酶法合成β内酰胺抗生素的研究

《酶法合成β内酰胺抗生素的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、华东理工大学博士学位论文第I页酶法合成0一内酞胺抗生素的研究摘要本论文以氨节西林和头抱克罗为对象，以有效提高p一内酸胺抗生素合成产率的相体系构建为出发点，希望为酶法合成0-内酞胺抗生素寻找有意义的合成途径。本论文主要分为三个部分。第1部分主要研究了青霉素酞化酶的固定化及修饰。以琼脂糖凝胶Sepharose-CL6B为载体进行青霉素酞化酶的固定化修饰，使固定化酶对有机溶剂的稳定性得到大幅度提高。以环氧树脂为固定化载体，系统考察了固定时间、温度、缓冲盐浓度及种类等因素对固定化过程的影响，确定了环氧载体固定青霉素酞化酶的固定化条件。第n部分主要

2、研究了有机共溶相体系中氨节西林的合成过程。通过筛选，确定乙二醇作为氨节西林合成体系中的有机共溶剂，并研究了乙二醇在氨节西林合成过程中的作用，结果表明:乙二醇可在一定程度上调节青霉素酞化酶的催化特性，即调节水解氨节西林、水解苯甘氨酸甲酷水解和合成氨节西林的能力三者之间的关系，使其相对而言更多地表现合成氨节西林的能力。通过对有机共溶相氨节西林合成体系进行优化，使得氨节西林的产率达到65%.第III部分研究了头抱克罗的酶法合成，并将原位分离技术应用到头抱克罗的合成过程。叹根据I-蔡酚可以选择性的和头抱克罗形成低溶解度的复合物这一特性，将该复合反

3、应应用到头抱克罗的合成过程，使酶反应产生的头抱克罗及时得从催化剂周围移去。通过对头抱克罗合成过程和头抱克罗与I-蔡酚之间的复合行为的研究，建立了适合于头抱克罗合成的反应一分离祸合体系，并开发了适应该过程的祸合反应器体系。通过对该反应器操作进行优化，使反应体系中产物浓度保持较低的水平。但是由于藕合体系中底物的水解因产物对其抑制被消除而加速，祸合体系中的反应动力学较单纯的合成过程有较大改变。为了提高反应效率，对藕合体系的合成过程亦进行了考察，在优化的反应条件下，底物7-ACCA的转化率在祸合体系中的批次反应中可达85%左右，而在相同反应条件下

4、无祸合体系中的转化率为65%左右。应用原位分离技术使的半连续化的酶促合成成为可能，在半连续化操作中(55小时)，产率提高到65酬，7-ACCA的转化率可达到70%左右。祸合体系有效的实现了产物的及时移去，有效地解除了产物头抱克罗对酶催化过程的抑制作用了产物的水解，因而，祸合体系中催化过程的效率较单一过程而言有了较大的提高关键词:酶法合成;氨爷西林;头抱克罗;青霉素酞化酶第II页华东理工大学博士学位论文Researchonenzymaticsynthesisof0-lactamantibioticsABSTRACTTheH-lactaman

5、tibioticswithbroadspectumshouldbemodifiedtomeetwiththeneedsoftheclinic.Theindustrialproductionofp-lactamantibioticsisundergoingaremarkabletransformationfromtraditionalchemicalmethodstoenzyme-catalyzedprocesses.Usingampicilinandcefaclorastheaimedproducts,thispaperwillinves

6、tigatetheproductionprocessesofR-lactamantibiotics.Thisworkwasdividedintothreeparts:insectionI，theimmobilizationandmodificationofthepenicillinGacylasewereinvestigated.ThestabilityofpenicillinGacylaseagainstorganicsolventwasincreasedgreatlybyusingSepharose-CL613toimmobilize

7、andmodifythepenicillinGacylase.IntheimmobilizationofpenicillinGacylaseusingepoxyacrylicresinasthecarrier,theefectsoftemperature,buferconcentrationandthebuferkindswerestudied.Theoptimumimmobilizationconditionswereattained.InsectionII，theampicillinsynthesisfromphenylglycine

8、methylester(PGME)and6-aminopenicillanicacid(6-APA)inthebufer-cosolventsystemwasinvestigated.Seve