小鼠品系影响胚胎移植成功率的比较研究论文

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1、小鼠品系影响胚胎移植成功率的比较研究论文张庆玲，贺莉，杨玉芳，李祖国，丁彦青【关键词】胚胎移植；动物,基因修饰；小鼠品系【Abstract】AIM:Toexploretherelationsofthestrainsofembryoandpseudopregnantrecipienttolivebirthrateofembryotransferandthefeasibilityofmixedtransferofdifferentembryostrains.METHODS:Atotalof362embryoscollectedfrom2

2、4B6CF1mice(F1generationofBalb/cmaleandC578BL/6emalemice)and14kunming(KM)miceiceofthe2strains(8B6CF1miceand16KMmice)respectivelyforparingthelivebirthrate.RESULTS:ThebirthrateofB6CF1embryostransferredintothepseudopregnantmiceofsamestrainuchhigher(32.0%)thanthatofKMmiceho

3、mogenousembryos(4.0%);thebirthrateofmixedtransferringofthe2embryostrainsice.Exceptforhomogenousembryotransfer,crossstrainembryotransferedinB6CF1andKMmice.Amongthem,thetotalbirthrateinembryotransferredB6CF1pseudopregnantmice(29.0%)ice(7.0%).Asforembryostrain,thebirthrat

4、eofB6CF1strainembryotransferring(16.0%)bryotransferring(11.0%).CONCLUSION:Thelivebirthrateofembryotransfercouldbeelevatedbyselectingmousestraincautiously.Bothcrossstrainandmixedstrainembryotransferarefeasible,buthomogenousembryotransferisapriority.B6CF1mouseisabetterem

5、bryotransfercandidatethanKMmouse.【Keybryotransfer;animals,geicallymodified;mousestrains【摘要】目的：探讨不同受体鼠和供体鼠品系对胚胎移植成功率的影响以及不同品系胚胎混合移植的可行性.方法：以Balb/c雄鼠和C57BL/6雌鼠杂交F1代（B6CF1）小鼠24只和昆明鼠（KM鼠）14只作为供体鼠，共取状态良好的受精卵362颗，分别或混合回种于8只B6CF1和16只KM受体鼠输卵管内，比较两种品系鼠的产仔率.结果：除同品系回种可产仔外.freela公

6、司)；人绒毛膜促性腺激素(HCG，C1063,Sigma公司)；透明质酸酶(Sigma公司).显微操纵仪（Nikon公司），体视显微镜、拉针仪和毛细玻璃管(Narishige公司)；CO2培养箱等.1.2方法1.2.1细胞培养基的配制根据文献［4］自配HEPESCZB培养基和CZB培养基，于配制好当日取20颗状态良好的受精卵置于培养基内培养过夜，以超过80%卵发育成二细胞期为培养基合格标准，每次配制的培养基使用时间不超过40d.所有培养基在使用时均以矿物油覆盖.1.2.2超数排卵将8in左右.1.2.3受体鼠选择和制备在供体鼠交配日

7、同时选择发情期KM雌鼠或B6CF1雌鼠，分别与同系的结扎雄鼠交配，次日晨选择有明显阴栓的雌鼠作为受体鼠用于受精卵的回种.1.2.4胚胎移植分别选取短暂培养的状态好的超排受精卵，麻醉受体鼠，并于腰背部、肋骨和髂骨之间切开皮肤和肌肉，暴露并拉出卵巢和输卵管，体视显微镜下找到输卵管伞部，将受精卵通过输卵管伞部回种入受体鼠输卵管.根据供体鼠和受体鼠的品系将回种组合分为3组.①同品系卵回种：KM鼠卵回种于KM受体鼠，B6CF1鼠卵回种于B6CF1受体鼠；②异品系卵回种：KM鼠卵回种于B6CF1受体鼠，B6CF1鼠卵回种于KM受体鼠；③混合卵回

8、种：杂交鼠卵和KM鼠卵混合回种于KM受体鼠或B6CF1受体鼠.另外，还根据回种卵的发育时期进行比较，包括单细胞期受精卵回种、单细胞期和二细胞期受精卵混合回种以及二细胞期受精卵回种.2结果2.1不同品系的受精卵回种不同品系的受精卵均可在