吸入一氧化氮对大鼠无心跳供体肺缺血再灌注损伤的影响

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时间:2018-11-22

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1、吸入一氧化氮对大鼠无心跳供体肺缺血再灌注损伤的影响【摘要】目的探讨一氧化氮(NO)对大鼠无心跳供体(NHBD)肺缺血再灌注损伤(IRI)的影响。方法大鼠随机分为Ⅰ组:有心跳供体(HBD)组;Ⅱ组:NHBD-吸氧组;Ⅲ组:NHBD-吸氧+NO组。Ⅰ组在处死的同时灌注4℃低钾右旋糖苷液(LPD),Ⅱ组、Ⅲ组处死后维持辅助呼吸,放置室温中30min再灌注LPD液。供肺置于4℃LPD液中4h后行原位左肺移植术。术后维持辅助呼吸1h。Ⅲ组通气吸氧的同时吸入浓度为40×10-6的NO。结果与Ⅱ组比较,Ⅲ组肺顺应性、动脉血氧分压高,肺组织丙二醛含量低(P<0.05)。结论吸入低浓度NO可减轻大鼠NHB

2、D肺缺血再灌注损伤。【关键词】一氧化氮;组织供者;肺移植;缺血;再灌注损伤;疾病模型,动物ABSTRACT:ObjectiveToevaluatetheeffectofinhalednitricoxide(NO)ontheischemia-reperfusioninjury(IRI)inratlungsfromnon-heart-beatingdonors(NHBD).MethodsSixtySprague-Dalydividedinto3groups:groupⅠ,heart-beatingdonor;groupⅡ,NHBDinutesofischemiatime(DAinthelunglo

3、enttoattenuatetheacuteinjuryresultedfromtheischemia-reperfusionintheratlungsfromnon-heart-beatingdonors.KEYia;reperfusioninjury;diseasemodels,animal肺移植是治疗晚期肺部疾病的成熟方法。但肺移植例数却一直得不到显著提高,其中一个重要原因就是合适供体肺严重短缺。若能应用无心跳供体(NHBD)肺,将极大缓解供肺来源紧张的状况。先前笔者的研究已证实NHBD肺可作为供体肺[1]。但缺血再灌注损伤(IRI)限制了NHBD肺应用。为减少IRI对NHBD肺造成的影

4、响,保护NHBD肺的结构和功能的完善,笔者探讨一氧化氮(NO)对NHBD肺的保护作用。  1材料和方法  1.1动物  健康雄性Sprague-Dain再灌注LPD液。供肺置于4℃LPD液中4h后行原位左肺移植术。术后维持辅助呼吸1h。Ⅲ组通气吸氧的同时吸入浓度为40×10-6的NO。  1.3.2取HBD肺  供体大鼠腹腔注射戊巴比妥钠50mg/kg。仰卧位,气管插入16号穿刺针,连接动物人工呼吸机,吸入氧浓度(FiO2)50%,呼吸模式为持续容量控制,呼吸频率80~90min-1,潮气量1mL/100g,保持呼气末正压(PEEP)2~3cmH2O(1cmH2O=9.8Pa)。自左股静脉注射

5、肝素钠500IU。5min后剪开胸骨及腹壁,剪断腹主动脉放血。心脏停跳的同时于肺动脉主干插入20号穿刺针,结扎并固定,剪破左心耳,维持通气的同时自穿刺针灌注4℃LPD液20mL,灌注压25cmH2O,在肺吸气末切下心肺组织,立即浸泡在4℃LPD液中5min,剪下膨胀的左肺,保存在4℃LPD液中4h。  1.3.3取NHBD肺  处死供体鼠后,室温下维持通气30min再灌注LPD液。NHBD-吸氧组吸入气不含NO,NHBD-吸氧+NO组吸入浓度为40×10-6的NO。  1.3.4左肺移植  受体鼠麻醉、插管后,右侧卧位,经左第5肋间切口充分暴露左肺门,尽可能靠近远心端剪除左肺。供肺包以冰水浸泡

6、的湿纱布,放入左侧胸腔,在手术显微镜下9-0锦纶线依次吻合左肺静脉、左主支气管、左肺动脉,连续吻合主支气管膜部,软骨部间断吻合,10-0锦纶线间断吻合肺动脉,连续吻合肺静脉。左肺获得再灌注后,间断加大PEEP,使其充分膨胀。Ⅲ组受体在肺移植过程中维持NO通气(浓度为40×10-6)。  1.4观察指标  左肺再灌注后1h,经右第5肋间结扎右肺门,采集数据。  1.4.1肺顺应性  呼吸机直接读取数据肺顺应性=潮气量/(吸气末压-呼气末压)  1.4.2动脉血气  受体鼠结扎右肺门前后15,30min分别从颈动脉放血0.3mL,测定动脉血氧分压(PaO2)和二氧化碳分压(PaCO2)。  1.4

7、.3肺组织丙二醛(MDA)含量  取1cm×1cm的肺组织,冲洗干净,研磨成匀浆,按

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