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1、不同产地大青叶中有机酸含量的测定论文.freelIsatidisfromdiffererntHabitats.MethodsAccordingtoultravioletabsorptionatlasescharacteristicsofthethreemainorganicacidinFoliumIsatidis,DSAUV-2401inatetheacidcontentofFoliumIsatidisfromdiffererntHabitats,andcarriedontoinspectthemethodology.ResultsThedif
2、ferenceoftheacidcontentofFoliumIsatidisfromdiffererntHabitatsisnotable.ConclusionThemethodissimple,accurateandduplicatedgood,andcanbeusedasquantitativeanalysismethodoforganicacidinFoliumIsatidis.KeyIsatidis；organicacid；ultravioletspectrophotometricmethod水杨酸、丁香酸和苯甲酸是大青叶中常见的3种
3、有机酸成分。对于大青叶中有机酸含量测定的方法已有相关的报道1,但是这些方法较繁琐。本实验采用紫外分光光度法进行测定,结果较为准确,可作为大青叶中有机酸定量分析的参考方法。1仪器与试药日本岛津UV-2401型紫外分光光度计；万分之一瑞士梅特勒AE-100电子分析天平；HH-S型水浴锅。苯甲酸与水杨酸对照品(中国药品生物制品检定所,批号110716-200408)；丁香酸对照品(AlfaAesar公司)；各产地大青叶药材(经鉴定为十字花科植物菘蓝的叶)。所用试剂均为分析纯；水为蒸馏水。2方法与结果2.1原理根据3种有机酸在200～400nm范围内的
4、全波长扫描图可知,水杨酸在305nm处有吸收峰,.freel处丁香酸有吸收峰,而此处水杨酸无吸收,苯甲酸吸收极弱,此波长可用于测定丁香酸的含量；在240nm处3个组分吸收重叠,可用于测定苯甲酸、水杨酸及丁香酸的含量之和,减去水杨酸及丁香酸的含量,即为苯甲酸的含量。2.2对照品溶液的制备精密称取标准品水杨酸、丁香酸和苯甲酸5mg,分别置于5mL容量瓶中,加蒸馏水适量定容至刻度,摇匀,备用。2.3样品溶液的制备将干燥后的药材粉碎过80目筛,取约1g,精密称定。分别置具塞磨口的100mL锥形瓶中,加入50mL甲醇,超声提取20min,过滤,重复2次,
5、合并滤液,挥干甲醇,加入适量75%的乙醇溶解残渣,转移样品溶解液置25mL容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度,摇匀。再精密量取1mL样品溶液,置50mL容量瓶中定容至刻度,摇匀待测。2.4线性关系考察分别精密量取水杨酸、丁香酸标准品溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mL至10mL容量瓶中,加蒸馏水稀释至刻度,摇匀,备用。精密量取苯甲酸、水杨酸、丁香酸标准品溶液分别各0.05、0.10、0.15、0.20、0.25mL至10mL容量瓶中,加蒸馏水定容至刻度,摇匀,备用。以水作为空白参比溶液,分别在305、261、240nm波长下测定其吸收度。以
6、吸收度A为纵坐标,标准品浓度X(mg/mL)为横坐标,绘制标准曲线。得水杨酸的回归方程：Y＝25.647X－0.0207,r＝0.9991,表明水杨酸在0.0116～0.0580mg/mL范围内呈良好的线性关系；丁香酸的回归方程：Y＝38.787X＋0.0944,r＝0.9992,表明丁香酸在0.0094～0.0470mg/mL范围内呈良好的线性关系；混合酸的回归方程：Y＝20.69X＋0.1542,r＝0.9998,表明混合酸在0.0168～0.0840mg/mL范围内呈良好的线性关系。2.5精密度试验取同一样品溶液,以蒸馏水作为参比溶液,分
7、别测其吸收度,连续5次,在305nm下的RSD＝0.38%,在261nm下的RSD＝0.17%,在240nm下的RSD＝0.26%。表明仪器精密度符合要求。2.6稳定性试验取新配制的同一样品溶液,以蒸馏水作为参比溶液,分别于0、2、4、6、8h时在3个波长下分别测其吸收度,连续5次,在305nm下的RSD＝0.47%,在261nm下的RSD＝0.13%,在240nm下的RSD＝0.27%。表明供试品溶液在8h内稳定。2.7重复性试验取同一批号的样品5份,按“2.3”项下方法制备样品溶液,以蒸馏水作为参比溶液,在3个波长下分别测其吸收度,连续5次
8、,在305nm下的RSD＝0.49%,在261nm下的RSD＝0.17%,在240nm下的RSD＝0.31%。表明仪器精密度符合要求。2.8样品含量测
