三叶青的毒理学研究论文

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1、三叶青的毒理学研究论文.freelahems-leyanumDielsetGilg的根［1］，又名金线吊葫芦、石老鼠。在浙江民间素有食用习俗，为评价其安全性。我们按《保健食品检验与评价技术规范》（2003年版）中“食品安全性毒理学评价试验”进行实验［2］，现将结果报告如下。1样品三叶青块根，切片，10倍水浸泡2h，每次1h，收集煎液。浓缩成1g生药/ml浓度.freeles试验3.3.1试验菌株选用组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌，共四株，即TA97a、TA98、TA100、TA102。由上海劳动卫生职业病研究所提供，经生

2、物学鉴定合格后进行试验。3.3.2剂量选择及阳性对照物试验采用平板掺入法。样品以蒸馏水稀释至相应剂量。用TA100菌株的非代谢活化系统进行预试验，结果在剂量为5000μg/皿时未出现明显的增菌和抑菌现象，故正式试验时选择试验浓度为8、40、200、1000、5000μg/皿5个剂量组，外加阴性对照（蒸馏水，DMSO）和阳性对照组（9-氨基吖啶、2，7-二氨基芴、叠氮钠、2-乙酰氨基芴、丝裂霉素C、1，8-二羟基蒽醌），每种菌株每个测试浓度设三皿平行，在加和不加S9条件下进行试验。3.3.3观察指标直接计数培养基上各菌株的

3、回菌落数。3.4小鼠骨髓细胞微核试验3.4.1实验动物实验用ICR小鼠由浙江省实验动物中心提供，体重25～28g。3.4.2剂量和给药方法小鼠随机分5.0、10.0、20.0g/kg体重三个剂量组，一个阴性对照组（灌胃等容量蒸馏水）和一个阳性对照组（丝裂霉素C2.0mg/kg体重），每组10只。样品以灌胃方式给予，连续5天，每天1次，对照组也相同处理。于首次灌胃后第35天脱臼处死，每组随机选5只小鼠分别取两侧附睾，制成吸滤液直接涂片，自然干燥，甲醇固定，用1%伊红染色。3.5观察指标高倍镜下观察精子形态并计数，每只小鼠计

4、数完整精子1000条，计算精子畸形发生率（%）。4实验结果4.1大鼠急性经口毒性试验实验期间，各组大鼠均未见明显症状，也无死亡。三叶青对雌雄大鼠经口LD50均大于100g/kg体重，属实际无毒。4.2小鼠急性经口毒性试验实验期间，各组小鼠均未见明显症状，也无死亡。三叶青对雌雄大鼠经口LD50均大于40.0g/kg体重，属实际无毒。4.3Ames试验各菌株回变菌落数见表1。表1三叶青Ames平扳掺入试验结果（略）从实验结果可见，不同浓度受试物在加和不加S9条件下的回变菌落与阴性对照组相近似，而阳性对照回变菌落数均高于阴性对

5、照回变菌落数2倍以上。说明三叶青Ames试验检测结果为阴性。4.4小鼠骨髓细胞微核试验三叶青对小鼠骨髓细胞微核率的影响见表2。表2三叶青对小鼠骨髓细胞微核率的影响（略）注:*P0.01（与阴性对照组比较）用卡方检验统计，雌雄各剂量组与阴性对照组比较，微核千分率均无显著性差异，而阳性对照组微核率则显著高于阴性对照组，其差异有显著性（P0.01）。说明三叶青对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率未见明显影响。4.5小鼠精子畸形试验三叶青对小鼠精子畸形发生率的影响见表3。表3三叶青对小鼠精子畸形发生率的影响（略）注:*P0.01（与阴性

6、对照组比较）各剂量组与阴性对照组比较，小鼠精子畸形发生率均无显著性差异，而阳性对照组则明显高于阴性对照组，其差异有显著性意义（P0.01）。说明三叶青对小鼠精子畸形发生率未见明显影响。5结论三叶青按《保健食品检验与评价技术规范》（2003年版）中“食品安全性毒理学评价试验:第一阶段大鼠经口急性毒性半数致死LD50），雌雄两性别均大于100g/kg体重:小鼠经口急性毒性半数致死量（LD50），雌雄两性别均大于40.0g/kg体重，按急性毒性分级标准判定，属实际无毒;第二阶段Ames试验结果为阴性，小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠

7、精子畸形试验结果均为阴性，说明三叶青未显示有致突变性。作者单位:1310013浙江杭州，浙江省医学科学院2浙江杭州，武警浙江总队机关门诊部