山东产不同农家品种瓜蒌的种子蛋白电泳分析论文

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1、山东产不同农家品种瓜蒌的种子蛋白电泳分析论文孙稚颖，周凤琴，郭庆梅【关键词】瓜蒌；,,农家栽培品种；,,种子蛋白；,,SDS摘要：目的：鉴定山东产瓜蒌的不同农家品种，并探讨它们的亲缘关系。方法：利用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，对山东产瓜蒌的不同农家品种、野生种及湖北栝楼进行种子蛋白电泳分析，并绘制指纹图谱。结果：山东产瓜蒌不同农家品种和野生种种子的蛋白电泳图谱具有多条共有带，而与湖北栝楼图谱差异显著。结论：种子蛋白电泳分析可用于瓜蒌不同农家栽培品种的辅助鉴别，仁瓜蒌与牛心瓜蒌、小光蛋与野瓜蒌彼此间亲缘关系较近。关键词：瓜蒌；农家栽培品种；种子蛋白；S

2、DS聚丙烯酰胺凝胶电泳AnalysisofSeedProteinElectophoresisofFarmCultivarsofFructusTrichosanthisfromShandongAbstract:Objective:TodeterminedifferentcultivarsofFructusTrichosanthisinShandong,andexploretheirgeicrelationships.Methods:SDS-polyacrylamidegeleletrophoresisployedtoanalyzetheseedprotei

3、nofdifferentcultivarsandShandongandTrichosantheshubehensis,andthefinger-printsanymonbandsamongdifferentcultivarsandthem.Conclusion:AnalysisofseedproteinelectophoresiscanbeusedtodiagnosisfarmcultivarsofFructusTrichosanthis,andtherearecloserrelationshipsbetple.Keycultivars;Seedprot

4、ein;SDS-PAGE蛋白质作为基因的直接稳定产物.freel.［3］。由于长期的栽培选育，形成了一系列的农家栽培品种；近年来，又由于一些地区和药农的盲目引种，致使瓜蒌的农家栽培品种出现混乱，甚至混种其他种类，质量变化较大，极大的影响了山东道地药材瓜蒌的生产发展。本实验采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法，对山东道地药材瓜蒌的不同农家栽培品种、野生种以及对照湖北栝楼的种子蛋白进行了分析研究，旨为它们的分类鉴定、亲缘关系以及进一步的育种研究提供参考资料。1材料和方法1.1材料收集各农家品种成熟果实，取出种子，洗净晾干。供试样品来源见表1，均经山东中医药大学

5、药学院周凤琴教授准确鉴定。1.2方法1.2.1蛋白质提取种子去种皮，称重0.1g，加稀释4倍的浓缩胶缓冲液（PH6.7）2ml冰浴研磨，离心取上清液，加入等体积样品处理液，沸水浴3min，冷却后10000转离心5min，4℃贮藏备用。1.2.2电泳［4］采用SDSPAGE法，分离胶10%，浓缩胶5%，垂直平板电泳，加样量为20μl。电极缓冲液为TrisGly（pH8.3）系统，起始电压75V，在指示剂进入分离胶后改为150V，恒压电泳3h，待指示剂至胶板下沿1cm左右停止电泳。表1实验材料及来源（略）1～7号为山东产瓜蒌的农家栽培品种，原植物为栝楼Tri

6、chosantheskirilo.，8号为栝楼野生种的果实，9号为湖北栝楼TrichosantheshupehensisC.Y.ChengetYueh的果实1.2.3染色将胶板浸于考马斯亮蓝染色液中，在恒温培养箱内37℃染色1～2h，至谱带清晰，后用蒸馏水漂洗，再放入脱色液（0.5mol/L的NaCl水溶液）中约2h，直至谱带背景清晰。1.2.4指纹图谱分析电泳胶板用凝胶成像紫外分析仪进行拍照，复日FR980A生物电泳图像分析系统分析，以泳道中各谱带的光密度值OD为纵坐标，谱带位置POS为横坐标绘制指纹图谱。2结果瓜蒌不同农家栽培品种、野生种以及对照湖北

7、栝楼种子蛋白电泳谱带见图1；指纹图谱见图2。由图可以看出，瓜蒌不同农家品种及野生种具有多条共有带，同时各农家栽培品种间在某些条带的有无、强弱等方面有所差异，而对照湖北栝楼与瓜蒌不同农家栽培品种及野生种在谱带数目和位置上均具有显著差异，尤其是缺少一条所有栝楼Trichosantheskirilo.及野生种都具有的强特征带。3讨论3.1种子蛋白电泳图谱为山东产瓜蒌不同农家栽培品种提供了鉴定信息。山东产瓜蒌不同农家栽培品种的种子蛋白电泳谱带具有多条共有带，表明它们具有相似的遗传基础，这也是鉴定真伪瓜蒌的重要标记。不同农家栽培品种之间在谱带数目、带的分布与强弱等

8、方面存在着或多或少的差异，表明了各农家栽培品种遗传物质变异的不同，可用于品种的辅