欢迎来到天天文库
浏览记录
ID:27427004
大小:68.12 KB
页数:5页
时间:2018-12-03
《三叶青的毒理学研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、三叶青的毒理学研究关键字:毒理学三叶青为葡萄科植物三叶崖爬滕Tetrastigmahems-leyanumDielsetGilg的根[1],又名金线吊葫芦、石老鼠在浙江民间素有食用习俗,为评价其安全性。我们按《保健食品检验与评价技术规范》(2017年版)中“食品安全性毒理学评价试验”进行实验[2],现将结果报告如下。1样品三叶青块根,切片,10倍水浸泡2h,每次lh,收集煎液。浓缩成lg生药/ml浓度,由杭州天惠医药科技有限公司提供。按民间食用习惯15g/人/d计算。2实验动物和检测条件实验用ICR小鼠由浙江省实验动物中心提供,清洁级医学实验动物合格证号
2、为2001001,医学实验动物设施合格证号为2001001。实验用SD大鼠由浙江省实验动物中心提供,清洁级:医学实验动物合格证号为2001001,医学实验动物设施合格证号为2001001。实验动物饲料由浙江省实验动物中心提供,执行标准GB14925-2001。检测环境条件:温度范围20°C〜25°C,相对湿度范围60%〜70%。实验动物试验前在动物房环境中适应3天,染毒前禁食过夜,不限制饮水。3实验方法大鼠急性经口毒性试验实验动物选用健康、成熟、体重180〜220gSD大鼠20只,雌雄各半。剂量和给药方法按最大耐受量试验方法将大鼠分为/kg,体重剂量组,
3、每组20只,雌雄各半。大鼠灌胃前停食16h。连续观察14天,并记录动物中毒症状及死亡情况。观察指标染毒后,观察大鼠的一般状况、中毒症状和死亡情况,观察期限2周。小鼠急性经口毒性试验实验动物选用健康、成熟、休重18〜22gICR小鼠20只,雌雄各半。剂量和给药方法按最大耐受量试验方法将小鼠分为/kg体重剂量组,每组20只,雌雄各半。小鼠灌胃前停食16h。连续观察14天,并记录动物中毒症状及死亡情况。观察指标染毒后,观察小鼠的一般状况、中毒症状和死亡情况,观察期限两周。试验试验菌株选用组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏四株,即TA97a、TA98、TA100、TA
4、102。由上海劳动卫生职业病研究所提供,经生物学鉴定合格后进行试验。剂量选择及阳性对照物试验采用平板摻入法。样品以蒸馏水稀释至相应剂量。用TA100菌株的非代谢活化系统进行预试验,结果在剂量为5000yg/皿时未出现明显的增菌和抑菌现象,故正式试验时选择试验浓度为8、40、200、10⑻、5000yg/皿5个剂量组,外加阴性对照(蒸馏水,DMS0)和阳性对照组(9-氨基吖啶、2,7-二氨基芴、叠氮钠、2-乙酰氨基芴、丝裂霉素C、1,8-二羟基蒽醌),每种菌株每个测试浓度设三皿平行,在加和不加S9条件下进行试验。观察指标直接计数培养基上各菌株的回菌落数。小
5、鼠骨髓细胞微核试验实验动物实验用ICR小鼠由浙江省实验动物中心提供,体重25〜28g。剂量和给药方法小鼠随机分、、/kg体重三个剂量组,一个阴性对照组(灌胃等容量蒸馏水)和一个阳性对照组(丝裂霉素/kg体重),每组10只。样品以灌胃方式给予,连续5天,每天1次,对照组也相同处理。于首次灌胃后第35天脱臼处死,每组随机选5只小鼠分别取两侧附睾,制成吸滤液直接涂片,自然干燥,甲醇固定,用1%伊红染观察指标高倍镜下观察精子形态并计数,每只小鼠计数完整精子woo条,计算精子畸形发生率(%)。4实验结果大鼠急性经口毒性试验实验期间,各组大鼠均未见明显症状,也无死亡
6、。三叶青对雌雄大鼠经口LD50均大于lOOg/kg体重,属实际无毒。小鼠急性经口毒性试验实验期间,各组小鼠均未见明显症状,也无死亡。三叶青对雌雄大鼠经口LD50均大于/kg体重,属实际无毒。试验各菌株回变菌落数见表1。表1三叶青Ames平扳掺入试验结果(略)从实验结果可见,不同浓度受试物在加和不加S9条件下的回变菌落与阴性对照组相近似,而阳性对照回变菌落数均高于阴性对照回变菌落数2倍以上。说明三叶青Ames试验检测结果为阴性。小鼠骨髓细胞微核试验三叶青对小鼠骨髓细胞微核率的影响见表2。表2三叶青对小鼠骨髓细胞微核率的影响(照组比较)用卡方检验统计,雌雄各
7、剂量组与阴性对照组比较,微核千分率均无显著性差异,而阳性对照组微核率则显著高于阴性对照组,其差异有显著性(P髓嗜多染红细胞微核率未见明显影响。小鼠精子畸形试验三叶青对小鼠精子畸形发生率的影响见表3。表3三叶青对小鼠精子畸形发生率的影响(略)注:仲剂量组与阴性对照组比较,小鼠精子畸形发生率均无显著性差异,而阳性对照组则明显高于阴性对照组,其差说明三叶青对小鼠精子畸形发生率未见明显影响。5结论三叶青按《保健食品检验与评价技术规范》(2017年版)中“食品安全性毒理学评价试验:第一阶段大鼠经口急性毒性半数致死LD50),雌雄两性别均大于100g/kg体重:小鼠
8、经口急性毒性半数致死量(LD50),雌雄两性别均大于/kg体重,按急性毒性分级标
此文档下载收益归作者所有