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1、养阴抗毒胶囊2号对阴虚大鼠糖皮质激素受体蛋白表达的影响论文丁鑫，侯颖，雎岩,史恒军【关键词】养阴抗毒胶囊2号；糖皮质激素类；阴虚；糖皮质激素受体；大鼠【Abstract】AIM:ToobservetheeffectofNourishingYinAntitoxicCapsule2(YC2)ontheexpressionofglucocorticoidreceptorproteins(GR)inYindeficiencyratsinducedbyhydrocortisone,andtoinvestigateholyallocatedto4grou
2、ps:normalcontrolgroup,Yindeficiencymodelcontrol(YD)group,YC2groupandGuifuDihuangBalls(GFB)group.Radioimmunologicalmethodmunohistochemistryalgroup,thecontentsofCORTmunohistochemistrystain(0.316±0.017,P0.05）.paredmunohistochemistrystain(0.342±0.013,P0.05）;thecontentsofCORTinG
3、FBgroupent,thecontentsofCORTinYDgroupalgroup,andtheexpressionofGRinthelivercellnucleusprovethehyperfunctionofhypothalamicpituitaryadrenal(HPA)axis.【Keyicpituitaryadrenal,HPA)轴功能亢进状态，对GC所致的各种阴虚症状有很好的疗效［1-2］.我们在前期研究的基础上继续观察该方对应用GC所致阴虚大鼠糖皮质激素受体(glucocorticoidreceptor,GR)的影响及调节
4、作用，为临床进一步应用YC2治疗激素副反应提供了实验依据.1材料和方法1．1材料1.1.1动物清洁级SD大鼠32只，雄性，体质量(200±20)g（第四军医大学实验动物中心），合格证编号SCXK（军）2002005.饲养于第四军医大学实验动物中心清洁级动物实验室.1.1.2试剂YC2（第四军医大学唐都医院药剂科），批号20050406.药物组成：羚羊角、西洋参、石斛、生地黄、茜草、连翘、仙鹤草、大蓟、小蓟等.将胶囊内药物再次粉碎，过100目筛，使用前1d加入蒸馏水配制成浓度为200g/L的混悬液，4℃保存备用；桂附地黄丸(浓缩丸)（兰州佛慈集
5、团），批号2005464，将药丸加蒸馏水化解，制成含200g/L药物的混悬液，4℃保存备用；氢化可的松（山东新华制药有限公司），批号0504041，使用前加入蒸馏水配制成浓度为5g/L的混悬液；速眠新Ⅱ注射液（军事医学科学院军事兽医研究所），批号（2004）005013；皮质醇（CORT）放射免疫分析试剂盒（北京北方生物技术研究所），批号051020；兔抗大鼠多克隆抗体，批号：sc1004（美国SantaCruz公司）；即用型非生物素免疫组化EliVisionplus检测试剂盒（福建迈新），批号：kit5901.1.1.3主要仪器美国16探头
6、全自动测量γ计数仪；恒温离心机（TJL16GA，上海安亭）；奥林巴斯显微照相系统.1．2方法1.2.1实验动物分组SD大鼠32只,随机分为空白对照组,阴虚模型(yindeficiencymodelcontrol,YD)组,YC2组,桂附地黄丸(guifudihuangballs,GFB)组（阴性对照组）4组，每组8只.1.2.2动物药物处理YC2组和GFB组在每天早晨按10mL/kg浓度给予相应的药液灌胃，空白对照组及YD组给予同样体积饮用水灌胃，共3d.第4日起除空白对照组外，其余各组均按阴虚大鼠模型复制方法［3-4］，每日17：00按50
7、mg/kg剂量给予氢化可的松灌胃，连续4d，空白对照组给予相应量饮用水.各组均在造模结束1d后（第9日）处死取血.1.2.3大鼠血浆皮质醇测定各组大鼠于第9日08：00~12：00间，以1mL/kg剂量给速眠新Ⅱ，麻醉后心脏取血4mL，4℃3000r/min离心10min分离血清,用放射免疫法（RIA）测定血浆CORT(corticosteroid,CORT).1.2.4大鼠肝脏GR免疫组织化学分析大鼠处死后取适量肝脏组织.置体积分数为40g/L的甲醛溶液中固定，常规石蜡包埋切片.切片经常规脱水后，在体积分数为3mL/L甲醇于室温下放置10m
8、in.去除内源性过氧化物酶，加人体积分数为100mL/L山羊血清封闭非特异性背景15min.加1∶100稀释的兔抗大鼠GR一抗，24h过夜，再使用非生物素免疫组化E
