青天葵中两种黄酮提取工艺的正交实验优选论文

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1、青天葵中两种黄酮提取工艺的正交实验优选论文周燕园，甄汉深，袁叶飞，钟振国【摘要】目的优选青天葵中两种黄酮类成分—鼠李柠檬素和鼠李秦素的最佳提取工艺条件。方法采用正交实验进行提取方法的研究，用HPLC法测定两种黄酮的含量。结果在选定的色谱条件下,RP-HPLC方法较好，结果理想。青天葵中两种黄酮的最佳提取工艺为加75%甲醇20ml，超声提取60min。结论建立了准确可靠、分析速度快可同时检测青天葵中两种黄酮的分析方法，优化了质量可控的提取工艺。【关键词】青天葵鼠李柠檬素鼠李秦素高效液相色谱法正交实验Abstract:ObjectiveTo

2、optimizetheextractionprocessoftnocitrinandrhamnazinfromNerviliafordii(Hance)Schltr..MethodsTheextractionmethodizedbyorthogonalexperimentandthecontentsoftinedbyHPLC.ResultsUndertheoptimizedchromatographiccondition,theRP-HPLCple,rapidandaccurate.Theoptimumextractingprocedu

3、rel75%methanolandultrasonicextractionforsixtymin.ConclusionThemethodissetupanditcansimultaneously,rapidlyandaccuratelydetecttNerviliafordii(Hance)Schltr..ThemodifiedextractiontechnologyofNerviliafordii(Hance)Schltr.isstableandreliable.Keynocitrin;Rhamnazin;HPLC;Orthogona

4、ldesign青天葵别名青莲、入地珍珠、假天麻、独叶莲、独脚莲、山米子、半边伞等［1］.freelstation），Agilent8453紫外-可见分光光度计（美国安捷伦公司），BP211D电子分析天平（德国赛多利斯），Simplicity185超纯水系统（美国MILLIPORE公司），SB3200-T超声清洗器（上海必能信有限公司），LG16-S、NMR确证结构,其质量分数均为98%以上)。水为超纯水，甲醇、乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯，均经0.45μm微孔滤膜滤过后使用。2方法与结果2.1含量测定方法2.1.1色谱条件色谱柱为I

5、nertsilODS-3C18柱（250mm×4.6mm,5μm）（GlScience.Co.Ltd）；流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液（63∶37）；流速1.0ml·min-1；检测波长368nm；柱温40℃；进样量10μl。混合对照品溶液与样品溶液的色谱图见图1。2.1.2对照品溶液的制备精密称定鼠李柠檬素对照品0.40mg于10ml量瓶中,甲醇溶解并稀释至刻度,配制成0.04mg/ml鼠李柠檬素对照溶液;精密称定鼠李秦素对照品5.60mg于10ml量瓶中,.freelg/ml鼠李秦素对照溶液。2.1.3混合对照品溶液的制备分别取鼠

6、李柠檬素对照溶液和鼠李秦素对照溶液各2ml混匀，作为混合对照品溶液。2.1.4线性关系的考察取鼠李柠檬素对照溶液5.0，7.5，10.0，12.5，15.0，17.5μl进样分析。以峰面积对进样质量作线性回归,所得回归方程为Y=1979.61456X-10.230767，r=0.99991。结果表明鼠李柠檬素在0.2～0.7μg与峰面积呈良好的线性关系。取鼠李秦素对照溶液5.0，7.5，10.0，12.5，15.0，17.5μl进样分析。以峰面积对进样质量作线性回归,所得回归方程为Y=1913.65365X+32.167478，r=0.

7、99992。结果表明鼠李秦素在2.8～9.8μg与峰面积呈良好的线性关系。2.2青天葵提取方法的选择各取青天葵药材1g,分别按回流提取法、索氏提取法和超声提取法处理（加75%甲醇20ml，提取时间1h，提取1次），以两种黄酮鼠李柠檬素和鼠李秦素的峰面积为指标测定。结果见表1。由表1可知，超声提取方法提取鼠李柠檬素和鼠李秦素效果最好。因此，选择超声提取方式提取化学成分。表1不同提取方法对指标成分提取效果的比较（略）2.2.1正交实验因素水平的确定：根据预试验结果,以鼠李柠檬素、鼠李秦素的峰面积作为评价指标筛选最佳提取方法，确定主要考察甲醇

8、浓度、甲醇体积和超声提取时间3个因素,每个因素设3个水平。选用L9(34)正交实验表设计实验。结果见表2。表2正交实验因素及水平（略）正交实验方法：精密称取青天葵药材粉末1g于50ml具塞三角瓶中，分别按正