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《胃癌组织中ercc1 基因实时荧光定量pcr 表达及临床意义》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、胃癌组织中ERCC1基因实时荧光定量PCR表达及临床意义李紫燕1张翼2张士虎21.常州市肿瘤医院病理科，江苏常州213000；2.江苏省中医院急诊外科，江苏南京210029[摘要]目的探讨ERCC1基因在胃癌中的表达及临床意义。方法应用实时荧光定量PCR检测44例胃癌组织中ERCC1基因的表达，并分析ERCC1基因表达与患者生存的关系。结果ERCC1在胃癌组织中的表达与年龄、组织学分级、淋巴结转移、临床分期等因素无关，而与性别有关。ERCC1高表达病例3年生存率33.3％(8/24)，ERCC1低表达病例3年生存率60.0％(12/20)，ERCC1低表达患者
2、3年生存率更高,但是两者差异无统计学意义(P=0.077)。结论ERCC1与胃癌分化程度、有无淋巴结转移等无关，提示ERCC1与肿瘤的不良生物学行为无关。ERCC1基因在胃癌中不能作为独立的预后指标。[.jyqkega)。取1μLRNA加99μLRNaseFreeddH2O,在紫外分光光度仪上测定其浓度和纯度。进一步行RT反应(10μL):gDNA:1μL,6μlRNA＋DEPCH2O,42℃2min,然后加入0.5μLPrimer(10nmol/μL),0.5μLRT酶,2μLBuffer,42℃30min,95℃5min。QPCR反应体系(5μ 胃癌组织
3、中ERCC1基因实时荧光定量PCR表达及临床意义李紫燕1张翼2张士虎21.常州市肿瘤医院病理科，江苏常州213000；2.江苏省中医院急诊外科，江苏南京210029[摘要]目的探讨ERCC1基因在胃癌中的表达及临床意义。方法应用实时荧光定量PCR检测44例胃癌组织中ERCC1基因的表达，并分析ERCC1基因表达与患者生存的关系。结果ERCC1在胃癌组织中的表达与年龄、组织学分级、淋巴结转移、临床分期等因素无关，而与性别有关。ERCC1高表达病例3年生存率33.3％(8/24)，ERCC1低表达病例3年生存率60.0％(12/20)，ERCC1低表达患者3年生存
4、率更高,但是两者差异无统计学意义(P=0.077)。结论ERCC1与胃癌分化程度、有无淋巴结转移等无关，提示ERCC1与肿瘤的不良生物学行为无关。ERCC1基因在胃癌中不能作为独立的预后指标。[.jyqkega)。取1μLRNA加99μLRNaseFreeddH2O,在紫外分光光度仪上测定其浓度和纯度。进一步行RT反应(10μL):gDNA:1μL,6μlRNA＋DEPCH2O,42℃2min,然后加入0.5μLPrimer(10nmol/μL),0.5μLRT酶,2μLBuffer,42℃30min,95℃5min。QPCR反应体系(5μL):MasterM
5、ix:2.5μL,模板cDNA1μL,ERCC1上下游引物各0.25μL(20pmol/μL)，H2O:1μL。PCR扩增条件:95℃10min预变性,95℃15s,60℃1min扩增50个循环。溶解曲线的温度设定:95℃15s,60℃15s,95℃15s。1．3SYBRGreen荧光实时定量PCR数据分析 以ACTB基因为内参,利用待测样本的Ct值(3复管均值)求出相应基因拷贝数作为检测结果。Ct值阈值纳入范围设置为15～35个循环。1．4随访对44例胃癌患者及其家属于2013年8月进行随访。所有患者的随访内容包括性别、年龄、确诊日期、手术日期、死亡日期、死
6、亡原因(截止于2013年8月31日)。1．5统计学分析 数据处理使用SPSS13.0软件。计量数据用（x±s）表示。计数资料使用χ2检验、Fisher’s确切概率法进行显著性检验。P<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1ERCC1基因在胃癌中表达的情况44例胃癌组织中ERCC1与内参的差值Δct与cutoff值4.3[2]相比较,低表达和高表达者分别为27例和17例。2.2ERCC1基因表达与胃癌病理学特征的关系 研究结果显示：胃和胃食管交界部位癌相比较，ERCC1的表达高低没有统计学差异（P>0.05）；不同的组织学分级和临床分期在ERCC1
7、高表达组与低表达组中也没有显示出统计学差异（P>0.05）。ERCC1基因的表达与发病性别有关,与年龄、肿瘤部位、组织学分级、淋巴结转移情况、临床分期无关。ERCC1基因低表达在女性患者中(12/13,92.3%)所占比例与男性患者(15/31，48.4%)相比较有显著统计学差异，见表1。2.3ERCC1基因表达与胃癌患者生存的关系随访病例三年生存率为45.5%。本实验将44例获得随访的胃癌患者分成两组：生存组20例，其中低表达者12例，高表达者8例；死亡组24例，其中低表达者8例，高表达者16例，并对两组中ERCC1基因表达情况作了分析。胃癌中ERCC
8、1低表达在死亡组中为33.3%(8/2
