热休克蛋白70在食道鳞状细胞癌中表达及其可能对凋亡的调控

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1、热休克蛋白70在食道鳞状细胞癌中表达及其可能对凋亡的调控摘要:目的研究热休克蛋白70（HSP70）在食道鳞状细胞癌中的表达与意义.方法采用鼠抗人HSP70单克隆抗体及免疫组织化学SABC法.结果在60例食道鳞状细胞癌中，HSP70表达46例（76.7%）.HSP70在食道鳞状细胞癌Ⅰ级中表达强于在食道鳞状细胞癌Ⅲ级中的表达（P<0.05）.结论HSP70在大部分食道鳞状细胞癌中有不同程度表达，HSP70可能参与食道鳞状细胞癌的凋亡调变;其表达与食道鳞状细胞癌分化有关.　　Keya，squamouscell;immunohis-tochem

2、istry　　Abstract:AIMTostudytheexpressionandsignificenceofHSP70inesophagussquamouscellcarcinomas.METHODSStreptavidin-Biotin-peroxidaseplex（SABC）methods，monoclonalantibodyagainstHSP70ployed.RE┐SULTSHSP70immunoreactivityouscellcarcinoma.Theexpres-sionofHSP70inesophagussquamousce

3、llcarcinomasignifi-cantdifferenceouscellcarcinoma（P>0.05），andin20loouscellcarcinomasouscellcarci-nomas（P<0.05）.CONCLUSIONHSP70aredifferentlyexpressedinmostofesophagussquamouscellcarcinomasandthatHSP70maytakepartinthemodulationofapoptosisinesophagussquamouscellcarcinoma

4、s.　　0引言　　食道鳞状细胞癌是一种常见的肿瘤，对食道鳞状细胞癌凋亡调变的研究具有一定意义，这方面的研究文献报道较少.为此我们用免疫组化SABC法，检测了HSP70在60例食道鳞状细胞癌中的表达.　　1材料和方法　　1.1材料60例食道鳞状细胞癌组织标本来自西京医院，全部病例均经病理诊断证实.其中Ⅰ级食道鳞状细胞癌20例，Ⅱ级20例，Ⅲ级20例.全部标本经40g・L-1甲醛固定，石蜡包埋，5μm连续切片贴于经APES处理的载玻片.　　1.2方法（1）免疫组化SABC法步骤如下:①切片脱蜡至水后经30mL・L-1H2

5、O2室温封闭10min;②98℃微波炉修复抗原10min，冷却至室温;③滴加抗原修复液（武汉博士德公司），室温10min;④20mL・L-1正常山羊血清封闭30min，甩去不洗;⑤滴加鼠抗人HSP70单克隆抗体（SIGMAdilution1∶100）4℃冰箱过夜，37℃孵育50min;⑥滴加生物素化羊抗鼠IgG（武汉博士德公司dilution1∶100）40min;⑦滴加SABC复合物（武汉博士德公司dilution1∶100）40min;除④外每步后均以0.01mol・L-1（pH7.4）PBS振洗3次，每次5mi

6、n;⑧DAB-H2O2显色5min，苏木精衬染，脱水透明，DPX封固;（2）对照实验:阳性对照为HSP70明确阳性淋巴瘤组织;PBS的代替一抗为阴性对照;（3）结果评定:标本无阳性反应细胞及背景同空白对照者为阴性;标本阳性细胞率介于0%～30%为（+）;标本阳性细胞率介于30%～60%为（）;标本阳性细胞率>60%为（）.统计学处理:统计阳性标本例数，计算阳性率，各组阳性率的比较用χ2检验.　　2.2HSP70的表达阳性率60例食道鳞状细胞癌中（Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ级各20例）HSP70阳性率为76.7%（46/160例），详细情况:Ⅰ级95.（1

7、9/20）其中阴性1例（-），弱阳性1例（+），阳性3例（），强阳性15例（）;Ⅱ级85.0%（17/20例）其中阴性3例，弱阳性1例，阳性11例，强阳性5例;Ⅲ级50.0%（10/20例）其中，阴性10例，弱阳性7例，阳性3例，强阳性0例.　　HSP70在Ⅰ和Ⅱ，Ⅱ和Ⅲ食道鳞状细胞癌相互间表达无显著差异（P>0.05）;但HSP70的表达在Ⅰ级明显强于在Ⅲ级的表达（P<0.05）.　　3讨论　　目前关于HSP和凋亡的研究中存在不同观点.Gabai等［1］研究Ehrlich腹水癌（ehrlichascitescarci-noma，E

8、AC）细胞时发现HSP70能促使癌细胞获得对凋亡的抵抗力.Samali等［2］转染HSP27或70的V937或L）患者的血细胞中，发现HSP70的水平