药物，其主要成分为冬凌草甲素

3、（oridonin）［1］。作者以高效液相色谱法测定冬凌草甲素含量为考察指标.freels1)，经HPLC法测定，冬凌草甲素含量为0.478%；冬凌草甲素（Oridonin）对照品（HPLC法测定，峰面积归一化法测定含量为99.5%，由陕西慧科植物开发公司购买）；95%的工业酒精；水为二次蒸馏水；甲醇为色谱纯。2方法与结果2.1正交设计选定提取方式、提取时间、提取次数作为考察的4个因素，各取3个水平，以提取物中冬凌草甲素含量为考察指标，选用L9（34）正交表进行实验。因素水平见表1。表1因素水平（略）2.2冬凌

4、草甲素测定2.2.1色谱条件检测波长240nm；流速1.00ml/min；标温30℃；流动相为甲醇水（二次生馏水）60∶40。2.2.2标准曲线的制备精密称取冬凌草甲素对照品4.88mg（50℃条件下，真空干燥至恒重）置于25ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，即得对照品液。分别移取1，2，3，4，5ml至25ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，色谱条件下分别进样10μl（n=3），以峰面积积分值X为纵坐标，以进样浓度Y（mg/ml）为横坐标，求得回归方程：Y=8770338X-9889.4，r=0.9999。结果表

5、明，冬凌草甲素的进样浓度在0.007808～0.039040mg/ml之间有良好的线性关系。2.2.3供试品液的制备分别精密称取粉碎过60目筛的冬凌草颗粒9份，每份约1.0g，按正交表中所选取的4因素3水平条件下用95%的乙醇进行回流、超声、冷浸提取，减压抽滤，将提取液分别转移至50ml容量瓶中，用95%乙醇定容至刻度，再分别移取2～100ml容量瓶中，用95%乙醇定容至刻度备用。移取上述溶液，微孔滤膜（孔径0.45μm）过滤，按2.2.1项中色谱条件，定量进样10μl，测定峰面积，计算冬凌草甲素的提取率。结果

6、见表2～3。表2正交实验数据（略）由表2表和表3可知，A，B，C3个因素，对结果都有显著影响。在正交实验中冬凌草甲素的最大提取率是92.3%。最佳工艺为A2B3C3，向冬凌草粉末中加入12倍95%的乙醇超声波提取3次，30min/次。表3方差分析（略）2.3最佳工艺的验证在正交设计分析的冬凌草甲素提取的最佳工艺条件下，重复3次实验验证，按超声波的提取方法提取，同法测定冬凌草甲素的含量。结果见表4。表4最佳工艺的验证结果（略）由上表可知，3次重复试验结果处于较高水平，说明该工艺是稳定可行的。3讨论根据文献报道［3

7、］，冬凌草中的主要成分冬凌草甲素对热不稳定，前人的研究主要是采用冷浸法、回流法，但前者费时费力，后者则使部分冬凌草甲素被破坏，使得其提取率下降，所以笔者采用一种新型的提取方法——超声波提取。与冷浸法、回流法进行比较性研究，可以知道采用超声提取可以大大缩短冬凌草甲素的提取时间，避免了高温对冬凌草甲素的破坏，且实验可在室温下进行，设备简单、操作方便，提高了冬凌草甲素的的提取率，是提取冬凌草甲素的一种好方法。【