bmp-bfgf生物活性材料修复关节软骨损伤的实验研究

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1、BMP/bFGF生物活性材料修复关节软骨损伤的实验研究.L.编辑。作者：林佳声，赵承斌，李华哲【摘要】［目的］探讨骨形态发生蛋白(bonemorphogeicprotEin,BMP)、碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrom全层关节软骨缺损模型。钻通骨髓腔。A组应用BMP/bFGF生物活性材料，B组应用BMP生物活性材料，C组应用bFGF生物活性材料，D组单纯应用生物蛋白胶材料。于8、12、24周在大体，光镜及电镜下观察损伤修复效果，组织学评分。［结果］A组于8、12周时，软骨缺损被白色半透明坚硬组织平滑修复，富有光泽，24周时修复组织正常软骨边界模糊，连接紧密，

2、质地坚硬，表面平滑光润。B、C组于8、12、24周时候均未见软骨缺损完全修复，边界清楚，中央凹陷明显残留。D组全程均未见软骨修复。组织学平分A组明显优于B、C、D组，而B、C组之间无差别。［结论］BMP/bFGF生物活性材料可以有效修复兔大面积关节软骨损伤，疗效明显优于单独应用骨形态发生蛋白或碱性成纤维细胞生长因子，为关节软骨损伤治疗提供新的治疗方法。【关键词】骨形态发生蛋白；碱性成纤维细胞生长因子；软骨缺损；生物蛋白Abstract：［Objective］TostudytherepairofarticularcartilagedefectsorphogeicprotEIn(BMP)/

3、basicfibroblastgroaterialinordertosupplyexperimentalbasisforrepairingcartilagedefectsbiologically.［Method］Tlydividedintofourgroups,BMP/bFGFbiomaterialgel(groupA),BMPbiomaterialgel(groupB),bFGFbiomaterialgel(groupC)andsimplefibringluetreatedgroup(groupD).Acoupleofkneesofeachrabbitexperienced5mmd

4、iameterfullcartilageresectionanddrillingthrouthofbonemarroicroscopeinedat8,12,24oothlyrepairedbyalcartilageat24oothrepairingaterialisgoodforrepairofarticularcartilagedefectsandhasbetterresultthanusingBMPorbFGFalone.Theseresultsmayprovideatherapyforarticularcartilagedefects.Keyorphogeicprotein;f

5、ibroblastgrog/ml纤维蛋白原(50000u/ml和500mg/ml)1ml，准备凝血酶原溶液(500u/ml)1ml。改进共推注射器，控制其微量出液。纤维蛋白原和凝血酶原组通过“Y”形针头混合后立即成为固体状态。　　30mg骨形态发生蛋白溶于2mL4mol/L盐酸胍、10.05mol/L氯化钙溶液中,兑水透析24h，备用。如果需要保存，将稀释液在-20°C条件下贮存。　　先用0.1%胎牛血清蛋白1ml溶解0.1mg碱性成纤维细胞生长因子（防止碱性成纤维细胞生长因子粘附于安瓶内），将稀释液溶解于1mlTris液备用。如果需要保存，将稀释液在-20°C条件下贮存。1.3模型制

6、备1.3.1动物分组A组6只，利用BMP/bFGF生物活性材料治疗（n=12）；B组6只，BMP生物活性材料治疗；C组6只，bFGF生物活性材料治疗（n=12）；D组6只,生物活性材料治疗（n=12）。1.3.2动物建摸全麻（2%戊巴比妥钠1.2mL/kg耳缘静脉麻醉）,双膝关节常规备皮、消毒，铺巾。取膝关节内侧小切口，向上向下少许锐性分离，屈曲膝关节将髌骨脱位于外侧，暴露股骨滑车关节面，制造直径5mm、深3mm的圆形全层软骨缺损。同时钻通骨髓腔。充分止血，利用共推针头注入各组活性材料，填满缺损。细致休整表面。冲洗，逐层缝合。对侧操作同上。术后置于标准动物实验笼中，每日活动，加强锻炼。

7、术后8、12、24周每组空气处死2只动物，观察大体、光镜、电镜指标。1.4观察指标1.4.1一般观察术后步态，膝关节活动范围，切口情况，动物大体状态和进食情况。1.4.2关节修复的大体观察表面平整与否，色泽，质地，与临近软骨结合情况。1.4.3光镜观察　10℅甲醛固定，0.1mol/LEDTA脱钙，梯度逐级脱水，缺损区纵形剖开石蜡包埋，4μm超薄切片。HE、PAS染色，观察组织形态和蛋白多糖沉积情况。1.4.4扫描电镜观察　　标本取材后纵行剖开