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时间:2018-11-21
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1、HLAG在子宫内膜异位症中的表达及意义论文【摘要】目的:研究人类白细胞抗原G(HLAG)在子宫内膜异位症患者在位和异位内膜组织中的表达,探讨HLAG分子在内异症发生发展中的作用.方法:采用链霉素抗生物素蛋白过氧化物酶(SP)法检测子宫内膜异位症患者19例在位子宫内膜和30例异位内膜中HLAG分子的表达水平,以30例非子宫内膜异位症患者的子宫内膜作为对照.结果:内异症在位子宫内膜和异位内膜HLAG的阳性表达率(42%,53%)均显著性高于对照组正常子宫内膜(P0.01),但在内异症在位内膜和异位内膜之间HLAG的阳性表达率无显著性差异(P0.05).结论:异常表达的H
2、LAG分子可能在内异症的发生发展过程中发挥着作用.【关键词】人类白细胞抗原G;子宫内膜异位症;免疫组织化学0引言子宫内膜异位症(endometriosis,简称内异症)是妇产科常见多发病,发病率达10%~15%[1],近年来有逐渐增高的趋势.已有研究表明,内异症是一种免疫性疾病,其发生与机体的免疫应答系统密切相关.人类白细胞抗原(HLA)是人类的主要组织相容性复合物.freelo内均未患过感染性疾病,未用内异症治疗药物或激素类药物,未接受过免疫抑制剂治疗.生化及X线摄片检查均无肝炎、糖尿病、结核、肿瘤或其他自身免疫性疾病.两组患者年龄差异无显著性(P0.05),无血缘关系.抗H
3、LAG分子mAb(美国Alexis公司),SP超敏试剂盒(福州迈新生物试剂公司).1.2方法1.2.1标本处理标本经40g/L甲醛固定,石蜡包埋,3μm厚连续切片,HE染色,做病理组织学检查.1.2.2免疫组化染色采用SP法,主要步骤如下:①常规处理后,加入第一抗体,即鼠抗人HLAGmAb,湿盒中4℃过夜;②加入第二抗体,即生物素标记的羊抗鼠IgG,37℃湿盒中10min;③加入链霉菌抗生物素过氧化物酶,37℃湿盒中10min;④二氨基联苯胺(DAB)显色,常规脱水、透明、中性胶封固.因HLAG分子在组织分布上有一定的局限性,故选胎盘组织为阳性对照.1.2.3染色结果判
4、断HLAG以子宫内膜细胞质或细胞膜出现棕黄色颗粒为阳性细胞,在400倍光镜下至少观察5个视野,阳性细胞>5%定义为阳性,≤5%为阴性[2].统计学处理:采用统计学软件SPSS10.0进行分析.各组之间率的比较采用χ2检验,以P0.05为差异有显著性.2结果SP法染色阳性产物为棕黄色,HLAG抗原阳性染色定位于细胞质内或细胞膜上.对照组正常子宫内膜HLAG抗原的表达均呈阴性.在内异症组,有8例在位子宫内膜(图1A)和16例异位内膜组织(图1B)中的内膜细胞呈不同程度的阳性染色.内异症在位子宫内膜HLAG抗原的阳性表达率(42%)显著性高于对照组正常子宫内膜(P0.01,表1
5、);内异症异位子宫内膜HLAG抗原的阳性表达率(53%)显著性高于对照组正常子宫内膜(P0.01);内异症在位子宫内膜与异位子宫内膜HLAG抗原的阳性表达率无显著性差异(P0.05).A:在位子宫内膜;B:异位子宫内膜.表1在位子宫内膜和异位子宫内膜及正常子宫内膜中HLAG抗(略)3讨论HLAG分子主要表现免疫抑制功能,抑制NK细胞、部分T细胞的细胞溶解作用及诱导CD8+T细胞凋亡[3];HLAG通过调节细胞因子的分泌,使Th1/Th2平衡移向Th2方向,引起免疫抑制[4].HLAG还可影响细胞因子的分泌,如IL10,IL13,TNFα,IFNγ等[5],致使细
6、胞因子分泌紊乱也可能引起机体免疫耐受.我们的研究发现:内异症在位子宫内膜HLAG抗原的阳性表达率(42%)显著性高于对照组正常子宫内膜.因而推测当在位子宫内膜脱落异位到机体其他部位时,其早已异常表达的HLAG分子可能通过以上几种途径协助该内膜逃避机体的免疫监视,不被清除,并成功种植生长.而对于没有HLAG分子“保护”的正常子宫内膜异位后将会被机体的免疫系统所识别并清除.这就可能解释了为什么多数妇女有经血反流现象,但只有少数人发展成为内异症.由此可见内异症患者在位子宫内膜是不同于正常子宫内膜的,在位子宫内膜中异常表达的HLAG分子可能使其具有异位种植生长的潜能,对于内异症的发
7、生起到一定的作用.我们还发现内异症异位子宫内膜HLAG抗原的阳性表达率(53%)显著性高于对照组正常子宫内膜.此实验结果与Barrier等[6]的最新研究结果是一致的.但Hornung等[7]在内异症患者异位内膜中并未检测到HLAG分子的表达,这可能是由于研究对象的选择和样本量过小造成的差异.内异症异位内膜HLAG的阳性表达率略高于其在位内膜,推测可能在腹腔内某些细胞因子的作用下,使脱落后异位种植的内膜即异位内膜HLAG的表达得以上调.也有相关研究已证实某些细
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