中草药叶下花总黄酮提取方法

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1、中草药叶下花总黄酮提取方法作者：杨发忠，杨斌，杨德强，陈厚琴，代红娟，张丽，李东海【摘要】　　目的对叶下花总黄酮的种类与提取方法进行初步研究。方法采用定性检测、光谱分析、单因素测定、正交实验等，研究黄酮种类，考察乙醇体积分数、温度、固液比、时间对提取率的影响。结果叶下花含黄酮、黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇等多种黄酮类化合物；所考察的影响因素中，对总黄酮提取率影响程度大小顺序为乙醇体积分数＞温度＞时间＞固液比。结论最佳提取条件为A1B2C3D3(乙醇体积分数30%、温度65℃，提取时间180min，固液比1∶80)，在此提取条件下，提取量高达5.233%。【关键词】叶下

2、花　总黄酮　提取方法　正交实验　　Abstract：ObjectiveTooptimizetheextractionconditionsforthetotalflavonoidsfromAinsliaeapertyoidesFranchandtostudythecategoriesofthetotalflavonoids.MethodsThemethodsofthechemicalqualitativedetection,thespectralanalysis,singlefactordetermination,orthogonaltestefractionofeth

3、anol,thetemperature,theratioofsolidtoliquid,theextractingtime,ontherateofthetotalflavonoids,etime.Results1)Thetotalflavonoidsconsistedofflavones,flavonols,flavanones,flavanonolsinA.pertyoides.2)Theorderoffactorstoaffecttheflavonoidextractionefractionofethanol>temperature>extractin

4、gtime>ratioofsolidtoliquid.ConclusionTheoptimumextractionconditionsareA1B2C3D3.Thehighestextractionrateofthetotalflavonoidsreached5.233%undertheoptimalconditions.　　Keyethods;Orthogonaltest　　叶下花AinsliaeapertyoidesFranch.var.albo-tomentosaBeauverd也称白背兔耳风、白背叶下花、追风箭等，菊科(positae)帚菊木族(Muti

5、sieaeCass)兔耳风属(AinsliaeaDC)草本植物［1］，是《本草纲目》等多部药典收录的天然药用植物［1］。叶下花作为骨科良药分布广泛、资源丰富、临床应用和民间用药历史十分悠久，并能用于治疗强直性脊柱炎，填补了中药治疗在此领域的空白［2］，意义重大。本研究小组发现［3］，叶下花中黄酮类化合物具有明显的抗氧化活性和羟基自由基清除能力，但不清楚叶下花作为骨科良药的活性成分是否与此有关。已有很多　　3.3单因素测定结果　　3.3.1乙醇体积分数对叶下花总黄酮得率的影响　　结果如图2。随乙醇体积分数增加，叶下花总黄酮得率逐渐增加，当乙醇体积分数增加至30%时，得率

6、达最高，但继续增加乙醇体积分数，得率反而下降，所以确定提取黄酮所需乙醇的最佳体积分数为30%。　　3.3.2温度对总黄酮得率的影响　　结果如图3。在65℃左右得率达到最大值，温度过高则黄酮含量反而有所降低，可能与高温下部分黄酮发生分解有关，所以确定65℃为叶下花黄酮的最佳提取温度。　　3.3.3固液比对总黄酮得率的影响　　结果如图4。当固液比为1∶60时，总黄酮得率最高，再增加溶剂用量，变化不大。　　3.3.4时间对总黄酮得率的影响　　结果如图5。可以看出，120min左右可将叶下花中的大部分黄酮提取出来。　　3.4正交实验结果与分析如表3所示。从表中K1，K2，K3

7、，R分析得到，乙醇体积分数、温度、固液比、提取时间4因素对黄酮提取量影响的主次顺序及最佳提取条件为：A1B2C3D3，即乙醇体积分数30%，温度65℃，提取时间180min，固液比1∶80。　　3.5正交实验结果验证由于从正交实验中得出的最佳提取条件在所做的实验中并未出现，需要进行验证。按最佳提取条件并采用与“2.3.1”项相似的方法进行提取，重复4次，结果叶下花总黄酮提取量为5.233%(RSD为1.4%)，在本实验中提取量达到最大。同时可见，叶下花总黄酮含量很高，具有明显研究价值。表3正交实验结果（０　　4结论利用现代中医药理论研究中草药叶下花的