双缩脲法快速测定蛋白质含量论文

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1、双缩脲法快速测定蛋白质含量论文.freell搅拌溶解后定容至500ml。1.3.2NaOH(2M)溶液取NaOH40.0g，加蒸馏水300ml搅拌溶解冷却后定容至500ml。1.3.3NaOH(4M)溶液取NaOH80.0g，加蒸馏水300ml搅拌溶解冷却后定容至500ml。1.4试验方法1.4.1温度对结果的影响①双缩脲溶液制备：取1.3.1溶液50ml加入50ml1.3.2溶液混匀放置冷却至室温。②取人造血浆(蛋白含量40.0g/L)0.75ml、1.0ml、1.25ml、1.5ml分别置于20ml容量瓶中，加入双缩脲溶液10ml，用0.9%NaCl溶液定容至刻度，摇匀后在20℃水

2、浴放置10min，用紫外可见分光光度计在520～600mn进行扫描，取最大峰值作为结果。在30℃、40℃重复上述试验，结果见表1、图1。表1温度对结果的影响（略）1.4.2碱性因素对结果的影响①双缩脲溶液制备：取1.3.2溶液8ml、9ml、10ml、11ml、12ml分别加入1.3.1溶液10ml混匀放置冷却至室温。②分别取人造血浆(蛋白含量40.0g/L)1.0ml置于20ml容量瓶中，分别加入上述双缩脲溶液10ml，用0.9%NaCl溶液定容至刻度，摇匀后放置10min，用紫外可见分光光度计在520～600mn进行扫描，取最大峰值作为结果。结果见表2、图2。表2碱性因素对结果的影

3、响（略）注：A为520～600mn最大吸收值。1.4.3合适的碱性强度重复1.4.2只是把1.3.2溶液换成1.3.3溶液，所得结果见表3、图3。表3碱性强度（略）1.4.4标准曲线的确定以确定蛋白含量人造血浆(蛋白含量40.0g/L)为标准品，取0.75ml、1.0ml、1.25ml、1.5ml做标准曲线，结果见图4。2结果2.1温度对结果的影响显然实验室温度对此方法的结果没有明显影响。2.2碱性因素对结果的影响实验结果显示碱性强度对此方法影响较大。2.3合适的碱性强度实验结果表明当NaOH溶液浓度在4M左右时碱性强度微弱的变化对此方法结果无影响。2.4标准曲线的确定3小结利用本研究

4、方法可以提高蛋白质含量测定的速度，因为在检测过程中省去了确定标准曲线的时间。本方法对蛋白质类药品生产过程中的含量控制具有实际的意义。【