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时间:2018-11-21
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1、超声提取六味地黄丸复方的工艺研究论文徐飞,尹蓉莉,钟玲,杜素娟,马家骅【关键词】超声技术;,,正交实验;,,丹皮酚;,,总多糖;,,苯酚摘要:目的探讨超声技术对六味地黄丸复方提取效果的影响,并筛选出最佳提取工艺,确定超声提取中药复方的适应范围。方法以干膏收率、丹皮酚、总多糖为指标,对六味地黄丸复方进行超声提取正交实验.freelin/次,超声频率为25kHz。结论所筛选出的最佳提取工艺合理、可行;超声提取技术能适用于含有多糖类成分的中药复方药材,具有省时、省工、提取率高等特点。关键词:超声技术;正交实验;丹皮酚;总多糖;苯酚硫酸法
2、StudyonExtractTechnologyofpoundLiuethodontheprocessofextractionfrompoundLiuumexractingconditionandtodeterminethelimitsofsupersonicmethod.MethodsumextractionconditionisA2B2C2D1E3F2,addingtentimesamountof60%ethanol(originaltemperature60℃)andsupersonicextracting(thefrequ
3、ency25kHz)for30min(totallyextractingfor2times).ConclusionTheresultfromsupersonicextractionissostableandreliablethatorthogonaldesigncanbeadequateforpolysaccharidepositionsoftraditionalChinesemedicineandithascharacteristicsofsavingontimeandoperator,higherextractionrates
4、andsoon.Keyethod超声技术提取中药具有提取效率高、省工、省时、节能等优点[1~6],但仅局限于单味中药的提取,而中医用药多以复方制剂为主,药物发挥的是多成分、多靶点的综合治疗作用,使超声技术受到了限制,中药复方采用超声提取技术目前还是个空白。本研究拟用中药复方六味地黄丸为模型药物进行比较研究,以确定超声提取中药复方的适应范围,并优选出最佳工艺条件。六味地黄丸为滋阴补肾的经典代表方剂,自创方以来经历代医家临床应用疗效显著,广泛运用于治疗肝肾阴虚、腰膝酸软、盗汗遗精等疾病[7];现代药理研究表明,该方具有抗衰老、抗肿瘤及
5、治疗老年痴呆的显著效果,对免疫功能也具有显著的调节作用[8]。丹皮酚具有免疫调节作用[9],为六味地黄丸复方各种制剂控制其质量的指标成分之一,而总多糖是六味地黄丸复方治疗肝肾阴虚及老年痴呆、抗衰老、抗肿瘤的主要有效物质之一,故以干膏收率、丹皮酚、总多糖含量(权重系数2∶4∶4)为提取工艺的评价指标。1仪器与试药PerkinElmerLambda35uv/vis型分光光度计;SartoriusBP211D型电子天平(德国赛多利斯公司);熟地黄、山茱萸、牡丹皮、山药、茯苓、泽泻药材(均购于成都市荷花池中药材市场);苯酚试剂:取苯酚(C
6、P)200g,加铝片0.2g和碳酸氢钠0.1g,蒸馏收集182℃馏分,新蒸苯酚配成5%(m/v)的水溶液,摇匀备用;其余试剂均为分析纯。2方法与结果2.1含量测定方法2.1.1丹皮酚含量测定方法[10]供试品溶液的制备:精密称取样品适量,用水蒸气蒸馏,收集馏出液约450ml,置500ml量瓶中,加水稀释至刻度,备用。含量测定方法:以蒸馏水为空白对照,照紫外可见分光光度法,在274nm波长处测定吸光度,按丹皮酚(C9H10O3)的吸收系数E1cm1%为862计算,即得。2.1.2总多糖含量测定方法(苯酚硫酸法)[11]对照品溶液的制
7、备:精密称取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖对照品30mg置烧杯中,加适量蒸馏水溶解,然后定量转移至100ml量瓶中,加蒸馏水定容至刻度,摇匀,备用。供试品溶液的制备:精密称取样品提取液适量,将其调至含醇量80%,静置3h,滤过,残渣200ml蒸馏水溶解,滤过,滤液用蒸馏水定容至250ml量瓶中,摇匀备用。标准曲线的制备:精密吸取葡萄糖对照品储备液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0ml至50ml量瓶中,加蒸馏水至刻度。分别精密吸取上述溶液2.0ml置于10ml具塞试管中,分别加入5%苯酚1.0ml,迅速滴加浓硫酸5.0m
8、l,振摇,至沸水浴中20min后,转入冷水中冷却30min,取出,即得;另以2.0ml蒸馏水同上操作,作为空白对照;于490nm处测定吸光度。以对照品浓度(μg/ml)为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,其回归方程为:A=0.2914C+0.0
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