白芷香豆素的镇痛作用部位及其机制论文

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1、白芷香豆素的镇痛作用部位及其机制论文王海莉王春梅李贺崔新颖【摘要】目的观察白芷香豆素(CoumarinofAngelicaeDahuricae，CAD)的镇痛作用部位及其机制。方法利用小鼠福尔马林实验及侧脑室注射CAD对小鼠热板痛反应潜伏期的影响以分析CAD的镇痛作用部位;观察CAD对甲醛所致伤害性疼痛模型小鼠血清一氧化氮(NO)和脑组织中β内啡肽(βEP)含量的影响。结果CAD(30，60，120mg/kg)不同程度地抑制了小鼠福尔马林实验第一和第二时相反应。侧脑室注射CAD(6mg/kg)明显延长小鼠热板痛

2、反应潜伏期。CAD(30，60，120mg/kg)连续给药4d，使甲醛所致伤害性疼痛模型小鼠血清NO含量和脑中βEP含量明显下降。结论CAD对物理、化学等伤害性刺激具有明显镇痛作用，作用部位可能既在中枢也在外周.freelechanismsunderlyingofCoumarinsofAngdicaeDahuricae(CAD).MethodsTheantinociceptivesiteofCADiceformalintestandmicehotplatetestafterintracerebroventric

3、ular(icv)administration;theconcentrationofnitricoxide(NO)inserumandβEPinbrainofmiceeasuredethodandradioimmunoassay(RIA)respectively.ResultsCAD(30，60，120mg/kg)reducedthefirstandsecondphaseresponsesofmiceformalintestparedeicvadministrationofCAD(6mg/kg)formice

4、，hotplatelatencyandβEPinbrainofmiceinducedbyformalinayberelatedtocentralandperipheralmechanisms.【Keya公司产品;NO试剂盒，由南京建成生物工程研究所提供，批号：20061221;β内啡肽放射免疫测定盒，由北京海科锐生物技术中心提供，批号：070115。1.2福尔马林致痛法〔5〕小鼠60只，雌雄各半，随机分为6组，分别为对照组、吗啡组、阿司匹林组、CAD低、中、高剂量组。吗啡组和阿司匹林组腹腔注射(ip)给药后0.

5、5h，其余各组ip给药后2h，每鼠右后足跖皮下注射0.25%福尔马林10μl。分别记录注射后0～5min(第一时相)和15～30min(第二时相)小鼠舔或抖被注射足的累计时间，以秒(s)为计算单位。1.3小鼠侧脑室注射法〔6〕小鼠40只，随机分为4组，分别为对照组、吗啡组、CAD组、CAD同容积腹腔注射组。固定小鼠后，使用10μl微量注射器，针头外连细长硬塑料管，硬塑料管接4号针头，使针尖部露出约2.5mm的进针长度，于两耳前缘线与矢状线交点处的前、外各2mm处进针注射0.5%伊文思蓝生理盐水溶液，注射容积10μl

6、，时间5s，留针10s，处死小鼠，解剖观察伊文思蓝是否进入脑室，以确定注射部位。按上述方法进行小鼠侧脑室给药，然后以热板法分别测定给药后5、15、30、45、60min小鼠痛阈，观察镇痛效应。1.4CAD对甲醛所致伤害性疼痛模型小鼠血清NO含量和脑βEP含量的影响小鼠50只，雌雄各半，随机分5组，分别为阴性对照组、吗啡组、CAD低、中、高剂量组，每天分别腹腔注射，连续4d(吗啡组除外)，末次给药后(1.5h后阳性组腹腔注射吗啡10mg/kg)2h，每只鼠右后足跖皮下注射0.25%甲醛溶液20μl，2h后处理〔7〕

7、。将小鼠快速断头取血，分离血清，-20℃冰箱保存待测。小鼠头部立即于冰台上分离全脑，投入沸生理盐水中煮4min，取出滤纸吸干、称重，制备10%脑组织匀浆，取上清液贮存于-20℃保存。采用硝酸还原酶法和放射免疫学方法分别测定血清中NO含量和脑组织中βEP的含量，具体步骤说明书。1.5统计学方法数据以x±s表示，采用SPSS10.1软件进行两组间t检验和多组间方差分析。2结果2.1CAD对小鼠福尔马林实验的影响小鼠一次性腹腔注射给药CAD30，60，120mg/kg，与对照组比较，CAD中、高剂量组使福尔马林实验第一

8、时相内舔或抖注射足累计时间明显减少(P0.01),.freelg/kg侧脑室给药能明显延长痛反应潜伏期(P0.05)，给药后15min开始显效(P0.01)，可持续到90min以上(P0.01)，而相同剂量ip则对痛反应潜伏期无明显影响。吗啡组给药后立即开始显效(P0.001)，在5～15min效应最显著(P0.001)，并可持续到90min以上(P0.05