心脏性猝死病人心肌组织cx43和cx40的表达论文

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1、心脏性猝死病人心肌组织CX43和CX40的表达论文卢静张七一纪萍孔庆暖孙坤伟于建宪【摘要】目的观察心脏性猝死病人左、右心室肌及室间隔肌缝隙连接蛋白43(CX43)及缝隙连接蛋白40(CX40)的表达，探讨CX43、CX40表达与心脏性猝死的关系。方法应用免疫组化及SimplePCI图像分析系统，分析比较心脏性猝死与非心脏性猝死病人心室肌及室间隔肌CX43、CX40的表达，并用SPSS13.0统计软件对数据进行统计分析。结果非心脏性猝死病人CX43、CX40主要表达于心肌细胞闰盘处，少数表达于细胞侧面连接及胞浆中。心脏性猝死病人CX43、CX4

2、0多数弥散于胞浆及细胞侧面连接处，表达于闰盘的数量减少。心脏性猝死病人CX43在左心室、室间隔及右心室的表达明显低于对照组(t=2.09～8.01，P均0.05);心脏性猝死病人CX40在左心室、室间隔及右心室的表达也明显低于对照组(t=3.24～9.40，P均0.05)。结论CX43、CX40表达部位的改变与表达数量的减少.freelinpatientsmunohistochemistryandSimplePCIimageanalysissystemainlydistributedinintercalateddisk,andafe.Andt

3、hoseinSCDgroup,theexpressionsostlydispersedinthelateraljunctionandcytoplasm,andafeobservedinintercalateddisk.pared(t=2.09-8.01,P0.05),andtheyhadalsoastatisticallylo(t=3.24-9.40,P0.05).ConclusionThechangesofthedistributionandquantityofCX43andCX40intheheartmayberelatedtothesu

4、ddencardicdeathtosomeextent.KEYaxVision试剂盒(福建迈新生物技术开发有限公司)。1.3实验方法将所有切片按常规方法脱蜡至水后进行微波修复(80℃修复170s后，保温10min)，自然冷却后以体积分数0.033的H2O2常温下封闭20min，PBS冲洗3次，每次5min后，一份加入CX40浓缩液，按1∶50浓度稀释;另一份加CX43工作液，4℃冰箱过夜孵育，PBS冲洗3次，每次5min后，再按照即用型快捷免疫组化MaxVision试剂盒指定方法加二抗常温孵育15min，PBS冲洗3次，每次5min后，按浓缩

5、型DAB试剂盒指定的方法进行显色。用PBS代替一抗作为阴性对照，用苏木精复染核。1.4结果判断心肌闰盘、胞浆、细胞侧面连接处出现棕黄色颗粒为CX43、CX40阳性表达。1.5图像分析与统计学处理选取CX43、CX40表达均匀的切片，每张切片随机选取3个视野，采用SimplePCI图像分析系统对各切片阳性表达的棕黄色颗粒进行图像分析，用阳性染色的平均灰度值反映蛋白染色强度，用阳性染色平均面积值代表蛋白表达密度，测量数据由SimplePCI图像分析系统自动获取。用SPSS13.0及PPMS1.55统计软件对数据进行统计分析，以P0.05为差异有显

6、著性。2结果2.1CX43免疫组织化学染色对照组CX43阳性表达主要呈棕黄色，条状表达于心肌闰盘处，少部分棕黄色颗粒散在表达于胞浆、细胞侧面连接处。实验组CX43阳性表达大部分呈棕黄色颗粒，弥散于胞浆;有少部分的棕黄色颗粒表达于心肌闰盘及细胞侧面连接处，并且CX43阳性颗粒的数量减少，而且颜色变浅。SCD病人左心室、室间隔及右心室CX43的表达均明显低于对照组(t=2.09～8.01，P均0.05)。见表1。2.2CX40的免疫组织化学染色对照组CX40主要表达于心肌闰盘处，细胞胞浆和细胞侧面连接处较少;而在实验组大部分弥散于胞浆，少部分表达

7、于细胞侧面连接、心肌闰盘处。实验组与对照组相比较CX40的阳性颗粒数量减少，颜色变浅。SCD病人左心室、室间隔及右心室CX40的表达也明显低于对照组(t=3.24～9.40，P均0.05)。见表2。表1两组心肌各部位CX43表达的图像分析结果表2两组心肌各部位CX40表达的图像分析结果3讨论3.1CX与SCDCX是存在于动物体内多种细胞间的细胞连接通道，它是相邻细胞膜上的跨膜通道，由六聚体蛋白构成。在人类心脏的不同部位，缝隙连接蛋白的表达有差异，心室肌主要以CX43、CX40表达为主4。引起SCD最常见的心律失常为室性心律失常。室性心律失常的

8、发生机制包括折返自律性增高及触发活动等。已有研究显示，心肌细胞间的缝隙连接决定心肌电激动阻滞与否6。心肌细胞膜通道的主动电活动不能使单个心肌细胞的兴奋传递到相邻的心