热休克蛋白70在食道鳞状细胞癌中表达及其可能对凋亡的调控论文

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1、热休克蛋白70在食道鳞状细胞癌中表达及其可能对凋亡的调控论文.freela，squamouscell;immunohis-tochemistryAbstract:AIMTostudytheexpressionandsignificenceofHSP70inesophagussquamouscellcarcinomas.METHODSStreptavidin-Biotin-peroxidaseplex（SABC）methods，monoclonalantibodyagainstHSP70ployed.RE┐SULTSHSP70immunoreactivityouscellcarcino

2、ma.Theexpres-sionofHSP70inesophagussquamouscellcarcinomasignifi-cantdifferenceouscellcarcinoma（P0.05），andin20loouscellcarcinomasouscellcarci-nomas（P0.05）.CONCLUSIONHSP70aredifferentlyexpressedinmostofesophagussquamouscellcarcinomasandthatHSP70maytakepartinthemodulationofapoptosisinesophagussqua

3、mouscellcarcinomas.0引言食道鳞状细胞癌是一种常见的肿瘤，对食道鳞状细胞癌凋亡调变的研究具有一定意义.freel连续切片贴于经APES处理的载玻片.1.2方法（1）免疫组化SABC法步骤如下:①切片脱蜡至水后经30mLL-1H2O2室温封闭10min;②98℃微波炉修复抗原10min，冷却至室温;③滴加抗原修复液（武汉博士德公司），室温10min;④20mLL-1正常山羊血清封闭30min，甩去不洗;⑤滴加鼠抗人HSP70单克隆抗体（SIGMAdilution1∶100）4℃冰箱过夜，37℃孵育50min;⑥滴加生物素化羊抗鼠IgG（武汉博士德公司dilution1

4、∶100）40min;⑦滴加SABC复合物（武汉博士德公司dilution1∶100）40min;除④外每步后均以0.01molL-1（pH7.4）PBS振洗3次，每次5min;⑧DAB-H2O2显色5min，苏木精衬染，脱水透明，DPX封固;（2）对照实验:阳性对照为HSP70明确阳性淋巴瘤组织;PBS的代替一抗为阴性对照;（3）结果评定:标本无阳性反应细胞及背景同空白对照者为阴性;标本阳性细胞率介于0%～30%为（+）;标本阳性细胞率介于30%～60%为（）;标本阳性细胞率60%为（）.统计学处理:统计阳性标本例数，计算阳性率，各组阳性率的比较用χ2检验.2结果2.1HSP70阳

5、性物质呈棕色颗粒状，位于磷状细胞癌的胞核和胞质中，在肿瘤组织中阳性细胞以团巢分布为主（Fig1），部分呈局灶性分布，少数散在分布.图1略2.2HSP70的表达阳性率60例食道鳞状细胞癌中（Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ级各20例）HSP70阳性率为76.7%（46/160例），详细情况:Ⅰ级95.（19/20）其中阴性1例（-），弱阳性1例（+），阳性3例（），强阳性15例（）;Ⅱ级85.0%（17/20例）其中阴性3例，弱阳性1例，阳性11例，强阳性5例;Ⅲ级50.0%（10/20例）其中，阴性10例，弱阳性7例，阳性3例，强阳性0例.HSP70在Ⅰ和Ⅱ，Ⅱ和Ⅲ食道鳞状细胞癌相互间表达无显著差异（P0

6、.05）;但HSP70的表达在Ⅰ级明显强于在Ⅲ级的表达（P0.05）.3讨论目前关于HSP和凋亡的研究中存在不同观点.Gabai等［1］研究Ehrlich腹水癌（ehrlichascitescarci-noma，EAC）细胞时发现HSP70能促使癌细胞获得对凋亡的抵抗力.Samali等［2］转染HSP27或70的V937或L）患者的血细胞中，发现HSP70的水平与凋亡率间呈正相关.在60例食道鳞状细胞癌中，46例（76.7%）HSP反应阳性，在不同病例中其阳性反应存在差异，表明HSP不同程度地参与了大部分食道鳞状细胞癌的凋亡，HSP70在Ⅰ和Ⅱ，Ⅱ和Ⅲ食道鳞状细胞癌相互间表达程度无显

7、著差异，这表明HSP70的对凋亡作用在分化差别小的食道鳞状细胞癌中可能很相似.HSP70在Ⅰ级食道鳞状细胞癌中表达明显强于Ⅲ级的表达，提示HSP70的对凋亡作用在分化差别大的食道鳞状细胞癌中可能存在差异.级别低、分化程度高HSP70阳性表达强，反之，HSP70表达弱.近年来在肿瘤细胞增殖与凋亡关系的研究中，发现细胞增殖活跃往往凋亡也活跃.Carroll等［4］研究发现，星形瘤细胞恶性程度越高凋亡指数越大.本研究HSP70在分化程度高的食道鳞状细胞癌中表达强