补肾益肺化淤法对大鼠慢性阻塞性肺病肺功能的影响论文

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1、补肾益肺化淤法对大鼠慢性阻塞性肺病肺功能的影响论文.freell浓缩液，置4℃冰箱备用。1.2动物健康清洁级SD大鼠，体质量(180±20)g，3月龄，雌雄各半，购于中山大学实验动物中心，合格证号：No.0033311.SCXK(粤)：2004-0011，粤监证号：2008A010。2方法2.1COPD大鼠模型的建立将大鼠随机分成模型组，中药高剂量治疗组、低剂量治疗组、空白对照组4组，每组8只，雌雄各半。采用气管内注射脂多糖合被动吸烟方法分别对模型组、中药高剂量治疗组、低剂量治疗组大鼠进行造模：①气管内注射

2、脂多糖：于第1，14天用1%戊巴比妥钠(50mg/kg)对大鼠进行腹腔注射麻醉，将其仰卧位固定于大鼠固定板，在光线充足的条件下，暴露声门，以拔除针芯的16号静脉套管针快速插入气管，取溶于生理盐水的脂多糖200μl(1mg/ml)通过静脉套管针快速注入气管，然后将大鼠固定板垂直旋转，使脂多糖液能够均匀分布于两肺，再拔出套管针2;②被动吸烟：将大鼠置于20cm×30cm×40cm熏箱内，隔天给予8支香烟烟熏20min，连续熏吸1个月，其中第1天和第14天不予熏吸，而进行气管内注入脂多糖。2.2实验方法造模后，中

3、药高剂量组按30g/kg(相当于成人常规临床用量18倍)给予补肾益肺化瘀中药灌胃;低剂量组按10g/kg(相当于成人常规临床用量6倍)给予补肾益肺化瘀中药灌胃;空白对照组和模型组，正常喂饲，灌服等容积生理盐水1次/d，连续30d。2.3实验观察与指标检查2.3.1一般情况观察每天定时观察记录大鼠活动度、精神、皮毛及饮食、呼吸、死亡等情况。2.3.2血气分析测定在灌药治疗结束后次日采清晨空腹血。先用100u/ml的肝素湿润1ml注射器内壁。具体操作如下：将2ml的浓肝素(12500u/ml)全部加到100ml

4、的生理盐水瓶中混匀，用注射器吸取稀释的肝素0.2ml，将肝素来回抽动，使针管全部湿润，然后将多余的肝素全部排出，注射器死腔残留的肝素即可抗凝。注意湿润内壁后除残留于死腔(包括针尖部分)外，应尽排弃出去，排尽空气。对大鼠进行麻醉，剖开大鼠腹部，找取腹主动脉，随后用肝素湿润后的1ml注射器抽大鼠腹主动脉血0.8ml左右，针头迅速刺入橡皮塞，用手搓动针筒，使血液与肝素混合，放进冰袋迅速送血气分析仪分析。2.3.3病理标本检查进行完“2.3.2”项步骤后，腹主动脉放血处死大鼠，迅速剪下右肺中下叶，并放入中性福尔马林

5、中浸泡，石蜡包埋切片，作苏木素-伊红(HE)染色，再将制好的切片于光学显微镜观察拍片。2.4统计学处理用SPSS11.5统计软件进行数据处理，实验结果±s，q检验作统计学分析。3结果3.1一般情况在造模过程中，大鼠出现咳嗽、气促、喘息、呼吸道分泌物增多，以及体质量下降、毛枯易脱、蜷卧少动、大便干硬等症状改变。经中药治疗后，气喘、咳嗽症状不同程度减轻，口鼻分泌物减少。空白对照组大鼠精神正常，活泼好动，体肥，皮毛光泽无脱落。3.2补肾益肺化瘀中药对COPD大鼠动脉血pH、PaO2、PaCO2的影响结果见表1。中

6、药高、低剂量组PaO2均显著高于模型组(P0.05)，其PaCO2均显著低于模型组(P0.05)。表1各组大鼠pH、PaO2、PaCO2比较3.3补肾益肺化淤中药对COPD大鼠肺组织的影响结果见图1～4。图片均为光镜100×下视野。模型组肺组织具有慢性阻塞性肺气肿和慢性支气管炎的病理形态学改变：肺泡管、肺泡囊及肺泡明显扩大，肺泡壁多处断裂，部分肺泡互相融合，形成肺大泡，细支气管、终末细支气管表现出不同程度的慢性炎性细胞、中性粒细胞、淋巴细胞浸润(见图1～2)。治疗组的上述病理改变较模型组明显减轻(见图3)，

7、并且高剂量组效果优于低剂量组(见图4);对照组大鼠肺组织结构正常。图1模型组肺泡病理(100×)图2模型组肺支气管病理(100×)图3中药高剂量组图4中药低剂量组肺支肺泡病理(100×)气管病理(100×)4讨论现代医学普遍认为COPD与肺部对有害气体或有害颗粒的异常炎症反应有关，以气道、肺实质和肺血管的慢性炎症为特征。支气管的炎症，一方面使管腔变窄，形成不完全阻塞，气道阻力增加，另一方面又破坏小支气管软骨，失去对支气管的支架作用，使肺泡明显膨胀和压力升高，并且肺部慢性炎症使白细胞和巨噬细胞释放的蛋白分解酶

8、增加，损害肺组织的肺泡壁，致多个肺泡融合成肺大泡或肺气肿;肺泡壁的毛细血管受压，血液供应减少，肺组织营养障碍，也引起肺泡壁弹性减退，而促使肺气肿发生，肺组织弹性收缩力降低，使呼气时将肺内气体驱赶到肺外的动力减弱，呼气流速减慢。另外，通气功能和换气功能障碍可引起缺氧和二氧化碳潴留，发生不同程度的低氧血症和高碳酸血症，最终出现呼吸衰竭，继发慢性肺源性心脏病3。本实验采用两次气管内注入适量脂多糖和反复烟熏的方法制作CO