vpa解除met对大鼠皮质神经元gad表达的抑制论文

《vpa解除met对大鼠皮质神经元gad表达的抑制论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、VPA解除Met对大鼠皮质神经元GAD表达的抑制论文.freelM的Met培养3天后换以无血清培养液）、VPA组（无血清培养液含终浓度为2mM的Met培养3天后换以终浓度为0.5mM的VPA无血清培养液）的GAD活性。结果Met组GAD平均酶活力明显低于空白组，差异有统计学意义，而VPA组的GAD平均酶活力接近于空白组，差异无统计学意义。结论蛋氨酸抑制大鼠皮质神经元表达GAD.freelethionineinmouseprimarycorticalcultures【Abstract】ObjectiveTostudyv

2、alproateandmethionine(Met)regulateglutamicaciddecarboxylase(GAD)expressioninmouseprimarycorticalculturesnouron，investigatethemechanismoftheVPA’sfunctioninthetreatmentofschizophrenia.MethodsAdoptingprimarycorticalculturestechniqueculturesneuron，collectecells，lys

3、iscells，usecolorimetricmethodtomeasureGADactivities；analyseGADactivitiesofthevacancygroup（serum-freeDMEM），theMetgroup（culturesMinserum-freeDMEMfor3days，afterthatchangeit-freeDMEM），andtheVPAgroup（culturesMinDMEMafterthatincubatedMinserum-freeDMEMfor3days）.Result

4、sIntheMetgrouptheaverageactivitiesofGADisobviouslyloeaning.IntheVPAgrouptheaverageactivitiesofGADisapproachtovacancygroup，thedifferencehasn’tstatisticalmeaning.ConclusionThemethionineinhibitsthecorticalneuronexpressGAD，decreasesGABAsynthesize.TheVPApromotesthec

5、orticalneuronexpressionGAD，andreneouseprimarycorticalcultures.【Keyethionine；glutamicaciddecarboxylase（GAD）；schizophrenia增加蛋氨酸（Methionine，Met）的摄入量，会造成近百分之七十的精神分裂症（schizophrenia，SZ）患者症状恶化［1］。有学者认为的大量摄入Met引起大鼠体内活性甲基供给体S-腺苷同型半胱氨酸（SAM）增加，SAM使谷氨酸脱羧酶(glutamicaciddecar

6、boxylase.GAD)等基因启动区甲基化修饰，引起GAD等基因表达降低［2］。在美国医生普遍使用丙戊酸(valproicacid，VPA）辅助治疗SZ。2001年Christopher［3］发现VPA能抑制组蛋白去乙酰基酶（HistoneDeacetylase，HDACs)的活性，从而诱导基因表达。笔者通过原代培养技术培养大鼠皮质神经元，并在培养液中先后加入Met、VPA，然后用Berthelot［4］反应测定不同组别的皮质神经元裂解液的GAD相对酶活性。如果Met能抑制GAD基因表达，将使皮质神经元中GAD的相

7、对酶活性降低，而如果VPA能诱导GAD基因表达，将使GAD恢复到正常水平。1材料与方法1.1试剂多聚左旋赖氨酸，N2添加剂(100×的成分:牛胰岛素500μg/ml，人转铁蛋白10000μg/ml，黄体酮0.63μg/ml，硒0.52μg/ml，腐胺1611μg/ml，Gibco)，基础培养液（DMEM、碳酸氢钠、青霉素、链霉素），胎牛血清，兔抗GABA血清(1∶600)，羊抗兔IgG(1∶40)，免疫组织化学试剂盒，Met、Gly标准品，苯甲基磺酰氟(PMSF)，非变性条件下裂解细胞的裂解液（pH7.0的20mMT

8、ris，150mMNaCl，1%TritonX-100，焦酸钠，β-甘油磷酸，EDTA，Na3VO4，等），GABA(纯度99.9%)，5′-磷酸吡哆醛(PLP)，L-谷氨酸钠(L-MSG)，次氯酸钠，Folin－酚试剂，牛血清白蛋白，巯基乙醇，重蒸酚，无水乙醇等。1.2动物孕期16～18天清洁级SD大鼠，由郑州大学动物中心提供。1.3方法1.