益肾健脾胶囊对人工髋关节松动影响的细胞因子学研究论文

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1、益肾健脾胶囊对人工髋关节松动影响的细胞因子学研究论文.freelg/ml)。D组:单个核细胞+骨水泥微粒+益肾健脾胶囊(6mg/ml)。E组:单个核细胞+骨水泥微粒+益肾健脾胶囊(12mg/ml)。培养48h后,用ELISA测定细胞上清液中肿瘤坏死因子(TNF)-a、白细胞介素(IL)-6含量。结果B组的TNF-a和IL-6含量均明显高于A组(P0.01);C组的TNF-a和IL-6含量明显低于B组(P0.05)。结论骨水泥微粒可刺激单个核细胞分泌TNF-a和IL-6,而益肾健脾胶囊能有效地抑制单个核细胞分泌TNF-a和IL-6。益肾健脾胶囊能防治人工关节置换术后由TNF-a和IL-6等溶骨

2、性细胞因子引起的假体周围的骨溶解,因此该制剂有望成为防治人工关节松动的有效药物。【关键词】益肾健脾胶囊人工关节假体失效骨溶解【Abstract】ObjectiveToexploretheeffectsofYiShenJianPigranuleonasepticcytokineoflooseningofprothesisinvitro.MethodsFrom20patients,bloodsampleononuclearcellsononuclearcells,ononuclearcells+PMMAparticles;GroupC:mononuclearcells+PMMAparticles

3、+YiShenJianPigranule(3mg/ml);GroupD:mononuclearcells+PMMAparticles+YiShenJianPigranule(6mg/ml);GroupE:mononuclearcells+PMMAparticles+YiShenJianPigranule(12mg/ml).TheyountofosteolyticfactorssuchasTNF-aandIL-6ofeachgroupined.ResultsThelevelsofTNF-aandIL-6uchhigheringroupBthanA,C,DandE(P0.01).Thelevel

4、sofTNF-aandIL-6uchloulatemononuclearcellstoexcreteTNF-aandIL-6,ayhaveclinicalapplicationinthepreventionandtreatmentofasepticlooseningofprothesis.【Keyl,肝素抗凝。1.2主要试剂和器材益肾健脾胶囊(×××医院制备)。未聚合的骨水泥粉末(美国Zimmer公司制造,微粒直径为2~3μm),HANK'S液(杭州宏博生物制品公司),胎牛血清(杭州四季青生物制品公司),RPMI1640溶液(吉诺生物医药技术有限公司),FICOLL分离液(上海恒信化学试剂有

5、限公司),台盼蓝(中国医药集团上海化学试剂公司),6孔培养板(美国FALCON公司),放免试剂盒(北京东亚免疫技术研究所,最小检测浓度0.3ng)。CO2组织培养箱(美国Heraeus公司),电热恒温水浴箱(上海医用恒温设备厂)。1.3实验方法无菌采集准备行人工髋关节置换术患者外周血10ml,用肝素抗凝。抗凝血以HANK'S液稀释一倍后,用FICOLL分离液梯度离心法分离出单个核细胞。洗涤3次,加含10%小牛血清的RPMI1640培养液制成细胞悬液,细胞记数,调整细胞至4×105/ml。台盼蓝排除法检测细胞活力;向6孔培养板中滴加细胞悬液,每孔加3ml,最后1孔空置。置37℃、5%CO2恒温

6、恒湿培养箱培育4h,使细胞贴壁,利用单个核细胞的贴壁性,洗去非贴壁细胞,留下单个核细胞。每板第1孔加入含10%小牛血清的RPMI1640培养液3ml,余4孔中加入含10mg/ml骨水泥的RPMI1640培养液3ml,并于第3、第4和第5孔中分别加入9mg、18mg、36mg益肾健脾胶囊,使其浓度分别为3、6、12mg/ml组。即第1孔为仅有单核细胞的对照组,第2孔为单核细胞+骨水泥组,第3孔为单核细胞+骨水泥+益肾健脾胶囊(3mg/ml)组,第4孔为单核细胞+骨水泥+益肾健脾胶囊(6mg/ml)组,第5孔为单核细胞+骨水泥+益肾健脾胶囊(12mg/ml)组。混匀,同条件培养48h,取上清液,

7、水平离心机以1500rpm×10min离心。ELISA测定细胞上清液中肿瘤坏死因子TNF-a含量和白细胞介素IL-6含量。1.4统计学处理数据以均数±标准差(x±s)表示,采用方差分析q检验法检测不同处理组之间TNF-a和IL-6含量的差异有无统计学意义。2结果2.1TNF-a含量测定结果见表1。TNF-α含量B组>A组(P<0.01);C组<B组(P<0.05);D、E组<B组(P<0.01);而C、D、E

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