大孔吸附树脂同步提取湖北麦冬总多糖和总皂苷论文

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1、大孔吸附树脂同步提取湖北麦冬总多糖和总皂苷论文.freell，精密吸取0.2ml分别置于干燥具塞试管中，补加蒸馏水至1.0ml，摇匀，得供试液。2.1.2线性关系考察精密称取105℃干燥至恒重的D-无水葡萄糖对照品10.40mg，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取0.2，0.4，0.6，0.8，1.0，1.2ml，分别置干燥具塞试管中，补加蒸馏水至1.0ml，再各加苯酚试液1.0ml，摇匀，滴加浓硫酸5.0ml，迅速摇匀，放置5min，置沸水浴中加热15min，取出，冷水冷却至室温

2、。另取蒸馏水1.0ml，加苯酚试液同法操作，作为空白对照。按分光光度法在486nm波长处测定吸光度，以浓度为横坐标（X）、吸光度为纵坐标（Y），绘制标准曲线，求得回归方程：Y=9.1051X+0.0934，r=0.9991。2.1.3总多糖的含量测定供试品溶液按“2.1.2”项下自“加苯酚试液1.0ml”起，同法操作，测定吸光度。2.2总皂苷的含量测定方法2.2.1供试品溶液的制备取总皂苷0.1g，精密称定，置100ml量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释

3、至刻度，摇匀，即得。2.2.2对照品溶液的制备精密称取麦冬皂苷D对照品10.42mg，置50ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。2.2.3测定波长的选择精密称取葡萄糖10.31mg，按对照品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。分别吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各2ml，置具塞试管中，挥去甲醇，加入高氯酸10ml，混匀，65℃水浴加热15min，冰水浴冷却，终止反应后按分光光度法测定吸光度，对照品溶液、供试品溶液在317nm处有最大吸收峰，阴性对照溶液无干扰。结果见图1。因此选317n

4、m为麦冬总皂苷的测定波长。1.对照品2.供试品3.葡萄糖图1湖北麦冬总皂苷含量测定波长选择图（略）2.2.4线性关系考察精密吸取麦冬皂苷D对照品溶液0.4，0.6，0.8，1.0，1.5，2.0ml，分别置干燥具塞试管中，挥去甲醇，加入高氯酸10ml，混匀，65℃水浴加热15min，冰水浴冷却，终止反应后按分光光度法测定吸光度，以浓度为横坐标（X）、吸光度为纵坐标（Y），绘制标准曲线，求得回归方程：Y=6.9914X+0.0352，r=0.9999。2.2.5总皂苷的含量测定精密吸取供试品溶液1ml，

5、按“2.2.3”项下自“置具塞试管中，挥去甲醇，加入高氯酸10ml”起，同法操作，测定吸光度。2.3大孔吸附树脂的前处理取D-101大孔吸附树脂，用乙醇浸泡过夜，使充分溶胀，湿法装柱。然后用乙醇冲洗，至洗脱液在试管中加水稀释不浑浊，且洗脱液在200～400nm扫描无吸收峰为止。再用水洗去乙醇。2.4湖北麦冬药材的提取湖北麦冬药材2kg加10倍水提取3次，1h/次，滤过，合并。滤液冷却至室温，备用。2.5总皂苷及总多糖的提取及纯化将“2.4”项下提取液通过处理后的大孔吸附树脂柱，用蒸馏水洗脱，至Moll

6、ish反应呈现阴性，然后用70%乙醇洗脱，收集洗脱液，至Liberman反应呈阴性。过柱液及水洗脱液合并，浓缩至相对密度为1.25，加乙醇至含醇量为80%，静置24h，沉淀物减压干燥，得总多糖349g（含量为66.52%）。70%乙醇洗脱液合并，回收乙醇，浓缩至相对密度为1.25的浸膏，减压干燥，得总皂苷15g（含量为81.15%）。3讨论湖北麦冬是湖北的独特品种和道地药材，所含的多糖及皂苷类都是其有效成分。但文献报道中，湖北麦冬的提取仅限于多糖［3，6，7］或仅限于皂苷类［8］成分，常造成了另一大类

7、有效成分的浪费，不利于湖北麦冬的综合利用。对于麦冬的提取，这种情况也经常发生［9～12］。本文运用大孔吸附树脂法同步提取湖北麦冬中的总皂苷和总多糖，有利于湖北麦冬中总多糖和总皂苷的综合利用，同时，也为麦冬的综合利用提供参考。文献报道的湖北麦冬总多糖的提取及纯化过程都比较复杂。如有人将湖北麦冬用石油醚脱脂后，依次用乙醇、水提取，水提取液合并，浓缩，浓缩液依次用Savage法脱蛋白质，活性炭脱色，然后乙醇沉淀，沉淀物依次用95%乙醇、无水乙醇、乙醚、丙酮洗涤，烘干，得粗多糖（得率为7%）［3］。有的运用0

8、.9%氯化钠溶液提取湖北麦冬，用氯仿-正丁醇除蛋白质，透析除小分子杂质，浓缩，浓缩液用乙醇沉淀，沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，干燥，得总多糖［7］。以上两种方法提取，精制的步骤多，操作比较复杂，因此有效成分损失较多，产品得率偏低。还有将湖北麦冬依次用乙醇、水提取，水提取液合并，微滤后，采用螺旋卷式超滤系统超滤，浓缩，干燥，得到不同分子量分布范围的多糖［6］。但超滤法仅仅是根据分子量大小对中药提取液中的成分进行分级，在中药生产中的应用仍很少。主要是