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1、大蒜拮抗酒精摄入对小鼠学习记忆能力的影响论文【摘要】目的研究大蒜拮抗酒精摄入对小鼠学习记忆能力的影响。方法60只清洁级ICR小鼠,雌雄各半,按体质量随机分为6组,每组10只,给予不同的干预因素:阴性对照组(对照组)和酒精肝模型组(模型组)给予蒸馏水,酒精+大蒜低、中、高剂量组分别给予250,500,750mg/kg大蒜水提液,维生素E组(VE)给予500mg/kgVE;1h后阴性对照组给予蒸馏水灌胃,其余各组以50%无水乙醇15mL/kg灌胃,连续28d;分别于干预前和干预28d后进行Morris水迷宫测试.freelg/kgVE。【关键词】酒精大蒜学习记忆能力保护作用小鼠长期过量饮酒可引起消
2、化、神经、生殖等多器官、多系统的损害和严重的精神及社会问题。肝脏和脑组织是酒精吸收后的主要代谢场所,也是酒精伤害机体的主要靶器官。基于酒精致急慢性中毒的氧化应激机制及大蒜的抗氧化特性(另文发表),笔者通过预先给予酒精肝模型小鼠大蒜水提液,对亚慢性酒精中毒神经系统损伤进行干预,为开发大蒜用于防治酒精中毒提供实验依据。1材料与方法1.1材料60只清洁级ICR小鼠,雌雄各半,体质量(20±2)g,由福建医科大学实验动物中心提供。试剂均为国产分析纯。Morris水迷宫测试系统选用2.5.2版。1.2方法1.2.1大蒜水提液制备大蒜为福州市本地种,购自市场。大蒜经挑选、去皮、洗净、风干,与适量蒸馏水混合
3、,榨汁定容得25mg/mL大蒜液,于4℃,3120r/min离心10min,取上清液为大蒜水提液,经高效液相色谱仪测定主要有效成分大蒜素含量0.18mg/mL。1.2.2分组及干预小鼠适应性喂养3d,按体质量随机分成6组。按文献1方法制备酒精肝模型。按20mL/kg给予不同干预物灌胃:阴性对照组(对照组)和酒精肝模型组(模型组)给予蒸馏水;低、中、高剂量大蒜干预组(大蒜组)分别给予250,500,750mg/kg大蒜水提液;维生素E(VE)干预组(VE组)给予500mg/kgVE。1h后阴性对照组按15mL/kg给予蒸馏水灌胃,其余各组以50%无水乙醇15mL/kg灌胃,连续28d。1.2.3
4、Morris水迷宫试验测试程序采用定位航行试验2。测验前水池注水,水深17cm,水温(24±2)℃,平台没于水下2cm,动物分组进行迷宫训练,依次从水池边4个固定入水点(东、西、南、北)释放小鼠,寻找水池中唯一的安全平台,限时1min,找到平台并保持15s;1min内找不到者,由实验者引导完成,全部行为学训练在9:00~17:00完成,共5d。干预28d后重复进行迷宫训练,各象限总得分由Morris水迷宫测试系统2.5.2版自动生成。记分方法见文献2。1.3统计学处理利用SPSS11.5对数据进行统计处理。2结果2.1干预前各组各象限每天总得分干预前各组各象限每天总得分差别无统计学意义(P0.
5、05),说明干预前各组学习记忆能力均衡可比。2.2干预后各组各象限每天总得分实验结束时模型组各象限每天总得分均较阴性对照组明显升高(P0.05);大蒜高、中剂量组第一、二象限每天总得分较模型组明显降低,差别有统计学意义(P0.05);大蒜低剂量组和VE组每天总得分与模型组比较差别无统计学意义(P0.05)。相对于模型组,大蒜高、中剂量组和VE组第三象限每天总得分明显降低(P0.05);大蒜中剂量组第四象限每天总得分较模型组显著降低,差别有统计学意义(P0.05,表1~4)。表1大蒜干预后各组第一象限得分比较表2大蒜干预后各组第二象限得分比较表3大蒜干预后各组第三象限得分比较表4大蒜干预后各组第
6、四象限得分比较n=10.与对照组比较,☆:P0.05;与模型组比较,#:P0.05.2.3干预后各组搜索策略水迷宫搜索策略包括直线式、趋向式、边缘式和随机式四种3,阴性对照组和大蒜高、中剂量组均以直线式和趋向式为主,边缘式很少。模型组的搜索策略也转变为边缘式和随机式为主。大蒜低剂量组和VE组则以趋向式和随机式为主。3讨论3.1Morris水迷宫实验学习记忆的行为学测试方法有多种,包括跳台实验和水迷宫实验等,Morris水迷宫是英国心理学家Morris设计并应用于学习记忆脑机制研究的方法,与跳台、避暗等检测工具相比,该方法能系统全面考察实验动物空间认知程度,客观反映认知水平;可将实验动物的学习记
7、忆障碍和感觉、运动缺陷等分离开来,减少对过程检测的干扰,使结果更可靠。因此,该迷宫可作为检测动物学习记忆水平的重要工具,也可用于防治药物的筛选研究45。3.2大蒜拮抗酒精摄入对小鼠学习记忆行为的影响研究表明,酒精能迅速透过血脑屏障进入脑组织,对神经细胞有直接毒害作用,可抑制蛋白质合成,干扰细胞膜中类脂和蛋白结构,改变神经细胞膜及突触膜流动性,也可干扰神经细胞递质合成、释放和回摄,引起细胞和突触功