法罗培南对质粒介导β内酰胺酶的稳定性及抑酶作用研究

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1、法罗培南对质粒介导β内酰胺酶的稳定性及抑酶作用研究【摘要】目的研究青霉烯类抗生素法罗培南对14种标准β内酰胺酶(TEM1、TEM2、TEM3、TEM5、SHV1、SHV2、SHV4、SHV5、PSE1、PSE2、PSE3、OXA1、OXA2和OXA3)的稳定性及抑酶作用。方法采用紫外分光光度法,以其它β内酰胺抗生素(亚胺培南、美罗培南、头孢噻啶、头孢西丁、头孢呋辛、头孢噻肟、头孢哌酮、氨曲南、克拉维酸、舒巴坦、三唑巴坦)为对照。结果所有抗生素对超广谱β内酰胺酶(TEM3

2、、TEM5、SHV2、SHV4和SHV5)的IC50低于1.9μmol/L;但对广谱酶TEM1、TEM2和SHV1的IC50超过100μmol/L。法罗培南对OXA1、OXA2和OXA3的IC50低于1.0μmol/L。法罗培南、亚胺培南、美罗培南和头孢西丁对14种标准β内酰胺酶均稳定。结论法罗培南对14种β内酰胺酶的抑制作用强于亚胺培南和美罗培南。【关键词】法罗培南β内酰胺酶稳定性抑酶作用StudyofstabilityandinhibitoryactivityofABSTRAC

3、TObjectiveTostudythestabilityandinhibitoryactivityoffaropenemagainst14plasmidmediatedstandardβlactamases(TEM1,TEM2,TEM3,TEM5,SHV1,SHV2,SHV4,SHV5,PSE1,PSE2,PSE3,OXA1,OXA2andOXA3).MethodTheultravioletspectrophotometrys(imipenem,meropenem,ceph

4、aloridine,cefoxitin,cefuroxime,cefotaxime,cefoperazone,aztreonam,clavulanicacid,sulbactamandtazobactam)ascontrol.ResultsFaropenem,imipenem,meropenemandcefoxitinidmediatedβlactamases.TheIC50sofalltestedantibioticsagainstextendedspectrumβlactamases(TEM

5、3,TEM5,SHV2,SHV4andSHV5)ol/L.TheIC50sofallantibioticsagainstbroadspectrumβlactamases(TEM1,TEM2andSHV1)ol/L.TheIC50soffaropenemagainstOXAβlactamases(OXA1,OXA2andOXA3)ol/L.ConclusionFaropenemshoipenemandmeropenemagainst14plasmidmediatedβlacta

6、mases.KEYP,美国MerckSharpDohme公司);美罗培南(meropenem,MRP,英国Zeneca药厂);头孢噻啶(cephaloridine,CER,Sigma公司);头孢西丁(cefoxitin,CFX,美国MerckSharpDohme公司);头孢呋辛(cefuroxime,CXM,Glaxo公司);头孢噻肟(cefotaxime,CTX,重庆制药六厂);头孢哌酮(cefoperazone,CPZ,Pfizer公司);氨曲南(aztreonam,AZ,Squibb公司);克拉维酸(

7、clavulanicacid,CA,中国药品生物制品检定所);舒巴坦(sulbactam,SB,Pfizer公司);三唑巴坦(tazobactam,TB,Lederle公司)。1.2菌株14株标准产酶菌由英国London大学赠送,分别产生质粒介导的TEM1、TEM2、TEM3、TEM5、SHV1、SHV2、SHV4、SHV5、OXA1、OXA2、OXA3、PSE1、PSE2和PSE3β内酰胺酶。除PSE2、PSE3产酶株为铜绿假单胞菌外,其余产酶株均为大肠埃希菌。1.3β

8、内酰胺酶的制备[8]取过夜培养菌液2ml转种于200mlMH肉汤中,37℃恒温摇床(SHZ22型,江苏太仓医用仪器厂)振荡孵育24h,4℃,5000g离心(L860M超速离心机,Beckman)30min,收集菌体并用0.05mol/L的PBS(pH7.0)洗涤菌体2次,在冰浴中超声破碎(Virsonic300型超声细胞破碎仪,美国)菌体;在4℃,20000g离心菌液1h,上清液即为粗酶液。用β内酰胺酶特异

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