中药对耐甲氧西林葡萄球菌的体外敏感性研究论文

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1、中药对耐甲氧西林葡萄球菌的体外敏感性研究论文栾耀芳，吴国英，孔祥山，王军【摘要】目的对多重耐药的耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）进行中药体外敏感试验，观察其诸多改变对中药治疗作用的影响，筛选有效中药。方法采用琼脂扩散法，以临床收集的MRS30株为实验组，非耐甲氧西林的葡萄球菌30株为对照组进行体外敏感性研究.freelcandachinensis（L.）DC.的干燥根茎，切片。蒲公英：菊科植物蒲公英TaraxacummongolicumHand.-Mazz.、碱地蒲公英T.sinicumKitag.或同属数种植物的干燥全草，切段

2、。半枝莲：唇形科植物半枝莲ScutellariabarbataD.Don的干燥全草，切段。白头翁：毛茛科植物白头翁Pulsatillachinensis（Bge.）Regel的干燥根，切薄片。以上药物均购自我院中药房。1.2实验菌株来自本院门诊及病房临床标本中分离的葡萄球菌。选择经鉴定为耐甲氧西林的葡萄球菌（MRS）菌株30株为实验组，其中MRSA8株，MRS22株;非MRS菌株30株为对照组，其中金黄色葡萄球菌17株，其他凝固酶阴性葡萄球菌13株。（仪器：英国先德SENSITITRE全自动微生物鉴定仪，鉴定符合率95%以上

3、。MRS鉴定采用2004年NCCLS出版的药敏试验指南M100－S14手册推荐的30μg头孢西丁纸片法。）２实验方法2.1中药制备2.1.1中药水提液取中药鱼腥草、射干、蒲公英、半枝莲、白头翁各500g，分别置提取容器中，加水适量，浸泡20min，继续加水6～8倍（根据药物容积不同，加水量不同），加热煎煮提取2次（2h,2h），过滤去渣，合并2次提取液，慢火浓缩至500ml左右（1g/ml），灌封，备用［1］。2.1.2中药醇提液取中药鱼腥草、射干、半枝莲、白头翁各500g，分别置提取容器中，加65%乙醇适量，浸泡20min

4、，继续加提取溶剂6～8倍量，加热煎煮提取2次（2h,2h），过滤去渣，合并2次滤液，回收乙醇。慢火浓缩至500ml左右（1g/ml），灌封，备用［1］。2.2菌液制备挑取培养18～24h的纯菌落，制成0.5麦氏单位，浓度相当于（1～1.5）×108CFU/ml的菌悬液，备用。2.3操作以无菌棉棒蘸取菌悬液，均匀涂抹于M-H琼脂平板，稍倾，在平板上打5～6个直径6mm左右的孔，深度约为4～5mm，加入浓度为1g/ml的中药液60μl，置平板于35℃～37℃孵箱培养，24h后量取抑菌环直径，以无菌生长的透明环的直径为最终结果。3

5、结果经24h培养观察，所有中药对实验组及对照组细菌表现出不同的抑制效果，结果见表1、表2、表3，图1。表１不同中药对两组细菌的抑制效果比较表2中药的不同提纯方法对实验组细菌抑制效果比较表3中药的不同提纯方法对对照组细菌抑制效果比较从表１中可以看出，所试中药对实验组及对照组细菌在抑菌效果上经统计学分析，均P0.05，差异无显著性，因此，无论是显示多重耐药的葡萄球菌还是普通的葡萄球菌，中药的抑菌效果是基本相同的，说明这些多重耐药的特殊菌的诸多改变尚未影响中药的治疗作用，这样在用药环境上比较西药显示出了很大的优势，无需实验室进一步

6、分类即可用药，可做到及时、高效。另外，根据抑菌环直径大小，所试中药体外抑菌效果从强到弱依次为：半枝莲水提液、半枝莲醇提液、射干醇提液、蒲公英醇提液、鱼腥草醇提液、蒲公英水提液、白头翁水提液、鱼腥草水提液、白头翁醇提液、射干水提液。从表２、表３中可以看出，鱼腥草醇提液、射干醇提液、蒲公英醇提液抑菌效果均明显优于相应的水提液，经统计学分析，P0.01，两者对比差异有非常显著性。对照组半枝莲水提液效果优于醇提液，经统计学分析，P0.05，两者对比差异有显著性。而白头翁其醇提液、水提液在抑菌效果上经统计学分析，P0.05，两者对比差

7、异无显著性。4讨论MRSA自1961年被发现后，到20世纪80年代后期就已成为全球发生率最高的医院内感染病原菌之一。全世界范围内，目前能够被证实对MRSA有效的只有万古霉素。因此，MRSA被列为世界三大最难解决感染性疾患的第一位，甚至有专家将之称为“超级病菌”。2007年10月17日美国弗吉尼亚贝德福德一名17岁高中生就因感染MRSA而死亡。我国20世纪70年代上海报道MRSA约占金黄色葡萄球菌的5%，1985～1988年上海及北京等地区为10%～24%，1994～1996年上升到50%～77.9%［2］，2001年我国的全

8、国调查报道波动在40%～90%［3］，比利时报道波动在1.6%～62.4%，表明世界各地都有不同程度的增长，甚至各医院病房之间亦可有明显差异［4］。30%～60%MRSA定植的病人以后会并发感染，一旦某部门发生MRSA流行，则院内MRSA感染发生率增加，病死率高，会给患者造成极大痛苦。但抗