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1、GluR1在大鼠海马结构的表达论文蒋马莉，韩太真,杨东伟【关键词】海马ExpressionofGluR1inthehippocampusofrats【Abstract】AIM:ToinvestigatetheexpressionofAMPAreceptorsubunitGluR1inthehippocampusofrats.METHODS:TheexpressionanddistributionofGluR1inhippocampusofratsinedbyusingSPimmunohistochemicalstainingmethod.RESULTS:Therepusofadultra
2、ts,especiallyinstratumpyramidalcell,stratumorientandstratumlucidumofCA3region,andinterneuronofdentategyrus.PositiveexpressionainlylocatedinthecytomembraneandprocessesoftheneuronsintheCA1area,andalsointhecytoplasmintheCA3area.CONCLUSION:TheexpressionofGluR1inthehippocampalCA1andCA3areaisdifferent.
3、Thisdifferencemaybeattributedtothedifferentfunctionsindifferenthippocampalsubregions.【Keypus;immunohistochemistry【摘要】目的：观察AMPA受体亚单位GluR1在大鼠海马的表达.方法：在多聚甲醛固定的海马切片上，用免疫组化SP法观察GluR1在正常成年大鼠海马结构的表达与分布.结果：GluR1在正常大鼠海马有广泛表达，在CA3区的起层、锥体细胞层和透明层及齿状回门区内的中间神经元表达最强.阳性表达在CA1区主要见于神经元的胞膜和突起，而在CA3区还可见于胞质.结论：GluR1在
4、海马CA1区和CA3区的表达不同，这种差异可能与海马不同区域具有不同功能有关.【关键词】受体,AMPA；GluR1；海马；免疫组织化学0引言αamino3hydroxyl5methyl4isoxazolepropionicacid(AMPA)受体在中枢神经系统介导大多数快速兴奋性突触传递，在长时程增强（LTP）、长时程抑制（LTD）和学习记忆等方面均具有重要作用［1］.GluR1是海马神经元AMPA受体的重要组成部分,它对于突触可塑性及空间记忆的保留是必需的［2］.但是GluR1究竟在海马不同区域的分布特征如何，仍不清楚.我们观察了GluR1在海马的分布.freel.AMPA受体亚单位G
5、luR1抗体购自Sigma公司，SP组化试剂盒和DAB显色试剂盒购自北京中山生物公司.1.2方法动物用20gL-1戊巴比妥钠按45mgkg-1腹腔注射麻醉后打开胸腔，经心脏快速灌注生理盐水100mL,再用40gL-1多聚甲醛(PB配制,PH7.4)300mL灌注固定.取全脑，修块，浸入40gL-1多聚甲醛中后固定，4℃过夜.用振荡切片机作冠状连续切片，片厚40μm.切片隔3张取1张，共4片，做漂浮染色.反应步骤为：①0.1molL-1PBS漂洗,3×5min；②3mLL-1H2O2处理30min，封闭内源性过氧化物酶,.freelolL-1PBS漂洗,3×5min；③10gL-1Trit
6、on室温孵育1h;0.1molL-1PBS漂洗,3×5min；④正常羊血清封闭，室温1h；⑤兔抗GluR1抗体，4℃，72h；0.1molL-1PBS漂洗,5×5min；⑥生物素化羊抗兔抗体室温1h；0.1molL-1PBS漂洗,5×5min；⑦SP复合物室温1h;0.1molL-1PBS漂洗,5×5min；⑧DAB显色；⑨裱片，常规脱水,透明,中性树胶封片.阴性对照用正常羊血清替代一抗孵育，其他步骤相同.实验动物采用同一流程，外部条件保持基本一致.结果判断以细胞结构呈明确的棕黄色为阳性染色.所有阴性对照切片不着色,或仅呈淡的背景色.2结果大鼠脑切片上，肉眼可见两侧海马结构较其他部分染色
7、显著增强.光镜下GluR1在海马结构染色明显强于其他脑区,并且在海马结构的各区广泛表达，以CA3区的多形层、锥体层和透明层及齿状回门区内的中间神经元着色最深，呈棕黄色.在CA1区，胞体呈圆形,阳性结构主要分布在胞膜和突起(Fig1A);在CA3区，胞体呈椭圆或圆形,突起长,染色强,阳性表达在突起、胞膜及近胞膜处的胞质均有不均匀分布，而胞核及核周的胞质未见着色(Fig1B).齿状回颗粒细胞排列紧密，细胞较小，阳性表达主要在胞膜和突起，
