三黄组合物对2型糖尿病大鼠模型糖脂代谢的影响论文

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1、三黄组合物对2型糖尿病大鼠模型糖脂代谢的影响论文徐楠楠朱宝长王卓吴强三金瑾胡文祥【摘要】目的探讨由黄连、黄芪和地黄水提物组成的组合物(简称三黄组合物，SH)对2型糖尿病(DM)大鼠糖脂代谢的影响并初探其机制。方法以高糖高脂饲料喂养SD大鼠两个月后小剂量腹腔注射链脲佐菌素（STZ）(25mg·kg-1)，连续注射3d，建立糖尿病大鼠模型，随机分为模型组(MC)，盐酸二甲双胍组(Met)，三黄组合物低剂量组(SHL)、中剂量组(SHM)、高剂量组(SHH)，外加常规饲料喂养的正常组。给药后第3.freelo公司产品；MD-200半自动生化分析仪，华士

2、信医疗集团公司产品；TU-1810紫外可见分析仪，北京普析通用仪器有限责任公司产品。1.3药品与试剂黄连、黄芪、地黄的药用饮片，购自北京京卫大药房,经同仁堂范国强教授鉴定分别为毛茛科植物黄连CoptischinensisFranch的干燥根茎，豆科植物蒙古黄芪Astragalusmembrana-ceus(Fisch.)Bge.ver.mongholicus(Bge.)Hsiao的干燥根，玄参科植物地黄RehmanniaglutinosaLibosch的干燥根茎，用时以黄连、黄芪、地黄按生药量1∶4∶2的比例提取得水煎剂，混合浓缩至相应浓度，4℃

3、保存备用；盐酸二甲双胍，贵州天安药业股份有限公司产品；链脲佐菌素(STZ)，美国Sigma公司生产；柠檬酸、柠檬酸三钠，北京化工厂，A.R产品；强生稳豪血糖试纸，LifeScan公司产品；总胆固醇试剂盒，甘油三酯试剂盒，高、低密度脂蛋白试剂盒，葡萄糖测定试剂盒，均购自中生北控生物科技有限公司产品；游离脂肪酸，尿酸，转氨酶，胰岛素测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所产品。2方法2.1糖尿病大鼠模型的建立参照文献［1，2］设计，略有改进。取SD雄性大鼠70只，按体重随机分为6组，一组为正常对照组(NC)，常规饲料喂养，其余五组喂高糖高脂饲料，诱导胰

4、岛素抵抗(高糖高脂饲料配方：10%猪油、20%蔗糖、1%胆酸钠、2.5%胆固醇、66.5%常规饲料，北京科澳协力饲料有限公司制作)。8周后，将高糖高脂饲料喂养的大鼠禁食12h，ip新鲜配制的STZ溶液(25mg·kg-1)，连续注射3d，空白对照组ip柠檬酸－柠檬酸三钠缓冲溶液，72h后，将大鼠禁食3h，剪尾测空腹血糖值，取连续3d测得的血糖值大于11.1mmol·L-1者为造模成功者。2.2分组与给药将造模成功大鼠共57只，按血糖值随机分为5组，其中，模型对照组(MC)10只，阳性药盐酸二甲双胍对照组（Met0.3g·kg-1）11只，三黄组合

5、物低剂量组（黄连0.5g·kg-1，地黄1g·kg-1，黄芪2g·kg-1，SHL)、中剂量组(黄连1g·kg-1，地黄2g·kg-1，黄芪4g·kg-1,SHM)、高剂量组(黄连2g·kg-1，地黄4g·kg-1，黄芪8g·kg-1,SHH)各12只，灌胃给药。其中，正常组与模型组给予相应剂量的自来水。除NC外，其他组继续高糖高脂饲料喂养。2.3空腹血糖(FPG)与血脂水平的测定灌胃治疗第3、10周大鼠禁食3h，剪尾取血测定大鼠FPG。于实验结束前1天，大鼠禁食14h，ip戊巴比妥钠麻醉大鼠，经腹主动脉取血，半自动生化分析仪测定大鼠血清TC，T

6、G，HDL-C，LDL-C水平。2.4血清胰岛素(insulin)，血清转氨酶量(ALT)，游离脂肪酸(FFA)，尿酸(uricacid)的测定按照试剂盒说明书测定，所用仪器为半自动生化分析仪。2.5肝糖原提取和含量测定实验末期处死大鼠，取肝脏，将表面血液冲洗干净，称取0.1g左右，用PBS组织匀浆(1g∶50ml)，加4％的磺基水杨酸0.5ml于0.5ml匀浆中，混匀，离心，取上清液沸水浴15min，冷却，冰浴下加蒽酮试剂，TU-1810紫外可见分光光度计测620nmOD值。2.6糖异生实验大鼠灌胃治疗7周后，禁食12h，ipL-丙氨酸（2g·

7、kg-1），采集0，60min时血测血糖水平。2.7数据处理实验数据以±s表示，采用双样本等方差分析的t检验进行统计分析。3结果3.1三黄组合物对糖尿病大鼠FPG的影响如表1所示，给药后第3周，除低剂量组作用不明显外，阳性药组，中、高剂量组血糖与模型组比较均显著降低(P0.05，P0.01)，第10周测大鼠血糖水平，结果显示各给药组DM大鼠血糖降低很明显，与模型组比较差异较显著(P0.001)，其中，三黄中剂量组与阳性药比较无统计学差异。表1三黄组合物对糖尿病大鼠血糖的影响与模型组比较：1）P0.05,2）P0.01,3）P0.001；n=103

8、.2三黄组合物对DM大鼠血脂水平的影响如表2所示，高糖高脂饲料喂养并灌胃给药10周以后，模型组TC，TG水平明显高于其他给药组，而不同剂