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时间:2018-11-21
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1、参参康心胶囊对小鼠心肌缺血线粒体膜SOD、MDA的影响作者:兰云明海霞刘喜平李沛清廖湘琦【摘要】目的:观察参参康心胶囊对缺血小鼠心肌线粒体丙二醛、超氧化物歧化酶的影响。方法:腹腔注射垂体后叶素(Pit)造成小鼠心肌缺血损伤为模型,测定心肌线粒体膜超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量。结果:模型组与空白对照组相比,MDA明显升高(p<0.01),参参康心胶囊大、中、小三剂量组与模型组比较MDA含量明显下降,有显著性差异,但无明显的剂量-效应关系。模型组心肌细胞线粒体SOD活力略有下降,但不明显,而参参康心胶囊大剂量组SOD活力有显著增高,而中小剂量不明显。结论:参参康心胶囊保
2、护缺血心肌细胞线粒体损伤的机理可能与升高线粒体SOD活性、降低MDA含量有关。【关键词】参参康心胶囊心肌缺血线粒体丙二醛超氧化物歧化酶氧自由基是造成心肌缺血的重要因素之一。细胞内丰富的线粒体对氧自由基损伤十分敏感[1、2],所以通过对线粒体的代谢、结构及功能变化的研究,既可以了解心肌缺血性损伤的机制,又可以了解药物的治疗效果。新药参参康心胶囊来源于名老中医验方,由人参等三味药物组成,经现代制药工艺加工而成,临床应用多年,对冠心病、心肌梗死等心肌缺血性疾病有显著疗效。为了近一步明确该方抗心肌缺血损伤的作用机制,我们观察了该药对缺血心肌线粒体膜氧自由基及脂质过氧化的影响,以期进一步了解该制剂对
3、改善心肌缺血的作用机制,为临床治疗心肌缺血性疾病提供可靠的理论依据。1材料1.1实验动物昆明种普通级健康小鼠,雌雄各半,体重30.0±2.0g,由兰州大学医学实验中心提供。动物合格证号:医动字第14—005。1.2实验药物参参康心胶囊:①处方由人参等三味药物按一定的比例组成。由兰州佛慈制药股份有限公司制备,兰州中药现代化工程技术中心监制。规格为0.5g·粒-1(每粒相当于生药1g),实验时用生理盐水溶解为120mg生药/ml。②地奥心血康胶囊:成都地奥制药集团有限公司,批号:0503079代号022,国药准字:Z10910051。③垂体后叶素:上海第一生化药业公司,上海生物化学制药厂,批号
4、:041031。1.3主要试剂①丙二醛(MDA)测定试剂盒,南京建成生物工程研究所,批号:20050919。②超氧化物歧化酶(SOD)测试盒,南京建成生物工程研究所,批号:20050927。1.4主要仪器电子天平(SartoriusBL150,北京赛多利斯仪器系统有限公司);离心机(D-37520,德国);数显恒温水浴锅(HH-4,郑州杜甫仪器厂);紫外分光光度计(UV-9100,北京瑞利分析仪器公司)。2方法2.1分组及小鼠心肌缺血模型的建立昆明种普通级健康小鼠,60只,体重30.0±2.0g,(兰州大学医学实验中心提供)。将动物随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组(地奥心血康组)、参
5、参康心胶囊小剂量组、参参康心胶囊中剂量组、参参康心胶囊大剂量组共六组,每组10只。参参康心胶囊低剂量组(1.5g生药/kg)、中剂量组(3g生药/kg)、大剂量组(6g生药/kg)用参参康心胶囊溶液分别按0.25ml/次、0.5ml/次、1ml/次灌胃;阳性对照组按成人常规剂量折算后给药即(0.076g/kg),1ml/次灌胃;空白对照组与模型组每日给予1ml生理盐水,各组每天灌胃2次,连续一周。参考2.3参参康心胶囊对垂体后叶素模型小鼠心肌细胞线粒体超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量的影响取各组线粒体混悬液,采用硫代巴比妥酸法[3],按照南京建成生物工程研究所MDA测定试剂盒
6、说明书的步骤进行测定。2.4统计学方法将所测结果按试剂盒说明书计算,采用SPSS13.0软件统计,用t检验。计量资料,以均数±标准差(x±s)表示。3结果3.1参参康心胶囊对垂体后叶素模型小鼠心肌细胞线粒体超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响结果见表1。从表中可见,垂体后叶素所致心肌缺血模型组SOD活力与空白对照组比较无明显变化,而参参康心胶囊大剂量组与模型组比较,SOD活性明显增强,p<0.01。参参康心胶囊的其它两组与模型组比较SOD活力有一定的增强,但无统计学意义。表1参参康心胶囊对Pit模型小鼠心肌细胞线粒体SOD活性的影响(略)注:与模型组比较*P<0.01。3.2参参康心胶
7、囊对垂体后叶素模型小鼠心肌细胞线粒体丙二醛(MDA)含量的影响结果见表2。从表中可见,模型组与空白对照组相比(p<0.01),即说明用垂体后叶素腹腔注射复制心肌缺血模型成功;阳性对照组与模型组比较(p<0.01),与参参康心胶囊组比较无统计学意义;参参康心胶囊大、中、小三剂量组与模型组比较MDA含量明显下降有显著性差异,表明参参康心胶囊对心肌缺血有明显防治作用,但参参康心胶囊三剂量组间无显著性差异。表2参参康
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